طرق التعقيم الفيزيائية.

وزارة الصحة في الاتحاد الروسي

الترخيص الصيدلاني العام

تعقيمOFS.1.1.0016.15

بدلا من الفن. GFالحادي عشر، العدد 2

تحدد دراسة دستور الأدوية العامة هذه طرق وشروط التعقيم المستخدمة في تحضير المنتجات الطبية المعقمة.

يُفهم العقم على أنه عدم وجود الكائنات الحية الدقيقة القابلة للحياة وجراثيمها.

التعقيم هو عملية التحقق من صحتها المستخدمة في تحضير أشكال الجرعات المعقمة لتحرير المنتج والمعدات والسواغات والتعبئة من الكائنات الحية الدقيقة وأبواغها.

عند تغيير ظروف التعقيم ، بما في ذلك عند تغيير حجم حمولة جهاز التعقيم ، من الضروري إعادة التحقق.

الطرق الموضحة أدناه قابلة للتطبيق لتعطيل البكتيريا والخمائر والعفن.

إذا أمكن ، يتم تعقيم المنتجات في العبوة النهائية (التعقيم النهائي).

في الحالات التي يتعذر فيها التعقيم النهائي ، يتم استخدام طريقة الترشيح الغشائي أو إنتاج الأدوية في ظل ظروف معقمة دون تعقيم لاحق للمنتج النهائي. بالإضافة إلى ذلك ، من الممكن إجراء معالجة الجسم (مثل التعقيم بأشعة جاما) في العبوة النهائية. في جميع الحالات ، يجب أن تضمن التعبئة والتغليف والإغلاق عقم الدواء طوال فترة الصلاحية بأكملها.

مستوى ضمان الاستقرار

بالنسبة للطرق الموضحة أدناه ، يُشار إلى مستوى ضمان العقم (SAL) إذا لزم الأمر.

مستوى ضمان التعقيم لعملية التعقيم هو درجة التأكيد التي تضمن بها العملية تعقيم جميع العناصر دفعة واحدة. بالنسبة لعملية معينة ، يتم تعريف مستوى ضمان العقم على أنه احتمال وجود عنصر غير معقم في الدُفعة. على سبيل المثال ، تعني قيمة SRL من 10 إلى 6 أن هناك احتمالًا لوجود كائن حي دقيق واحد على الأكثر في دفعة معقمة من 10 6 منتج نهائي. يتم تحديد مستوى ضمان عقم عملية التعقيم لمنتج معين أثناء عملية التحقق من الصحة.

طرق وشروط التعقيم

يمكن إجراء التعقيم بإحدى الطرق التالية أو مزيج منها.

1. الطرق الحرارية:

• بخار مشبع تحت الضغط (التعقيم بالبخار المضغوط) ؛
• الهواء الساخن (تعقيم الهواء).

1. الطرق الكيميائية:

• غازات؛
• محاليل مطهرة.

1. التعقيم بالترشيح (من خلال مرشحات ذات حجم المسام المطلوب).
2. طريقة التعقيم الإشعاعي.

يُسمح باستخدام تعديل أو مجموعة من هذه الطرق بشرط أن يتم التحقق من صحة عملية التعقيم المختارة لضمان كل من فعالية العملية وسلامة المنتج والتعبئة والإغلاق.

بالنسبة لجميع طرق التعقيم ، بما في ذلك عند استخدام الشروط القياسية ، للتأكد من استيفاء شروط التعقيم اللازمة لمجموعة المنتج بأكملها ، يتم إجراء المراقبة طوال عملية التعقيم في مراحل الإنتاج الحرجة.

التعقيم الحراري

التعقيم بالبخار المشبع تحت الضغط (التعقيم بالبخار المضغوط)

يتم التعقيم بالبخار المشبع عند درجة حرارة
120 - 122 درجة مئوية عند ضغط 120 كيلو باسكال وعند درجة حرارة 130-132 درجة مئوية عند ضغط 200 كيلو باسكال. غالبًا ما تستخدم هذه الطريقة في المحاليل المائية وأشكال الجرعات السائلة الأخرى في قوارير أو أمبولات أو أمبولات أو أنواع أخرى من العبوات محكمة الإغلاق ومعقمة مسبقًا. يتم التعقيم في أجهزة التعقيم بالبخار (الأوتوكلاف). يتم تسخين الظروف القياسية عند درجة حرارة 120 - 122 درجة مئوية لمدة 8-15 دقيقة. يعتمد وقت التعقيم على الخصائص الفيزيائية والكيميائية وحجم المنتج ، بالإضافة إلى المعدات المستخدمة (الجدول 1).

الجدول 1 - أوقات التعقيم لأحجام مختلفة من المحلول

يتم تعقيم الدهون والزيوت على درجة حرارة 120 - 122 درجة مئوية لمدة ساعتين.

المنتجات المصنوعة من الزجاج والبورسلين والمعدن والضمادات والمواد المساعدة ، إذا لزم الأمر ، الملابس التكنولوجية الصحية ، يتم تعقيمها عند درجة حرارة 120-122 درجة مئوية - لمدة 45 دقيقة ، في
130-132 درجة مئوية - لمدة 20 دقيقة. لتعقيم منتجات المطاط ، استخدم أول هذه الأوضاع.

يُسمح بمجموعات أخرى من الوقت ودرجة الحرارة إذا ثبت مسبقًا أن نظام التعقيم المختار يوفر المستوى الضروري والقابل للتكرار من قتل الميكروبات. يجب أن توفر الإجراءات المستخدمة مستوى ضمان للعقم لا يزيد عن 10 -6.

يتم تحميل الأوتوكلاف بطريقة تضمن اتساق درجة الحرارة طوال الحمولة. أثناء عملية التعقيم يجب تسجيل ظروف عملية التعقيم (درجة الحرارة والضغط والوقت). تُقاس درجة الحرارة عادةً باستخدام مزدوجات حرارية موضوعة في عبوات تحكم ، جنبًا إلى جنب مع المزدوجات الحرارية الإضافية الموضوعة في أبرد الأماكن في غرفة التعقيم ، والتي يتم تركيبها مسبقًا. يتم تسجيل ظروف كل دورة تعقيم ، على سبيل المثال ، في شكل مخطط زمني لدرجة الحرارة أو بطريقة أخرى مناسبة.

لتقييم فعالية كل دورة تعقيم ، من الممكن استخدام كل من المؤشرات الكيميائية (المدى الزمني) والبيولوجية.

تعقيم الهواء الساخن (تعقيم الهواء)

بالنسبة لطريقة التعقيم الحراري هذه ، يتم تسخين الظروف القياسية عند درجة حرارة لا تقل عن 160 درجة مئوية على الأقل
ساعاتين

لتعقيم المواد المسحوقة المقاومة للحرارة (كلوريد الصوديوم ، أكسيد الزنك ، التلك ، الطين الأبيض ، إلخ) أو الزيوت المعدنية والنباتية ، الدهون ، اللانولين ، هلام البترول ، الشمع ، إلخ ، يتم ضبط درجة الحرارة ووقت التعقيم حسب على كتلة العينة (الجدول 2 و 3).

الجدول 2 - شروط التعقيم للمساحيق المقاومة للحرارة

الجدول 3 - شروط تعقيم الزيوت المعدنية والنباتية والدهون واللانولين والفازلين والشمع ، إلخ.

يتم تعقيم المنتجات المصنوعة من الزجاج والمعدن والخزف ووحدات الترشيح المعقمة والمزودة بمرشحات وأجهزة استقبال الترشيح عند درجة حرارة 180 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة ، أو عند درجة حرارة 160 درجة مئوية لمدة 2.5 ساعة.

يستخدم تعقيم الهواء فوق 220 درجة مئوية بشكل شائع لتعقيم وإزالة الهواء من العبوات الزجاجية. في هذه الحالة ، يجب إثبات انخفاض بمقدار 3 مرات في كمية السموم الداخلية المقاومة للحرارة بدلاً من استخدام المؤشرات البيولوجية.

يمكن استخدام مزيج من الوقت ودرجة الحرارة إذا ثبت مسبقًا أن نظام التعقيم المختار يوفر المستوى الضروري والقابل للتكرار من قتل الميكروبات. يجب أن توفر الإجراءات المستخدمة مستوى ضمان للعقم لا يزيد عن 10 -6.

يتم إجراء تعقيم الهواء في خزانة خاصة للحرارة الجافة مع دوران قسري للهواء المعقم أو على معدات أخرى مصممة خصيصًا لهذا الغرض. يتم تحميل خزانة التعقيم بطريقة تضمن تجانس درجة الحرارة خلال الحمولة بأكملها. تُقاس درجة الحرارة في خزانة التعقيم عادةً باستخدام مزدوجات حرارية موضوعة في عبوات تحكم ، جنبًا إلى جنب مع مزدوجات حرارية إضافية موضوعة في أبرد الأماكن بخزانة التعقيم ، والتي يتم تركيبها مسبقًا. يتم تسجيل درجة الحرارة والوقت خلال كل دورة تعقيم. لتقييم فعالية كل دورة تعقيم ، من الممكن استخدام كل من المؤشرات الكيميائية (المدى الزمني) والبيولوجية.

التعقيم الكيميائي

يتم التعقيم الكيميائي بالغاز أو المحاليل.

تعقيم الغاز

يتم استخدام تعقيم الغاز فقط في حالة عدم إمكانية استخدام طرق أخرى. باستخدام طريقة التعقيم هذه ، يجب ضمان تغلغل الغاز والرطوبة في المنتج المعقم ، وكذلك إزالة الغازات اللاحقة وإزالة منتجات التحلل في المنتج المعقم إلى مستوى لا يسبب تأثيرًا سامًا عند استخدام الدواء. .

يتم إجراء التعقيم بالغاز في معقمات الغاز أو أجهزة ميكروانايروستات (جهاز محمول) مزودة بإمدادات الغاز ونظام إزالة الغاز بعد التعقيم. عادة ما يستخدم أكسيد الإيثيلين كغاز. نظرًا لخطورة الحريق العالية ، يمكن مزجه مع أي غاز خامل.

يتم التعقيم بالغاز وفقًا للأوضاع التالية:

• - أكسيد الإيثيلين: جرعة تعقيم 1200 مجم / دسم 3 ودرجة حرارة لا تقل عن
  18 درجة مئوية ، الرطوبة النسبية 80٪ ، وقت الانتظار - 16 ساعة (جهاز محمول) ؛
• - خليط من أكسيد الإيثيلين وبروميد الميثيل (1: 2.5):

أ) جرعة التعقيم 2000 مجم / دسم 3 ، درجة الحرارة 55 درجة مئوية ، الرطوبة النسبية 80٪ ، مدة الاحتفاظ 4 ساعات ؛

ب) جرعة التعقيم 2000 مجم / دسم 3 ، درجة حرارة لا تقل عن 18 درجة مئوية ، الرطوبة النسبية 80٪ ، مدة التعرض 16 ساعة.

يُسمح باستخدام أوضاع أخرى لتعقيم الغاز تم التحقق منها والتي تضمن تعقيم الجسم وسلامته.

يمكن أن يكون أكسيد الإيثيلين مطفرًا وسامًا ، خاصة عند استخدام مواد تحتوي على أيونات الكلوريد. نظرًا لسمية أكسيد الإيثيلين وبروميد الميثيل ، لا يُسمح باستخدام المنتجات المعقمة بواسطة هذه الغازات إلا بعد تفريغها ، أي التعرض في غرفة جيدة التهوية للكميات المتبقية المسموح بها المحددة في الوثائق التنظيمية.

تعتمد شروط التفريغ على الغرض وطريقة التطبيق وأبعاد المنتج ومواد المنتج والتعبئة والتغليف ، وهي محددة في الوثائق التنظيمية والفنية للمنتج.

إن أمكن ، يتم تسجيل المؤشرات التالية أثناء عملية التعقيم: تركيز الغاز ، والرطوبة النسبية ، ودرجة الحرارة ووقت التعقيم. يتم إجراء القياسات في المناطق التي تكون فيها ظروف التعقيم هي الأسوأ ، والتي يتم تحديدها أثناء عملية التحقق من الصحة.

يتم تعبئة المنتجات المعقمة في أكياس من فيلم البولي إيثيلين بسماكة 0.06 إلى 0.20 مم ، ورق برشمان ، إلخ. يوصى بهذه الطريقة للمنتجات المصنوعة من المطاط والمواد البوليمرية والزجاج والمعادن.

يتم التحقق من فعالية عملية تعقيم الغاز عند كل حمل باستخدام المؤشرات البيولوجية.

قبل تحرير كل دفعة ، يتم فحص العقم على عدد معين من العينات.

التعقيم الكيميائي بالمحاليل

يتم التعقيم الكيميائي بمحلول مطهر (بيروكسيد الهيدروجين والبيروكسيد). تعتمد فعالية التعقيم بالمحلول المطهر على تركيز المادة الفعالة ووقت التعقيم ودرجة حرارة محلول التعقيم.

عند التعقيم بمحلول بيروكسيد الهيدروجين 6 ٪ ، يجب أن تكون درجة حرارة محلول التعقيم 18 درجة مئوية على الأقل ، ووقت التعقيم 6 ساعات ؛ عند درجة حرارة 50 درجة مئوية - 3 ساعات.

عند التعقيم بمحلول 1٪ من deoxon-1 (بواسطة حمض البيروكسيتيك) ، يجب ألا تقل درجة حرارة محلول التعقيم عن 18 درجة مئوية ، ووقت التعقيم 45 دقيقة.

يتم إجراء التعقيم الكيميائي بمحلول مطهر في عبوات مغلقة مصنوعة من الزجاج أو البلاستيك أو أوعية مغطاة بالمينا السليمة ، مع غمر المنتج بالكامل في المحلول طوال مدة التعقيم. بعد ذلك ، يتم غسل المنتج بالماء المعقم تحت ظروف معقمة.

يتم استخدام طريقة التعقيم بمحلول مطهر للمنتجات المصنوعة من المواد البوليمرية والمطاط والزجاج والمعادن المقاومة للتآكل.

التعقيم بالترشيح

يمكن تعقيم بعض المكونات النشطة والمنتجات الطبية التي لا يمكن تعقيمها نهائيًا بأي من الطرق المذكورة أعلاه باستخدام مرشحات غشائية. تتطلب هذه المنتجات احتياطات خاصة. يجب أن تضمن عملية التصنيع وبيئة العمل التقليل من مخاطر التلوث الجرثومي إلى الحد الأدنى ويجب رصدها بانتظام. يجب تعقيم المعدات والتعبئة والإغلاق ، وحيثما أمكن ، المكونات بشكل مناسب. يوصى بإجراء الترشيح مباشرة قبل ملء العبوة. يتم تنفيذ العمليات بعد الترشيح في ظل ظروف معقمة.

يتم إجراء الترشيح المسبق من خلال مرشحات غشائية بحجم مسام لا يزيد عن 0.45 ميكرومتر. ثم يتم تمرير المحاليل من خلال مرشحات غشائية بحجم مسام اسمي لا يزيد عن 0.22 ميكرون ، قادرة على الاحتفاظ بما لا يقل عن 10 7 كائنات دقيقة الزائفة ديمينوتالكل سنتيمتر مربع من السطح. يمكن استخدام أنواع أخرى من المرشحات التي توفر نفس كفاءة الترشيح.

يتم تحديد ملاءمة المرشحات الغشائية عن طريق الاختبارات الميكروبيولوجية باستخدام الكائنات الدقيقة المناسبة ، على سبيل المثال الزائفة ديمينوتا(ATCC 19146 أو NCIMB 11091 أو CIP 103020). يوصى باستخدام 10 7 CFU / سم 2 على الأقل من سطح المرشح النشط. يجب تحضير معلق الكائنات الحية الدقيقة في مرق التربتون - الصويا ، والذي ، بعد المرور عبر المرشح ، يتم جمعه بطريقة معقمة وحضانة تحت ظروف هوائية عند درجة حرارة لا تزيد عن 32 درجة مئوية.

يتم تعريف مستوى الترشيح على أنه قيمة لوغاريتم تقليل التلوث الميكروبي (LDR). على سبيل المثال ، إذا تم الاحتفاظ بـ 107 كائنات دقيقة أثناء الترشيح من خلال مرشح غشائي بحجم مسام يبلغ 0.22 ميكرومتر ، فإن VLS يكون 7 على الأقل.

يجب مراعاة مستوى التلوث الجرثومي قبل الترشيح ، وإنتاجية المرشح ، وحجم دفعة المنتج ، ومدة الترشيح ، وتجنب تلوث المنتج بالكائنات الدقيقة من المرشح. يجب ألا تتجاوز فترة استخدام المرشح الوقت المحدد أثناء التحقق من صحة هذا المرشح بالاقتران مع منتج معين تمت تصفيته. لا تعيد استخدام المرشحات الغشائية.

يتم التحقق من سلامة المرشح الغشائي الجاهز للاستخدام قبل وبعد الترشيح عن طريق الاختبارات المناسبة لنوع المرشح ومرحلة التحقق ، على سبيل المثال ، اختبار التشبع ("نقطة الفقاعة") عن طريق طريقة تدفق الانتشار أو ضغط الضغط .

نظرًا للمخاطر المحتملة الأكبر من التعقيم بالترشيح مقارنة بطرق التعقيم الأخرى ، يوصى بالترشيح المسبق من خلال المرشحات الغشائية في الحالات التي لا يمكن فيها ضمان مستوى منخفض من التلوث الجرثومي بوسائل أخرى.

استلام الأدوية في ظروف معقمةبدون تعقيم لاحق للمنتج النهائي

الهدف من الحصول على المنتجات الطبية في ظل ظروف معقمة دون تعقيم لاحق للمنتج النهائي هو الحفاظ على تعقيم الدواء باستخدام مكونات ، تم تعقيم كل منها مسبقًا بإحدى الطرق الموضحة أعلاه. يتم تحقيق ذلك من خلال إجراء العملية في غرف من فئة معينة من النظافة ، وكذلك استخدام الظروف والمعدات التي تضمن التعقيم.

في ظل ظروف التعقيم ، يمكن القيام بما يلي: عملية ملء العبوة ، ووضع السد ، وخلط المكونات المعقمة ، متبوعًا بالتعبئة المعقمة والسد. للحفاظ على عقم المكونات والمنتج النهائي أثناء عملية التصنيع ، يجب إيلاء اهتمام خاص لما يلي:

• - حالة بيئة الإنتاج ؛
• - العاملين؛
• - الأسطح الحرجة
• - تعقيم العبوات وإغلاقها وإجراءات النقل ؛
• - أقصى وقت تخزين مسموح به للمنتج حتى ملء العبوة النهائية.

يتضمن التحقق من صحة العملية التحقق المناسب من كل ما سبق ، بالإضافة إلى الضوابط المنهجية باستخدام اختبارات المحاكاة باستخدام وسائط الاستنبات التي تم تحضينها وفحصها بحثًا عن التلوث الجرثومي (اختبارات ملء الوسائط). قبل إطلاق كل دفعة من المنتج المُعقم بالفلتر و / أو المنتج المُصنَّع بطريقة معقمة ، يجب إجراء اختبار التعقيم على عدد مناسب من العينات.

طريقة التعقيم الإشعاعي

يتم تنفيذ طريقة التعقيم الإشعاعي عن طريق تشعيع المنتج بالإشعاع المؤين. يمكن استخدام هذه الطريقة لتعقيم المواد الخام العشبية الطبية والأدوية العشبية والأدوية العشبية وما إلى ذلك.

إشعاع جاما ، الذي يمكن أن يكون مصدره إما عنصر نظائر مشعة (على سبيل المثال ، كوبالت -60) أو شعاع إلكتروني مزود بمسرع إلكترون مناسب.

بالنسبة لطريقة التعقيم هذه ، يتم تحديد جرعة الامتصاص من
من 10 إلى 50 كجم. يمكن استخدام جرعات أخرى إذا ثبت مسبقًا أن النظام المختار يوفر المستوى الضروري والقابل للتكرار من فتك الكائنات الحية الدقيقة. يجب أن توفر الإجراءات والاحتياطات المستخدمة مستوى ضمانًا للعقم لا يزيد عن 10 -6.

تتمثل ميزة التعقيم الإشعاعي في قلة تفاعله وجرعة إشعاع يمكن التحكم فيها بسهولة ويمكن قياسها بدقة. يحدث التعقيم الإشعاعي عند درجة حرارة دنيا ، ومع ذلك ، قد تكون هناك قيود عند استخدام أنواع معينة من العبوات الزجاجية والبلاستيكية.

أثناء عملية التعقيم الإشعاعي ، يجب مراقبة الإشعاع الذي يمتصه المنتج النهائي باستمرار باستخدام طرق قياس الجرعات المقررة ، بغض النظر عن الجرعة. تتم معايرة مقاييس الجرعات مقابل مصدر قياسي في منشأة إشعاع مرجعي عند الاستلام من المورد ثم على فترات لا تتجاوز سنة واحدة.

إذا تم تقديم تقييم بيولوجي ، يتم تنفيذه باستخدام المؤشرات البيولوجية.

المؤشرات البيولوجية للتعقيم

المؤشرات البيولوجية هي مستحضرات معيارية لبعض الكائنات الحية الدقيقة تستخدم لتقييم فعالية عملية التعقيم.

عادةً ما يكون المؤشر البيولوجي عبارة عن أبواغ بكتيرية يتم تطبيقها على مادة حاملة خاملة مثل شريط من ورق الترشيح أو لوح زجاجي أو أنبوب بلاستيكي. يتم عزل المادة الحاملة الملقحة لمنع تلفها أو تلوثها ، وفي نفس الوقت ، لضمان ملامسة عامل التعقيم بالكائنات الحية الدقيقة. يمكن أن تكون المعلقات البوغية في أمبولات محكمة الإغلاق.

يتم إعداد المؤشرات البيولوجية بطريقة تضمن سلامتها في ظل ظروف معينة ؛ يجب أن يكون لديهم تاريخ انتهاء الصلاحية.

يمكن تلقيح نفس سلالات البكتيريا المستخدمة في إنتاج المؤشرات البيولوجية مباشرة في المنتج السائل المراد تعقيمه ، أو في منتج سائل مشابه لذلك الذي سيتم تعقيمه. في هذه الحالة ، يجب إثبات أن المنتج السائل ليس له تأثير مثبط على الجراثيم ، خاصة على إنباتها.

بالنسبة للمؤشر البيولوجي ، يتم توضيح الخصائص التالية: نوع البكتيريا المستخدمة ككائنات دقيقة مرجعية ؛ رقم السلالة في المجموعة الأصلية ؛ عدد الجراثيم القابلة للحياة لكل ناقل ؛ القيمة د.

قيمة د- قيمة معامل التعقيم (المدة أو الجرعة الممتصة) التي تقلل من عدد الكائنات الحية الدقيقة القابلة للحياة إلى 10٪ من عددها الأولي. هذه القيمة منطقية لظروف التعقيم التجريبية المحددة جيدًا. يجب أن يحتوي المؤشر البيولوجي على الكائنات الحية الدقيقة المحددة فقط. يُسمح باستخدام المؤشرات البيولوجية التي تحتوي على أكثر من نوع واحد من البكتيريا على ناقل واحد. يجب تقديم معلومات عن بيئة الاستزراع وظروف الحضانة.

يوصى بوضع المؤشرات في المناطق الأقل وصولًا لعامل التعقيم ، والتي تم تحديدها مسبقًا تجريبياً أو بناءً على قياسات فيزيائية أولية. بعد التعرض لعامل التعقيم ، يتم نقل حامل البوغ إلى وسط مغذي تحت ظروف معقمة.

يُسمح باستخدام المؤشرات البيولوجية للإنتاج الصناعي في أمبولات مغلقة ذات وسط مغذي ، توضع مباشرة في العبوة التي تحمي الناقل الملقح.

يتم اختيار الكائنات الدقيقة المرجعية للمؤشرات البيولوجية مع مراعاة المتطلبات التالية:

• - يجب أن تكون مقاومة سلالة الاختبار لطريقة تعقيم معينة أعلى من مقاومة جميع الكائنات الدقيقة المسببة للأمراض والكائنات الدقيقة الأخرى التي تلوث المنتج ؛
• - يجب أن تكون سلالة الاختبار غير مسببة للأمراض ؛
• - يجب أن تكون سلالة الاختبار سهلة الزراعة.

إذا لوحظ ، بعد الحضانة ، نمو الكائنات الحية الدقيقة المرجعية ، فهذا يشير إلى عملية تعقيم غير مرضية.

ميزات استخدام المؤشرات البيولوجية للتعقيم

التعقيم بالبخار المشبع تحت الضغط

يوصى باستخدام المؤشرات البيولوجية لمراقبة التعقيم بالبخار المشبع المضغوط في التحقق من دورات التعقيم. يوصى باستخدامه عصية stearothermophilus(على سبيل المثال ، ATCC 7953 أو NCTC 10007 أو NCIMB 8157 أو CIP 52.81). يجب أن يتجاوز عدد الجراثيم القابلة للحياة 5 × 10 5 لكل ناقل. قيمة دعند درجة حرارة 121 درجة مئوية يجب أن تكون أكثر من 1.5 دقيقة. عندما يتم معالجة مؤشر بيولوجي بالبخار عند درجة حرارة (121 ± 1) درجة مئوية تحت ضغط 120 كيلو باسكال لمدة 6 دقائق ، يجب مراعاة الحفاظ على الجراثيم القابلة للحياة ، ويجب أن يؤدي العلاج في نفس درجة الحرارة لمدة 15 دقيقة إلى الموت الكامل للكائنات الحية الدقيقة المرجعية.

تعقيم الهواء

موصى به لإعداد المؤشرات البيولوجية عصية الرقيقة(فمثلا، فار. النيجر ATCC 9372 أو NCIMB 8058 أو CIP 77.18). يجب أن يتجاوز عدد الأبواغ القابلة للحياة 1 × 10 5 لكل ناقل ، القيمة دعند درجة حرارة 160 درجة مئوية يكون 1-3 دقائق. غالبًا ما يستخدم الهواء الساخن عند درجات حرارة أعلى من 220 درجة مئوية لتعقيم معدات الزجاج وإزالة الهيدروجين منها. في هذه الحالة ، يمكن أن يعمل تقليل كمية السموم الداخلية البكتيرية المقاومة للحرارة بمقدار 3 مرات من الحجم كبديل للمؤشرات البيولوجية.

التعقيم الإشعاعي

يمكن استخدام المؤشرات البيولوجية لمراقبة العمليات الحالية كتقييم إضافي لفعالية جرعة معينة من الإشعاع ، خاصة في حالة التعقيم بواسطة الإلكترونات المتسارعة. يوصى بالنزاعات عصية بوميلوس(على سبيل المثال ، ATCC 27.142 أو NCTC 10327 أو NCIMB 10692 أو CIP 77.25). يجب أن يتجاوز عدد الأبواغ القابلة للحياة 1 × 10 7 لكل ناقل. قيمة ديجب أن يكون أكثر من 1.9 كيلو جرام. يجب التحقق من أنه بعد تشعيع المؤشر البيولوجي بجرعة 25 kGy (الحد الأدنى للجرعة الممتصة) ، لم يلاحظ أي نمو للكائنات الحية الدقيقة المرجعية.

تعقيم الغاز

يعد استخدام المؤشرات البيولوجية أمرًا ضروريًا لجميع إجراءات تعقيم الغاز ، سواء للتحقق من صحة الدورة أو للعمليات الروتينية. يوصى باستخدام الجراثيم عصية الرقيقة(فمثلا، فار. النيجر ATCC 9372 أو NCIMB 8058 أو CIP 77.18) عند استخدام أكسيد الإيثيلين. يجب أن يتجاوز عدد الجراثيم القابلة للحياة 5 × 10 5 لكل ناقل. معلمات الاستقرار هي كما يلي: دأكثر من 2.5 دقيقة لاختبار دورة عند 600 ملغم / لتر من أكسيد الإيثيلين و 54 درجة مئوية ورطوبة نسبية 60٪. يجب التحقق من أنه بعد دورة تعقيم مدتها 60 دقيقة بالمعلمات المحددة ، لا يلاحظ نمو للكائنات الدقيقة المرجعية ، بينما بعد دورة تعقيم مدتها 15 دقيقة عند درجة حرارة منخفضة (600 مجم / لتر ، 30 درجة مئوية ، 60٪ رطوبة ) ، يتم الحفاظ على صلاحية البوغ.

يجب أن يكون المؤشر البيولوجي قادرًا على اكتشاف الرطوبة غير الكافية في جهاز التعقيم والمنتج: عند تعرضه لأكسيد الإيثيلين بتركيز 600 مجم / لتر عند درجة حرارة 54 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة بدون رطوبة ، يجب الحفاظ على صلاحية البوغ .

وزارة التربية و العلوم

جامعة بلتيك الاتحادية

سميت بعد إمانويل كانت

كلية البيولوجيا

طرق التعقيم

طلاب السنة الثانية

تعليم دوام كامل

بانكينا أ.

فولوشينا إيه يو.

كالينينغراد

مقدمة …………………………………………………………………………………………… .. 3

طرق التعقيم …………………………………………………………………. …… 4

1 طرق التعقيم الفيزيائي ………………………………………… ..… .5

1.1 الاشتعال ………………………………………………………… .... …… ..5

1.2 التعقيم بالحرارة الجافة ……………………………………… .. …… ..5

1.3 التعقيم الحراري الرطب …………………………………………… ..5

1.4 الغليان ……………………………………………………………………… ... 5

1.5 التعقيم بالبخار ………………………………………… .... 6

1.6 التعقيم بالبخار ………………………………………………………… ... 6

1.7 التعقيم الجزئي …………………………………………… .. ……… .... 7

1.8 البسترة ………………………………………………………. ……… ... 7

1.9 التندل ……………………………………………… .. ……………… .. 7

2 طرق التعقيم الكيميائي ………………………………… .. …………… .8

2.1 الطريقة السائلة ……………………………………………. …………… .8

2.2 طريقة الغاز …………………………………………………. ……………… .8

2.3 البلازما ………………………………………………………. ………… .9

3 التعقيم بالإشعاع المؤين …………………………………………… 9

3.1 طريقة الإشعاع …………………………………………… .. ………… .. 10

3.2 الأشعة فوق البنفسجية …………………………………………… ... 10

مقدمة

التعقيم هو الإطلاق الكامل لأي كائن من جميع أنواع الكائنات الحية الدقيقة ، بما في ذلك البكتيريا وجراثيمها ، والفطريات ، والفيروسات ، وكذلك من بروتين البريون الموجود على الأسطح والمعدات والأغذية والأدوية. يتم تنفيذه بالطرق الحرارية والكيميائية والإشعاعية والترشيح.

خطوات التعقيم:

التطهير.

تنظيف ما قبل التعقيم (PSO) ؛

تعقيم.

طرق التعقيم

1 طرق التعقيم الفيزيائية

تشمل الطرق الفيزيائية للتعقيم تأثير درجة الحرارة المرتفعة على الأجسام المعقمة (التعقيم الحراري) ، وكذلك التعرض للأشعة فوق البنفسجية ، والتيارات عالية التردد ، والاهتزازات فوق الصوتية ، والإشعاع المشع ، والأشعة تحت الحمراء ، إلخ.

في ممارسة الصيدلة ، يتم استخدام الأساليب القائمة على التعرض لدرجات حرارة عالية فقط لتعقيم الأطباق والأدوية. يستخدم الإشعاع فوق البنفسجي بشكل أساسي لتطهير الهواء في مباني الصيدلية والحاويات والوصفات الطبية التي تدخل الصيدلية.

يعتمد استخدام درجة الحرارة العالية للتعقيم على التخثر غير القابل للانعكاس للبروتوبلازم ، وتدميرها الحمضي وتلف أنظمة الإنزيم للخلية الميكروبية. قد تختلف درجة الحرارة ومدة التسخين المطلوبة لتحقيق العقم تبعًا لنوع البكتيريا الدقيقة والظروف الأخرى.

تموت معظم مسببات الأمراض عند حوالي 60 درجة مئوية ، لكن جراثيمها يمكن أن تتحمل درجات حرارة أعلى بكثير. يقتل البخار المتدفق والماء المغلي الكائنات الحية الدقيقة بشكل أسرع ، ولكن العديد من الجراثيم تعيش لعدة ساعات في ظل هذه الظروف (خاصة في الوسائط اللزجة). بخار الماء النقي أقوى منه عند مزجه مع الهواء.

البخار المضغوط (عند درجات حرارة أعلى من 100 درجة مئوية) يقتل الكائنات الحية الدقيقة بشكل أسرع. يقتل الهواء الساخن الجاف البكتيريا وجراثيمها عند درجة حرارة أعلى من البخار. يعتمد اختيار الطريقة على خصائص الكائن المراد تعقيمه. عند اختيار طريقة التعقيم ، فإنهم يسعون جاهدين من أجل القضاء التام على البكتيريا الحية والجراثيم ، مع الحفاظ في نفس الوقت على المادة الطبية دون تغيير.

تكليس

يعتبر الاشتعال من أكثر أنواع التعقيم موثوقية. يتم تنفيذه في أفران دثر أو بوتقة عن طريق تسخين الجسم إلى 500-800 درجة أو عن طريق تكليسه على نار عارية. تستخدم لتعقيم إبر الحقن البلاتينية ، وفلاتر البورسلين وغيرها من أصناف البورسلين. لا ينصح بتعقيم الأشياء الفولاذية بهذه الطريقة لأنها تصدأ وتفقد قساوتها.

التعقيم الحراري الجاف

يتم تسخين الجسم المراد تعقيمه في فرن عند درجة حرارة 180 درجة مئوية لمدة 20-40 دقيقة أو عند 200 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة. تعمل الحرارة الجافة على تعقيم الأطباق الزجاجية والخزفية والدهون والهلام النفطي والجلسرين والمساحيق المقاومة للحرارة (الكاولين ، الستربتوسيد ، التلك ، كبريتات الكالسيوم ، أكسيد الزنك ، إلخ).

من المستحيل تعقيم المحاليل المائية في قوارير في خزانات التجفيف ، حيث يتحول الماء في درجات حرارة عالية إلى بخار ويمكن أن يتمزق الدورق.

التعقيم بالحرارة الرطبة

عند استخدام طريقة التعقيم هذه ، يتم الجمع بين تأثيرات ارتفاع درجة الحرارة والرطوبة. إذا تسببت الحرارة الجافة بشكل رئيسي في تدمير الكائنات الحية الدقيقة ، فإن الحرارة الرطبة تسبب تخثر البروتين ، الأمر الذي يتطلب مشاركة الماء.

في الممارسة العملية ، يتم إجراء التعقيم الحراري الرطب عند درجة حرارة 50-150 درجة ويتم تنفيذه بالطرق التالية.

الغليان

هذه الطريقة تعقم الأشياء المطاطية والأدوات الجراحية والأواني الزجاجية. لا يوصى باستخدام الغليان في تعقيم محاليل الحقن ، لأنه أدنى بكثير من التعقيم بالبخار من حيث الكفاءة.

التعقيم بالبخار

يسمى السائل بخار الماء المشبع (بدون خليط من الهواء) ، ويبلغ ضغطه 760 ملم زئبق. فن. ودرجة حرارة 100 درجة. يتم التعقيم بالبخار المتدفق في جهاز التعقيم بالبخار أو الأوتوكلاف عند 100 درجة مئوية لمدة 15-60 دقيقة ، اعتمادًا على حجم المحلول. هذه إحدى الطرق الشائعة لتعقيم المحاليل القابلة للحقن في الصيدليات.

التعقيم

التعقيم بالبخار تحت الضغط (التعقيم بالبخار). يتم تنفيذه في الأوتوكلاف من تصميمات مختلفة. الأوتوكلاف عبارة عن وعاء محكم الإغلاق يتكون من غرفة تعقيم ذات جدران سميكة وغطاء. يحتوي الأوتوكلاف على صمام أمان يسمح للبخار بالهروب عند الضغط الزائد ومقياس ضغط. يجب أن يحتوي كل جهاز تعقيم على تعليمات خاصة بتشغيله وصيانته ، بالإضافة إلى جواز سفر إشراف على الغلاية.

يتم وضع الجسم المراد تعقيمه داخل غرفة البخار. غرفة الماء معرضة للتسخين. أولاً ، يتم تسخين الأوتوكلاف مع فتح الصنبور حتى يتدفق البخار في تيار مستمر قوي ويزيل الهواء في الأوتوكلاف ، مما يقلل بشكل كبير من التوصيل الحراري لبخار الماء (مع محتوى 5٪ من الهواء في بخار الماء ، ينخفض بنسبة 50٪).

أثناء تسخين الأوتوكلاف بعد إغلاق الصمام ، من الضروري مراقبة الضغط ، بالتوازي مع زيادة درجة حرارة البخار.

التعقيم بالبخار هو أكثر طرق التعقيم موثوقية. عادة ما يتم التعقيم في الأوتوكلاف عند 119-121 درجة مئوية لمدة 5-30 دقيقة ، حسب حجم المحلول. هذا يضمن تعقيمًا كاملاً بشكل كافٍ ، بغض النظر عن نوع الكائنات الحية الدقيقة. وبالتالي ، يتم تعقيم الأطباق والفلاتر الورقية والزجاجية والأدوات والمحاليل المائية للمواد الطبية المقاومة للحرارة العالية والضمادات.

التعقيم الجزئي

في التعقيم الجزئي ، يتم تسخين جسم (عادة محلول مائي) ببخار سائل عند 100 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة ، ثم يتم الاحتفاظ بالمحلول في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة ، وبعد ذلك يتم تعقيمه مرة أخرى في نفس الظروف (30 دقيقة عند 100 درجة مئوية). تتكرر الدورة الموصوفة 3-5 مرات. أثناء التسخين الأول ، تموت الأشكال النباتية للكائنات الحية الدقيقة ، وأثناء التسخين اللاحق ، ظهرت الأشكال النباتية الجديدة. نادرا ما تستخدم هذه الطريقة في الصيدليات بسبب المدة.

بسترة

تسخين واحد للجسم عند درجة حرارة 60 درجة لمدة ساعة واحدة أو عند درجة حرارة 70-80 درجة لمدة 30 دقيقة. يسمح لك بتدمير الأشكال النباتية للميكروبات (باستثناء المحبة للحرارة) ، ولكن ليس الجراثيم.

التندال

التندال (البسترة الجزئية). أثناء عملية الاستدلال ، يتم تسخين الجسم عند درجة حرارة 60-65 درجة لمدة ساعة واحدة يوميًا لمدة 5 أيام أو عند 70-80 درجة لمدة 3 أيام. هذه طريقة موثوقة ولطيفة لتعقيم المواد الطبية القابلة للتحلل بالحرارة. ومع ذلك ، نظرًا لمدته ، فهو غير مناسب جدًا للصيدليات ولا يستخدم أبدًا في الصيدليات.

طرق التعقيم الكيميائية

طريقة السائل

بمساعدة التعقيم السائل ، تتم معالجة المنتجات المصنوعة من مواد حساسة للحرارة. تتم المعالجة باستخدام محاليل كيميائية خاصة باستخدام الكاميرات.

إنها وعاء من الفولاذ المقاوم للصدأ بغطاء ورف مثقوب. تتم معالجة الأدوات تحت تأثير محلول خاص يمكن تسخينه إذا لزم الأمر.

يمكن أيضًا استخدام هذه الغرف لتخزين الأدوات ونقلها.

طريقة الغاز

يتم تعقيم الغاز بواسطة طرق أكسيد الإيثيلين والفورمالديهايد. لذلك ، يتم استخدام تركيبات ثابتة خاصة.

طريقة أكسيد الإيثيلين مناسبة تمامًا لمعالجة منتجات البلاستيك والبوليمر والبصريات. يتم تنفيذه باستخدام غرفة غاز خاصة. يتم إخراج الهواء من الغرفة ، ويتم معالجة الأشياء الموضوعة فيها بالغاز.

تعتبر طريقة الفورمالديهايد أكثر ملاءمة للتطهير ، حيث يتميز الفورمالديهايد بخصائص اختراق منخفضة. بالإضافة إلى ذلك ، يجب أن تصل درجة الحرارة في غرفة المعالجة إلى 80 درجة مئوية.

الميزة الرئيسية لطرق تعقيم الغاز هي وضع درجة الحرارة المنخفضة للعملية ، مما يجعل من الممكن معالجة الأدوات التي لا تسمح بالتعرض لدرجة الحرارة العالية والرطوبة.

تم تجهيز معقمات الغاز بنظام استخدام الغاز ، مما يجعلها غير ضارة لكل من البشر والبيئة. الجهاز مجهز بأجهزة تهوية مدمجة. يوجد عامل التعقيم في خراطيش محكمة الغلق قابلة للاستبدال ، والتي لا تفتح إلا عندما يكون الجهاز مغلقًا تمامًا.

بلازما

طريقة تعقيم البلازما هي الطريقة الأكثر حداثة وعملية والتي تسمح لك بمعالجة أي منتجات وأجهزة طبية حساسة للرطوبة ودرجة الحرارة. تعتمد هذه الطريقة على إنشاء بيئة مبيدات حيوية باستخدام بلازما منخفضة الحرارة ومحلول مائي من بيروكسيد الهيدروجين.

عند استخدام طريقة البلازما ، يتم تدمير جميع أنواع الكائنات الحية الدقيقة بأي شكل من الأشكال ، ولا يتم إنتاج نفايات سامة.

المعالجة في معقم البلازما هي عملية جافة ، تتم في درجات حرارة تصل إلى 60 درجة مئوية وتستمر من 35 دقيقة.

تجد هذه الطريقة أوسع تطبيق في معالجة الأنظمة البصرية ، والمنتجات المصنوعة من مواد البوليمر ، والأدوات والكابلات الكهربائية ، والمناظير والأدوات ذات الصلة ، وأجهزة الاستشعار ، والغرسات وغيرها من المنتجات.

تعد طريقة البلازما واحدة من أكثر الطرق صلة وموثوقية اليوم.

التعقيم بالأشعة المؤينة

طريقة الإشعاع

تُستخدم الطريقة الإشعاعية أو التعقيم الإشعاعي بأشعة في تركيبات خاصة للتعقيم الصناعي أحادي الاستخدام - محاقن البوليمر وأنظمة نقل الدم وأطباق بتري والماصات وغيرها من المنتجات الهشة والقابلة للحرارة.

الأشعة فوق البنفسجية

لعدد من السنوات ، تم استخدام الأشعة فوق البنفسجية (الطول الموجي 253.7 نانومتر) في التكنولوجيا الصيدلانية للتعقيم. مصادر الأشعة فوق البنفسجية - مصابيح الكوارتز الزئبقية. يعتمد تأثيرها الجراثيم القوي على مصادفة طيف انبعاث المصباح وطيف امتصاص الحمض النووي للكائنات الحية الدقيقة ، والتي يمكن أن تكون سبب وفاتها أثناء التعرض الطويل لإشعاع مصباح الكوارتز. مع تأثير الأشعة فوق البنفسجية غير القوي في الخلية بدائية النواة ، يتم تنشيط عمليات الإصلاح الفاتح والداكن ، ويمكن للخلية أن تتعافى. تستخدم الطريقة لتعقيم إمدادات الهواء وتهوية العادم ، والمعدات في البكسات ، وكذلك لتعقيم الماء المقطر.

الغليان طريقة تعقيم تضمن التعقيم بشرط عدم وجود جراثيم في المادة المعقمة. يتم استخدامها لمعالجة محاقن الأدوات والأواني الزجاجية والمعدنية والأنابيب المطاطية ، إلخ.

عادة ما يتم التعقيم بالغليان في معقم - صندوق معدني مستطيل بغطاء محكم الإغلاق. توضع المادة المراد تعقيمها على الشبكة في جهاز التعقيم وتعبئتها بالماء. لزيادة درجة الغليان والتخلص من عسر الماء ، أضف 1-2٪ بيكربونات الصوديوم (يفضل استخدام الماء المقطر). يتم غلق المعقم بغطاء وتسخينه ، وتعتبر بداية التعقيم لحظة غليان الماء ، ومدة الغليان 15-30 دقيقة. في نهاية التعقيم ، يتم إزالة الشبكة التي تحتوي على أدوات بواسطة المقابض الجانبية بخطافات خاصة ، ويتم أخذ الأدوات الموجودة بها بملاقط أو ملقط معقم يتم غليه مع باقي الأدوات.

يتم التعقيم بالبخار بطريقتين: 1) بخار تحت الضغط. 2) تدفق البخار.

التعقيم بالضغط البخاريأنتجت في الأوتوكلاف. تعتمد طريقة التعقيم هذه على تأثير بخار الماء المشبع على المواد المعقمة عند ضغط أعلى من الغلاف الجوي. نتيجة لهذا التعقيم ، يموت كل من الأشكال النباتية والجراثيم للكائنات الحية الدقيقة خلال علاج واحد.

الأوتوكلاف (الشكل 12) - مرجل ضخم ، مغطى بغلاف معدني من الخارج ، مغلق بإحكام بغطاء ، وهو مشدود بإحكام إلى المرجل بمسامير مفصلية. يتم إدخال قطر آخر أصغر ، يسمى غرفة التعقيم ، في المرجل الخارجي. يتم وضع العناصر المراد تعقيمها في هذه الغرفة. يوجد بين الغلايتين مساحة خالية تسمى غرفة بخار الماء. يُسكب الماء في هذه الغرفة من خلال قمع مثبت من الخارج إلى مستوى معين ، محددًا على أنبوب خاص لقياس المياه. عند غلي الماء في غرفة بخار ، ينتج البخار. تم تجهيز غرفة التعقيم بمقبض مخرج مع صمام أمان للهروب من البخار عندما يرتفع الضغط فوق المستوى المطلوب. يستخدم مقياس الضغط لتحديد الضغط الناتج في غرفة التعقيم.

أرز. 12. مخطط الأوتوكلاف. م - مقياس الضغط الكمبيوتر - صمام الأمان ب - قمع الماء ؛ K 2 - صنبور لإخراج الماء ؛ K 3 - انقر لتحرير البخار

يؤخذ الضغط الجوي الطبيعي (760 مم زئبق) على أنه صفر. هناك علاقة معينة بين قراءات مقياس الضغط ودرجة الحرارة (الجدول 2).

الجدول 2. وضع تشغيل الأوتوكلاف

الأوتوكلاف مع التحكم التلقائي في الوضع متوفرة الآن. بالإضافة إلى مقياس الضغط المعتاد ، فهي مزودة بمقياس ضغط للتلامس الكهربائي ، والذي يمنع الضغط من الزيادة فوق القيمة المحددة وبالتالي يضمن ثبات درجة الحرارة المطلوبة في الأوتوكلاف.

يتم تعقيم وسائط المغذيات المختلفة (باستثناء تلك التي تحتوي على بروتينات أصلية) والسوائل (محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر والماء وما إلى ذلك) بالبخار تحت الضغط ؛ الأجهزة ، خاصة تلك التي تحتوي على أجزاء مطاطية.

يتم تحديد درجة حرارة ومدة تعقيم وسائط المغذيات من خلال تكوينها ، المحدد في الوصفة لتحضير وسط المغذيات. على سبيل المثال ، يتم تعقيم الوسائط البسيطة (أجار ببتون اللحم ، مرق ببتون اللحم) لمدة 20 دقيقة عند 120 درجة مئوية (1 ضغط جوي). ومع ذلك ، عند هذه الدرجة من المستحيل تعقيم الوسائط التي تحتوي على بروتينات وكربوهيدرات ومواد أخرى يمكن تغييرها بسهولة عن طريق التسخين. يتم تعقيم الوسائط المحتوية على الكربوهيدرات جزئيًا عند 100 درجة مئوية أو في الأوتوكلاف عند 112 درجة مئوية (0.5 ضغط جوي) لمدة 10-15 دقيقة. يتم تعقيم السوائل المختلفة والأجهزة ذات الخراطيم المطاطية والمقابس والشموع والفلاتر البكتيرية لمدة 20 دقيقة عند 120 درجة مئوية (1 ضغط جوي).

انتباه! في الأوتوكلاف ، يتم أيضًا تحييد المادة المصابة. توضع الأكواب وأنابيب الاختبار التي تحتوي على مزارع من الكائنات الحية الدقيقة في دلاء معدنية خاصة أو خزانات بها ثقوب في الغطاء لاختراق البخار وتعقيمها في الأوتوكلاف عند 126 درجة مئوية (1.5 ضغط جوي) لمدة ساعة. يتم تعقيم الأدوات بنفس الطريقة بعد العمل مع البكتيريا التي تثير الجدل.

يُسمح فقط للأشخاص المدربين تدريبًا خاصًا بالعمل مع الأوتوكلاف ، والذين يجب عليهم اتباع القواعد المحددة في التعليمات المرفقة بالجهاز بصرامة ودقة.

تقنية الأوتوكلاف. 1. قبل العمل ، تحقق من إمكانية الخدمة لجميع الأجزاء ولف الصنابير.

2. من خلال قمع مثبت على الجزء الخارجي من الغلاية ، يتم سكب الماء (المقطر أو المغلي) حتى العلامة العلوية لزجاج مقياس الماء بحيث لا يتشكل هذا الميزان. الصنبور الموجود أسفل القمع مغلق.

3. توضع المادة المراد تعقيمها على شبكة خاصة في غرفة التعقيم. يجب عدم تحميل العناصر بإحكام شديد ، حيث يجب أن يمر البخار بينها بحرية ، وإلا فلن ترتفع درجة حرارتها إلى درجة الحرارة الصحيحة وقد تظل غير معقمة.

4. يتم فرك الحشية المطاطية على الغطاء بالطباشير من أجل إحكام أفضل.

5. الغطاء مغلق ومثبت بمسامير في جسم الأوتوكلاف ، والمسامير ملتوية في أزواج بالعرض.

6. افتح محبس العادم بالكامل لتوصيل غرفة التعقيم بالهواء الخارجي ، وابدأ في تسخين الأوتوكلاف. عادة ما يتم تسخين الأوتوكلاف بالغاز أو الكهرباء.

عندما يتم تسخين الأوتوكلاف ، يغلي الماء ، ويتصاعد البخار الناتج بين جدران الغلايات ومن خلال ثقوب خاصة في جدار الغلاية الداخلية (انظر الشكل 12) ، ويدخل إلى غرفة التعقيم ويخرج من خلال فتحة المخرج. أولا ، البخار يهرب مع الهواء الذي كان في الأوتوكلاف. من الضروري طرد كل الهواء من الأوتوكلاف ، وإلا فإن قراءة مقياس الضغط لن تتوافق مع درجة الحرارة في الأوتوكلاف.

يشير ظهور تدفق بخار قوي ومستمر إلى الإزالة الكاملة للهواء من الأوتوكلاف ؛ بعد ذلك ، يتم إغلاق محبس المخرج ويبدأ الضغط داخل الأوتوكلاف في الارتفاع تدريجياً.

7. تعتبر بداية التعقيم اللحظة التي تصل فيها قراءات مقياس الضغط إلى القيمة المحددة. يتم تنظيم التسخين بحيث لا يتغير الضغط في الأوتوكلاف لفترة معينة.

8. بعد انقضاء وقت التعقيم ، يتم إيقاف تسخين الأوتوكلاف ، ويتم إطلاق البخار من خلال محبس المخرج. عندما تنخفض إبرة مقياس الضغط إلى الصفر ، افتح الغطاء. لتجنب الحروق من البخار المتبقي في الأوتوكلاف ، افتح الغطاء نحوك.

يمكن التحقق من مستوى درجة الحرارة في الأوتوكلاف ، أي صحة مقياس الضغط. لهذا الغرض ، يتم استخدام مواد مختلفة لها نقطة انصهار معينة: أنتيبيرين (113 درجة مئوية) ، ريسورسينول وكبريت (119 درجة مئوية) ، حمض البنزويك (120 درجة مئوية). تُخلط إحدى هذه المواد بكمية ضئيلة من الصبغة (أرجواني أو أزرق ميثيلين) وتُسكب في أنبوب زجاجي محكم الإغلاق ووضعه في وضع عمودي بين المادة المراد تعقيمها. إذا كانت درجة الحرارة كافية ، ستذوب المادة وتتحول إلى لون الصبغة المقابلة.

للتحقق من فعالية التعقيم ، يتم وضع أنبوب اختبار بثقافة بوغ معروفة في الأوتوكلاف. بعد التعقيم ، يتم نقل الأنبوب إلى منظم الحرارة لمدة 24-48 ساعة ، ويلاحظ غياب أو وجود النمو. يشير غياب النمو إلى التشغيل الصحيح للجهاز.

التعقيم بالبخارأنتجت في جهاز كوخ. تُستخدم هذه الطريقة في الحالات التي يتغير فيها الجسم المراد تعقيمه عند درجة حرارة أعلى من 100 درجة مئوية.

جهاز Koch (المرجل) عبارة عن أسطوانة معدنية مغلفة من الخارج (لتقليل انتقال الحرارة) بالباد أو الأسبستوس. يتم غلق الاسطوانة بغطاء مخروطي مع فتحة للهروب من البخار. يوجد داخل الأسطوانة حامل يصل إلى مستوى سكب الماء. يتم وضع دلو به فتحة على الحامل ، حيث يتم وضع المادة المراد تعقيمها. يتم تسخين جهاز Koch بالغاز أو الكهرباء. يتم حساب وقت التعقيم من لحظة إطلاق البخار بقوة على حواف الغطاء ومن مخرج البخار. تعقيم لمدة 30-60 دقيقة. في نهاية التعقيم ، يتم إيقاف التسخين. يُزال الدلو الذي يحتوي على المادة من الجهاز ويُترك في درجة حرارة الغرفة حتى اليوم التالي. يتم إجراء الإحماء لمدة 3 أيام متتالية عند درجة حرارة 100 درجة مئوية لمدة 30-60 دقيقة. هذه الطريقة تسمى التعقيم الجزئي. أثناء التسخين الأول ، تموت الأشكال النباتية للميكروبات ، بينما تبقى الجراثيم. خلال النهار ، يكون للجراثيم وقت لتنبت وتتحول إلى أشكال نباتية تموت في اليوم الثاني من التعقيم. نظرًا لأنه من المحتمل أن بعض الجراثيم لم يكن لديها وقت للإنبات ، يتم الاحتفاظ بالمادة لمدة 24 ساعة أخرى ، ثم يتم إجراء تعقيم ثالث. لا يتطلب التعقيم بالبخار السائل في جهاز Koch تحكمًا خاصًا ، نظرًا لأن تعقيم وسائط المغذيات المحضرة يعمل كمؤشر على التشغيل الصحيح للجهاز. يمكن أيضًا إجراء التعقيم بالبخار في الأوتوكلاف مع فتح الغطاء وفتح مخرج التيار.

أسئلة الاختبار

1. ما هي وسائط الثقافة التي يمكن تعقيمها بالبخار؟

2. ما هو المعقم وكيف يعمل؟

3. لماذا يجب استخدام الماء المقطر في غليان التعقيم؟

4. وصف الجهاز وطريقة تشغيل الأوتوكلاف.

5. ما الذي يتم تعقيمه في الأوتوكلاف؟

6. ما الذي يتحكم في التعقيم الصحيح في التعقيم؟

7. ما هو التعقيم بالبخار؟

8. وصف جهاز جهاز كوخ.

9. ما هو الغرض من التعقيم الجزئي؟

ممارسه الرياضه

املأ النموذج.

يمكن أيضًا إجراء التعقيم الجزئي في آلة لفافة Koch.

يستخدم Koch Coagulator لتخثر مصل اللبن ووسائط مغذيات البيض ، وفي نفس الوقت مع ضغط الوسط ، يتم تعقيمه.

كوخ coilerعبارة عن صندوق معدني مسطح بجدران مزدوجة ، مغطى من الخارج بمادة عازلة للحرارة. يصب الماء في الفراغ بين الجدران من خلال فتحة خاصة موجودة في الجزء العلوي من الجدار الخارجي. يتم إغلاق الفتحة بسدادة يتم إدخال مقياس حرارة فيها. أغلق الجهاز بغلافين: زجاجي ومعدني. من خلال الغطاء الزجاجي ، يمكنك مراقبة عملية التخثر. يتم وضع أنابيب الاختبار مع الوسائط في الجزء السفلي من الملف في وضع مائل.

يتم تسخين اللفافة بالغاز أو الكهرباء. يتم تعقيم الوسائط مرة واحدة عند درجة حرارة 90 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة أو بشكل جزئي - 3 أيام متتالية عند 80 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة.

التندلة* - التعقيم الجزئي في درجات حرارة منخفضة - يستخدم للمواد التي يسهل تدميرها وتحريفها عند درجة حرارة 60 درجة مئوية (على سبيل المثال ، سوائل البروتين). يتم تسخين المادة المراد تعقيمها في حمام مائي أو في أجهزة خاصة بها ترموستات عند درجة حرارة 56-58 درجة مئوية لمدة ساعة لمدة 5 أيام متتالية.

* (تم تسمية طريقة التعقيم على اسم تيندال الذي اقترحها.)

بسترة- التعقيم عند 65-70 درجة مئوية لمدة ساعة ، مقترح من باستير لتدمير الأشكال غير البوغية من الميكروبات. قم ببسترة الحليب والنبيذ والبيرة وعصائر الفاكهة وغيرها من المنتجات. الحليب مبستر للتخلص من حمض اللاكتيك والبكتيريا الممرضة (البروسيلا ، المتفطرة السلية ، الشيغيلة ، السالمونيلا ، المكورات العنقودية ، إلخ). تقتل بسترة البيرة وعصائر الفاكهة والنبيذ الكائنات الحية الدقيقة التي تسبب أنواعًا مختلفة من التخمر. من الأفضل حفظ الأطعمة المبسترة في الثلاجة.

أسئلة الاختبار

1. ما هو الغرض من آلة لفائف Koch وجهازها؟

2. ما هي طرق التعقيم في اللفافة؟

3. ما هو tyndalization؟

4. ما هي البسترة؟

تقييم كفاءة عمل المطهرات والمطهرات. تقرير حساسية البكتيريا للأدوية المضادة للميكروبات

مقدمة.يعد تدمير الميكروبات الممرضة للإنسان من أهم المشاكل في الوقاية والعلاج من الأمراض المختلفة. لمكافحة الميكروبات ، يتم استخدام طرق التعقيم والمطهرات والتطهير والعلاج بمضادات الميكروبات. كل طريقة لها أهدافها الخاصة وشروط التطبيق.

الموضوع 7.1. طرق تقييم تأثير مضادات الميكروبات للعوامل الكيميائية والفيزيائية

مقدمة.عقم -نظام من التدابير التي تمنع إدخال (دخول) الكائنات الحية الدقيقة من البيئة إلى أنسجة أو تجاويف جسم الإنسان أثناء التلاعبات العلاجية والتشخيصية ، وكذلك في مواد البحث ، في وسائط المغذيات وثقافات الكائنات الحية الدقيقة في الدراسات المختبرية . يوفر Asepsis الامتثال لقواعد وأساليب العمل الصحية والصحية الخاصة ، فضلاً عن المعالجة الخاصة للأدوات والمواد وأيدي العاملين في المجال الطبي والمباني وما إلى ذلك. لغرض التدمير الجزئي (التطهير) أو الكامل (التعقيم) للميكروبات.

المطهرات- مجموعة من الإجراءات العلاجية والوقائية التي تهدف إلى تدمير الكائنات الحية الدقيقة التي يمكن أن تسبب عملية معدية في المناطق المتضررة من الجلد والأغشية المخاطية ، من خلال معالجتها بمواد مبيدات الميكروبات - المطهرات.

تعقيم- التدمير الكامل للكائنات الحية الدقيقة ، بما في ذلك الأشكال النباتية والجراثيم. هناك ثلاث مجموعات رئيسية من طرق التعقيم: الفيزيائية والميكانيكية والكيميائية. يعتمد اختيار الطريقة المستخدمة لحل مشكلة عملية على الشيء المراد تعقيمه.

التطهير- تطهير الأشياء البيئية. على عكس التعقيم ، يؤدي التطهير إلى موت معظم ، وليس كل ، أشكال الميكروبات ، وبالتالي لا يوفر سوى تقليل التلوث الميكروبي (التلوث) ، بدلاً من إزالة التلوث الكامل للجسم. لذلك ، فإن الأشياء التي تم تطهيرها ليست آمنة تمامًا.

▲ يخطط

▲ برنامج

1. مطهر ومطهر ومعقم. المطهرات والمطهرات.

2. عمل مضادات الميكروبات من العوامل الفيزيائية والكيميائية.

3. طرق التعقيم. جهاز يستخدم للتعقيم.

4. طرق مراقبة فعالية التعقيم وعمل المطهرات والمطهرات.

برهنة

1. الأجهزة المستخدمة في التعقيم: الأوتوكلاف ، الفرن ، الترشيح وجهاز التشعيع بالأشعة فوق البنفسجية.

لكن ممارسه الرياضهالطلاب

1. مراعاة نتائج التجارب التي أجريت على كائنات الاختبار البكتيرية للتحكم في فعالية التعقيم الذي يتم عن طريق الغليان والتعقيم. للوصول إلى استنتاج.

2. تحديد التأثير المضاد للبكتيريا للأشعة فوق البنفسجية على المكورات العنقودية والإشريكية القولونية باستخدام المحاصيل الجاهزة.

3. تأخذ في الاعتبار نتائج التجارب التي تم إعدادها لتحديد التأثير المضاد للميكروبات للمواد المطهرة والمطهرة. للوصول إلى استنتاج.

القواعد الارشادية

طرق التعقيم

أولا الطرق الفيزيائية.التعرض لدرجات حرارة عالية. درجة الحرارة المرتفعة لها تأثير مبيد للجراثيم بسبب قدرتها على إحداث تمسخ لأهم البوليمرات الحيوية ، والبروتينات في المقام الأول.

التعقيم بالحرارة الجافة في خزانة تجفيف وتعقيم (أفران باستور)يعتمد على تأثير مبيد الجراثيم للهواء المسخن إلى 165-170 درجة مئوية لمدة 45 دقيقة. عند درجة حرارة أعلى ، يحدث تفحم في سدادات القطن ، والورق الذي يتم لف الأطباق به ، وعند درجة حرارة منخفضة ، يتطلب الأمر فترة تعقيم طويلة. تعمل الحرارة الجافة على تعقيم الأواني الزجاجية (أطباق بتري وأنابيب الاختبار والماصات وما إلى ذلك).

التعقيم- التعقيم بالبخار المحمص (تحت ضغط مرتفع) في معقم بالبخار (الأوتوكلاف). واحدة من أكثر طرق التعقيم فعالية ، والتي تستخدم على نطاق واسع ليس فقط في علم الأحياء الدقيقة ، ولكن أيضًا في الممارسة السريرية. يتطلب العمل باستخدام الأوتوكلاف التنفيذ الدقيق للتعليمات الخاصة والامتثال لقواعد السلامة. يتم قياس أقصى درجة حرارة للبخار بميزان حرارة خاص يوضع في الأوتوكلاف مع المادة المراد تعقيمها. في بعض الحالات ، يتم استخدام مواد كيميائية ذات نقطة انصهار محددة: benzonaphthol (PO ° C) ، حمض البنزويك (120 ° C). يتم تعقيم العديد من وسائط المغذيات والضمادات والكتان عند ضغط 1 ضغط جوي لمدة 15-20 دقيقة ، ويتم تعقيم الوسائط المغذية بالكربوهيدرات عند 0.5 ضغط جوي لمدة 15 دقيقة ، ويتم تطهير المواد المصابة عند 1.5-2 ضغط جوي لمدة 20-25 دقيقة (الجدول 7.1.1).

الجدول 7.1.1. العلاقة بين الضغط ودرجة الحرارة ومدة التعقيم في جهاز التعقيم بالبخار (الأوتوكلاف)

0100 30-60 (كسور) 0.5 111 20-30

1 121 15-20 1,5 127 15-20

التعقيم بالبخاريتم إجراؤها في الأوتوكلاف بغطاء غير مفكك ومخرج مفتوح. تعتمد طريقة التعقيم هذه على التأثير المضاد للبكتيريا للبخار على الخلايا النباتية. يتم استخدامه في الحالات التي لا تتحمل فيها المواد المراد تعقيمها درجات الحرارة المرتفعة ، مثل الوسائط المغذية بالفيتامينات والكربوهيدرات. للتطهير الكامل ، يتم استخدام مبدأ التعقيم الجزئي ، أي يتم تعقيم المادة عند 100 درجة مئوية (أو 80-90 درجة مئوية) لمدة 20-30 دقيقة لمدة 3 أيام متتالية. في هذه الحالة ، تموت الخلايا الخضرية ، وتبقى الجراثيم وتنبت في يوم واحد. التسخين المزدوج اللاحق يضمن عقم موثوق بما فيه الكفاية للمواد.

التندال -هو تعقيم جزئى للمواد عند 56-58 درجة مئوية لمدة 1 ساعة 5-6 أيام متتالية يستخدم لتعقيم المواد التى يسهل تدميرها فى درجات الحرارة العالية (مصل الدم ، الفيتامينات ، الخ).

اشتعال في اللهبموقد روح أو موقد غاز

التغيير محدود ، على سبيل المثال ، لتعقيم الحلقات البكتريولوجية وتشريح الإبر والملاقط.

التعرض للإشعاع المؤين. يعتمد تأثير مبيد الميكروبات للإشعاع المؤين على قدرتها على إحداث تلف في جزيء الحمض النووي. لتعقيم الأدوات الطبية التي تستخدم لمرة واحدة والمعدات البكتريولوجية الحساسة للتأثيرات الحرارية (أطباق بلاستيكية لزراعة الميكروبات ومزارع الخلايا ، والمحاقن البلاستيكية ، وأنظمة نقل الدم ، وما إلى ذلك) ، عادة ما يتم استخدام التعقيم بالإشعاع.

I. الطرق الميكانيكية.تعتمد على الترشيح من خلال مرشحات غشائية خاصة ذات حجم مسام صغير ، قادرة على الاحتفاظ ميكانيكيًا بالكائنات الحية الدقيقة. تستخدم مرشحات الورق والبوليمر على نطاق واسع في الممارسة المختبرية. توجد فلاتر ذات مسام بأحجام مختلفة ومعايرة بدقة ، مما يسمح لك بضمان تنقية المواد ليس فقط من البكتيريا ، ولكن أيضًا من الفيروسات ، وإذا لزم الأمر ، من بعض الجزيئات الكبيرة. يستخدم الترشيح لتعقيم المواد السائلة التي لا تتحمل الحرارة (مصل الدم ، ومحاليل مضادات الميكروبات ، ومكونات الوسائط المغذية للبكتيريا ومزارع الخلايا) ، للحصول على السموم البكتيرية وغيرها من نفايات البكتيريا. الترشيح هو الطريقة الرائدة لتعقيم الهواء عند الحاجة. للقيام بذلك ، يتم تمرير الهواء من خلال مرشحات مشربة بمبيدات الميكروبات. يتم استخدام أنظمة التعقيم هذه ، على سبيل المثال ، في الصناديق المكتبية للعمل مع مسببات الأمراض ذات العدوى الخطيرة بشكل خاص ، وكذلك في غرف العمليات وأجنحة الأمومة وما إلى ذلك.

ثالثا. الطرق الكيميائية.وهي تستند إلى معالجة الكائن بمواد كيميائية لها تأثير مبيد للجراثيم وقادرة ، وفقًا لأنماط معينة من التعرض ، على ضمان التدمير الكامل للنباتات الدقيقة. يستخدم التعقيم الكيميائي عادةً لمعالجة مختلف الأجهزة والأدوات القابلة لإعادة الاستخدام الحساسة لدرجات الحرارة المرتفعة (أجهزة الألياف الضوئية ، والغرسات الطبية ، وما إلى ذلك). تشمل عوامل التعقيم أكسيد الإيثيلين ، وبيروكسيد الهيدروجين ، وغلوتارالدهيد ، وحمض فوق أوكسي خليك ، وثاني أكسيد الكلور.

بغض النظر عن الطريقة ، فإن المراقبة المنتظمة لفعالية إجراء التعقيم مطلوبة في جميع الحالات. لهذا الغرض ، يتم استخدام المؤشرات البيولوجية - الكائنات الحية الدقيقة المعروفة الأكثر مقاومة لطريقة المعالجة هذه (على سبيل المثال ، الجراثيم Bacillus stearothermophilusللتحكم في كفاءة التعقيم ، العصوية الرقيقة- للتحكم في التعقيم الحراري الجاف). هناك أيضًا مؤشرات فيزيائية كيميائية - مواد تخضع للعيان

التغييرات التي أجريها (تغيير اللون وحالة التجميع وما إلى ذلك) فقط في حالة ملاحظة وضع المعالجة الصحيح.

طرق التطهير

تستخدم الطرق الفيزيائية والكيميائية للتطهير.

أولا الطرق الفيزيائية.التعرض لدرجات حرارة عالية
جولة.

الغليان.يتم وضع المحاقن والأدوات الجراحية الصغيرة والشرائح الزجاجية والأغطية وبعض العناصر الأخرى في المعقمات التي يتم سكب الماء فيها. لإزالة العسر وزيادة درجة الغليان ، يضاف 1-2٪ محلول بيكربونات الصوديوم إلى الماء. يتم الغليان لمدة 30 دقيقة على الأقل. عند الغليان ، تظل بعض الفيروسات (على سبيل المثال ، فيروس التهاب الكبد B) والجراثيم البكتيرية قابلة للحياة.

بسترةبناءً على التأثير المضاد للبكتيريا لدرجة الحرارة على الخلايا النباتية ، ولكن ليس على الجراثيم البكتيرية. يتم تسخين المادة عند درجة حرارة 50-65 درجة مئوية لمدة 5-10 دقائق ، ثم التبريد السريع ، وعادة ما يتم تعقيم المشروبات والمنتجات الغذائية (النبيذ والبيرة والعصائر والحليب وما إلى ذلك).

التعرض للإشعاع المؤين. الأشعة فوق البنفسجية(UV) ذات الطول الموجي 260-300 ميكرون له تأثير مبيد للجراثيم واضح إلى حد ما ، ومع ذلك ، فإن بعض أنواع الميكروبات والجراثيم مقاومة للأشعة فوق البنفسجية. لذلك ، فإن الأشعة فوق البنفسجية غير قادرة على ضمان التدمير الكامل للنباتات الدقيقة - تعقيم الجسم. عادةً ما يستخدم العلاج بالأشعة فوق البنفسجية للتطهير الجزئي (التطهير) للأجسام الكبيرة: أسطح الأشياء ، والغرف ، والهواء في المؤسسات الطبية ، والمختبرات الميكروبيولوجية ، إلخ.

أشعة غاماله تأثير مبيد للجراثيم واضح على معظم الكائنات الحية الدقيقة ، بما في ذلك الأشكال النباتية للبكتيريا وجراثيم معظم الأنواع والفطريات والفيروسات. تستخدم لتعقيم الأطباق البلاستيكية والأدوات الطبية التي تستخدم لمرة واحدة. يجب أن يؤخذ في الاعتبار أن العلاج بأشعة جاما لا يضمن تدمير العوامل المعدية مثل البريونات.

ثانيًا. الطرق الكيميائية.هذه هي معالجة كائن معقم
تامي - كيماويات مبيدات الميكروبات. بعض
قد يكون لبعض هذه المركبات تأثيرات سامة
على جسم الإنسان ، لذلك يتم استخدامها حصريًا
لمعالجة الأشياء الخارجية. كمطهر
عادة ما تستخدم بيروكسيد الهيدروجين ، المحتوية على الكلور
الوحدة (0.1-10٪ محلول مبيض ، 0.5-5٪ محلول
الكلورامين ، 0,1-10 ٪ محلول من ملح ثلثي أساسي من hypo-

كلورات الكالسيوم - DTSGK) ، الفورمالديهايد ، الفينولات (3-5٪ محلول الفينول ، اللايسول أو حمض الكربوليك) ، اليود. يعتمد اختيار المطهر وتركيزه على المادة المراد تطهيرها. قد يكون التطهير كافيًا لتطهير الأدوات الطبية فقط التي لا تخترق حواجز الجسم الطبيعية (مناظير الحنجرة ، مناظير المثانة ، أجهزة التنفس الصناعي). تستخدم بعض المواد (حمض البوريك ، ميرثيولات ، الجلسرين) كمواد حافظة لتحضير الأمصال العلاجية والتشخيصية واللقاحات والمستحضرات الأخرى.

طرق مطهرة

كمطهرات ، يتم استخدام المركبات ذات السمية المنخفضة للجسم فقط والتي لها تأثير مضاد للميكروبات. الأكثر شيوعًا هي 70٪ كحول إيثيل ، 5٪ محلول يود ، 0.1٪ محلول KMn0 4 ، محلول كحول 0.5-1٪ من الميثيلين الأزرق أو الأخضر اللامع ، 0.75-4.0٪ محلول كلورهيكسيدين ، 1-3٪ محلول سداسي كلوروفين وبعض الأنواع الأخرى مجمعات سكنية. كما تضاف العوامل المضادة للميكروبات إلى المواد المستخدمة في صناعة الضمادات ، والجص اللاصق ، وطقم الأسنان ، ومواد الحشو ، وما شابه ذلك. من أجل نقل خصائص مبيد للجراثيم لهم.

طرق مراقبة فعالية التعقيم وعمل المطهرات والمطهرات. دراسة التأثير المضاد للبكتيريا لدرجات الحرارة المرتفعة. ضع خيوط الحرير المبللة بمزيج من ثقافات مكونة للأبواغ (3 أنابيب اختبار) وغير مكونة للأبواغ (3 أنابيب اختبار) في أنابيب اختبار مع مرق المغذيات. الأوتوكلاف أو غلي أنبوب واحد مع كل ثقافة ؛ لا تعرض أنابيب التحكم لأي تأثير. بعد المعالجة ، احتفظ بجميع المحاصيل في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة ، ضع علامة على نتيجة التجربة واستنتج النتيجة.

السيطرة على عقم الضمادات والأدوات الجراحية. يتم زرع عينات الاختبار (أو المسحات من سطح الأدوات الكبيرة) على ثلاث وسائط: مرق السكر ، ووسط ثيوجليكول ، ووسط سابورو السائل. يتم تحضين المحاصيل في منظم الحرارة لمدة 14 يومًا. في حالة عدم وجود نمو في جميع المحاصيل ، تعتبر المادة معقمة.

دراسة التأثير المضاد للبكتيريا للأشعة فوق البنفسجية. تعليق المكورات العنقودية أو بكتريا قولونيةفي محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر بحجم 1 مل ، ضعها على مسافة 10-20 سم من مركز المصباح. تلقيح المعلقات البكتيرية المشعة وغير المشعة (الضابطة) في مرق المغذيات واحتضانها

عند 37 درجة مئوية لمدة 16-24 ساعة ، وبعد ذلك يتم تقييم النتائج: يرتبط عدم وجود تعكر في الوسط بموت الثقافة البكتيرية المشععة ، ويلاحظ التعكر في عنصر التحكم ، مما يشير إلى وجود النمو.

تحديد تأثير مضادات الميكروبات للمطهرات والمطهرات. 1. قم بإعداد نوعين من أجسام الاختبار: أ) خيوط الحرير المنقوعة في المزرعة بكتريا قولونية؛ب) خيوط الحرير المبللة بثقافة تشكيل الجراثيم (مع نسبة عالية من الجراثيم). ضع الخيوط في محاليل الفينول (5٪) ، اللايسول (5٪) ، المبيض (10٪) لمدة 5 و 60 دقيقة ، ثم اغسلها من مواد الاختبار ، وزرعها في مرق المغذيات وضعها في منظم حرارة حتى اليوم التالي. يجب عدم تعريض عينات المراقبة للمواد الكيميائية. لاحظ نتيجة التجربة واستخلص منها.

2. بلل أقراص ورق الترشيح بمحلول من مواد الاختبار وضعها على سطح أجار المغذيات في طبق بتري المصنف (مع العشب) مع مزرعة اختبار من المكورات العنقودية أو الإشريكية القولونية. احتضان الطبق لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية. يتم الحكم على التأثير المضاد للبكتيريا للمواد المدروسة من خلال قطر مناطق تثبيط نمو البكتيريا المتكونة حول الأقراص.

الموضوع 7.2. طرق تقييم فعالية عمل الأدوية المضادة للميكروبات

مقدمة. تستخدم مضادات الميكروبات (المضادات الحيوية الطبيعية والاصطناعية) لعلاج الأمراض التي تسببها الكائنات الحية الدقيقة. من أجل العلاج الفعال ، من الضروري اختيار دواء له أكبر نشاط ضد هذا العامل المعدي ولديه أقل ضرر على البكتيريا البشرية الطبيعية. إن التوزيع الواسع للسلالات البكتيرية بدرجات متفاوتة من المقاومة للعديد من الأدوية (المقاومة المتعددة) يجعل التقييم النوعي (طريقة القرص) والكمي (طريقة التخفيف التسلسلي) للحساسية البكتيرية للأدوية العلاجية وثيق الصلة بشكل خاص.

▲ البرنامج

1. أطياف عمل المجموعات الرئيسية للأدوية المضادة للميكروبات.

2. تقييم تأثير الأدوية المضادة للميكروبات على البكتيريا بطريقة القرص.

3. تحديد الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC) للأدوية المضادة للميكروبات بطريقة التخفيفات التسلسلية.

لكن.برهنة

1. مضادات الميكروبات من مجموعات مختلفة.

2. أقراص ورقية قياسية مشربة بعوامل مضادة للميكروبات لتحديد مدى حساسية البكتيريا لها.

3. جداول ومخططات أطياف مضادات الميكروبات لأهم مجموعات المضادات الحيوية وآليات عملها كمضاد للبكتيريا.

الاحالة للطلاب

1. قم بإعداد تجربة لتحديد حساسية المكورات العنقودية للمضادات الحيوية المختلفة باستخدام طريقة القرص.

2. بناءً على نتائج التجربة ، حدد الحد الأدنى للتركيز المثبط للبنسلين لمختلف الثقافات البكتيرية بطريقة التخفيفات التسلسلية.

القواعد الارشادية

التحديد الكمي لحساسية البكتيريا للأدوية المضادة للميكروبات عن طريق طريقة التخفيف المتسلسل ، وتستخدم هذه الطريقة لتحديد أدنى تركيز مثبط (MPC) - أقل تركيز للمضاد الحيوي الذي يثبط نمو البكتيريا المدروسة بشكل كامل. يتم تحضير محلول مخزون مضاد حيوي يحتوي على الدواء بتركيز معين (ميكروغرام / مل أو U / مل) في محلول فسيولوجي أو منظم أو في مذيب خاص. يستخدم محلول المخزون لتحضير تخفيفات متسلسلة (ضعفين) للمضاد الحيوي في وسط مغذي - مرق (بحجم 1 مل) أو أجار. يتم تحضير معلق بكثافة قياسية من مزرعة بكتيرية مدروسة ويتم تلقيح 0.1 مل في وسط بتركيزات مختلفة من المضاد الحيوي ، وكذلك على وسط بدون الدواء (التحكم في المزرعة). يتم تحضين الثقافات عند 37 درجة مئوية لمدة 20-24 ساعة أو أكثر (للبكتيريا التي تنمو ببطء) ، وبعد ذلك تُلاحظ نتائج التجربة لإغماء مرق المغذيات أو ظهور نمو مرئي للبكتيريا على الآجار ، مقارنة مع السيطرة. اتخذت على أنها IPC.

يؤخذ أعلى تركيز للدواء الذي يمنع تطور CPP أو تراكم مستضدات الممرض في الخلايا على أنه MIC.

تفسير النتائج ، أي تقييم الحساسية السريرية ، على أساس المعايير الواردة في الجدول. 7.2.1. تشمل السلالات الحساسة سلالات بكتيرية يتم تثبيط نموها بتركيزات الدواء الموجودة في مصل دم المريض عند استخدام الجرعات العلاجية المتوسطة من المضادات الحيوية. تشمل السلالات المقاومة بشكل معتدل السلالات التي يتطلب تثبيط نموها تركيزات يتم إنشاؤها في مصل الدم عند إعطاء الجرعات العلاجية القصوى من الدواء. الكائنات الحية الدقيقة مقاومة ، والتي لا يثبط نموها بواسطة الدواء بتركيزات تم إنشاؤها في الجسم عند استخدام الجرعات القصوى المسموح بها.

الجدول 7.2.1. ترجمةنتائج تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية بطريقة التخفيف المتسلسل

مضاد حيوي	MIC (ميكروغرام / مل)
	يشعر-	متوسط	مستقر-
	هيئة	دقيق	chivy
	(س)	(د	(ص)
البنسلينات
بنزيل بنسلين:
لِعلاج المكورات العنقودية	0.12 جنيه إسترليني	-	>0,25
لبكتيريا أخرى	<1,5		>1,5
أوكساسيلين
إلى عن على المكورات العنقودية الذهبية	<2	-	>4
لأنواع أخرى من المكورات العنقودية	<0,25	-	>0,5
ميثيسيلين	<2	-	>4
الأمبيسلين:
لِعلاج المكورات العنقودية	<0,25	-	>0,5
إلى عن على بكتريا قولونيةوالبكتيريا المعوية الأخرى	<8		>32
كاربينيسيلين:
إلى عن على بكتريا قولونيةوالبكتيريا المعوية الأخرى	<16		>64
إلى عن على الزائفة الزنجارية	<128		>512
بيبيراسيلين
إلى عن على بكتريا قولونيةوالبكتيريا المعوية الأخرى	<16		>64
إلى عن على الزائفة الزنجارية	>64	-	>182
أزلوسيلين	<64	-	>128
السيفالوسبورينات
سيفازولين	<8		>32
سيفالوتين	<8		>32
سيفاكلور	<8		>32
سيفالكسين	<8		>32
سيفوروكسيم	<8		>32

استمرار

متوسط (د

سيفاماندول		<8		>32
سيفوتاكسيم		<8	16-32	>64
سيفترياكسون		<8	16-32	>64
سيفوبيرازون		<16		>64
سيفتازيديم		<8		>32
سيفيبيمي	بيتا جديد	<8 -лактамы		>32
إميبينيم		<4		>16
Meropenem		<4		>16
	كينولون
حمض الناليديكسيك	SI6	-	>32
سيبروفلوكساسين		<1		>4
أوفلوكساسين		<2		>8
نورفلوكساسين		<4 юзиды		>16
	أمينوجلي
كاناميسين		<16		>64
الجنتاميسين		<4		>16
توبراميسين		<4		>16
أميكاسين		<16		>64
نيتلميسين		<8		>32
التتراسيكلين ، الماكروليدات ، اللينكوساميدات
التتراسيكلين		<2	4-8	>16
دوكسيسيكلين		<4		>16
الاريثروميسين		50,5	1-4	>8
أزيثروميسين		<2		>8
كلاريثروميسين		<2		>8
الياندوميسين		<2		>8
لينكومايسين		<2		>8
كليندامايسين		<0,25	0,5	>1
	المضادات الحيوية من مجموعات أخرى
الكلورامفينيكول (أسد	أوميسيتين)	<8		>32
حمض الفوسيديك		<2	4-8	>16
ريفامبيسين		<2		>8
بوليميكسين		<50 ЕД/мл		> 50 وحدة / مل
فانكومايسين		<4	8-16	S32
فورادونين		<32		>128

أنظمة الفحص الدقيق لتحديد الحساسية للأدوية المضادة للميكروبات.تم تصميم أنظمة الفحص الدقيق لتحديد الحساسية السريرية للمضادات الحيوية للبكتيريا من بعض الأنواع أو المجموعات ذات الصلة بسرعة. توجد الأدوية التي تم اختبارها بتركيزات قياسية في آبار الألواح البلاستيكية الجاهزة. يتم تحديد حساسية الثقافة المدروسة لتركيزين من كل مضاد حيوي: المتوسط ​​العلاجي والأقصى. يتم إدخال المادة من مستعمرة معزولة في 5 مل من وسط غذائي قياسي يحتوي على مؤشر باستخدام حلقة بكتريولوجية مقاسة (حجم 1 ميكرولتر) ، ويتم تحضير معلق. يُسكب المعلق البكتيري المحضر في آبار الجهاز اللوحي بمقدار 0.1 مل ويتم تحضينه تحت ظروف درجة الحرارة وتكوين الغاز للوسط الأمثل لهذا النوع من البكتيريا. يتم الحكم على نمو البكتيريا من خلال التغيير في لون المؤشر ، والذي يمكن أن يقلل بشكل كبير من وقت الدراسة. إذا ظلت البكتيريا قابلة للحياة في وجود مضاد حيوي ، فإن إطلاق المنتجات الأيضية يؤدي إلى تغيير لون المؤشر. يشير غياب تغير اللون إلى القمع الكامل للنشاط الحيوي للميكروب. يتم تحديد النتائج بعد 4 ساعات من الحضانة باستخدام مقياس الطيف الضوئي.

تحديد الحساسية السريرية للبكتيريا للأدوية المضادة للميكروبات بطريقة القرص (اختبار الانتشار). تعتمد الطريقة على قمع نمو البكتيريا على وسط غذائي كثيف تحت تأثير مضاد حيوي موجود في قرص ورقي. نتيجة لانتشار الدواء في الأجار ، يتشكل تدرج تركيز للمضاد الحيوي حول القرص. يعتمد حجم منطقة تثبيط النمو على حساسية البكتيريا وخصائص الدواء (على وجه الخصوص ، معدل الانتشار في الأجار). لتحديد الحساسية في الممارسة السريرية ، يتم استخدام أقراص قياسية جاهزة ذات محتوى محدد بدقة من المضادات الحيوية. يتم تحديد محتوى الدواء بناءً على التركيزات العلاجية لكل مضاد حيوي ومتوسط ​​قيم MIC للبكتيريا المسببة للأمراض. يشار إلى اسم الدواء وكميته على كل قرص. لتحديد الحساسية ، يتم تحضير معلق يحتوي على عدد معياري من الخلايا القابلة للحياة من الثقافة البكتيرية المدروسة وبذرها مع العشب في أطباق بتري (قطر 100 مم) على وسائط مولر-هينتون أو AGV (وسائط خاصة لا تمنع انتشار المواد المضادة للميكروبات وليس لها تأثير سلبي عليها). يتم وضع الأقراص على السطح المصنف بمساعدة قضيب على مسافة 2.5 سم من مركز الطبق في دائرة (الشكل 7.2.1). لا يتم وضع أكثر من 5 أقراص على الكوب. يتم تحضين المحاصيل لمدة 18-20 ساعة عند 35 درجة مئوية. إذا تم تنفيذ الإجراء بشكل صحيح ، على خلفية حديقة بكتيرية موحدة حول الأقراص ،

مناطق تثبيط النمو لها شكل دائري. يتم حساب النتائج عن طريق قياس قطر منطقة تثبيط النمو. بالنسبة للمنطقة المراد قياسها ، خذ المنطقة التي يكون فيها نمو البكتيريا غائبًا تمامًا. يتم تفسير النتائج التي تم الحصول عليها (الاستنتاج حول الحساسية) على أساس المعايير الواردة في الجدول. 7.2.2.

الجدول 7.2.2. تفسير نتائج تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية بطريقة القرص (على وسط AGV)

البنسلينات

بنزيل بنسلين:
عند اختبار المكورات العنقودية	20 جنيهًا إسترلينيًا	21-	-28	>29
عند اختبار بكتيريا أخرى	10 جنيهات إسترلينية	11-	-16	17 جنيهًا إسترلينيًا
الأمبيسلين:
عند اختبار المكورات العنقودية	<20	21-	-28	29 جنيهًا إسترلينيًا
عند اختبارها سالبة الجرام
البكتيريا والمكورات المعوية	<9	10-	-13	>14
كاربينيسيلين (25 ميكروغرام)	14 جنيهًا إسترلينيًا	15-	-18	>19
كاربينيسيلين (100 ميكروغرام) في
اختبار P. الزنجارية	11 جنيهًا إسترلينيًا	12-	-14	15 جنيهًا إسترلينيًا
ميثيسيلين	13 جنيهًا إسترلينيًا	14-	-18	>19
أوكساسيلين (10 ميكروغرام)	$15	16-	-19	20 جنيهًا إسترلينيًا
Azlocillin (ل P.aeruginosa)	13 جنيهًا إسترلينيًا	14-	-16	16 جنيهًا إسترلينيًا
بيبيراسيلين (ل P.aeruginosa)	<17			>18
أزترونام	<15	16-	-21	22 جنيهًا إسترلينيًا

السيفالوسبورينات

استمرار

مضاد حيوي	قطر الدائرة	مناطق التقزم
		(مم)
	يشعر-	متوسط	مستقر-
	هيئة	دقيق	chivy
	(س)	(د	(ص)
لاكتام بيتا جديدة
Imipenem *<13	14-15	>16
Meropenem *<13	14-15	>16
كينولون
سيبروفلوكساسين<15	16-20	>21
أوفلوكساسين<12	13-16	>17
حمض الناليديكسيك *<12	13-17	>18
أمينوغليكوزيدات
الستربتومايسين<16	17-19	>20
كاناميسين<14	15-18	>19
جنتاميسين 15 جنيهًا إسترلينيًا	-	>16
سيزوميسين<15	-	>16
توبراميسين<14	-	>15
أميكاسين<14	15-16	>17
نيتلميسين<12	13-14	>15
التتراسيكلين ، الماكروليدات ، اللينكوساميدات
التتراسيكلين<16	17-20	>22
دوكسيسيكلين<15	16-19	>20
الاريثروميسين<17	18-21	>22
أزيثروميسين<13	14-17	>18
روكسيثروميسين *<14	15-18	>19
كلاريثروميسين * 13 جنيهًا إسترلينيًا	14-17	>18
لينكومايسين<19	20-23	24 جنيهًا إسترلينيًا
Clindamycin 14 جنيهًا إسترلينيًا	15-20	>21
Oleandomycin 16 جنيه إسترليني	17-20	>21
المضادات الحيوية من مجموعات أخرى
الكلورامفينيكول<15	16-18	>19
حمض الفوسيديك<16	17-20	>21
ريفامبيسين<12	13-15	>16
بوليميكسين<11	12-14	>15
فانكومايسين:
لِعلاج المكورات العنقودية<11	-	>12
للمكورات المعوية<14	15-16	>17
ريستومايسين<9	10-11	>12
Furadonin £ 15	16-18	>19
Furagin £ 15	16-18	>19

*البيانات الأولية.

استخدام طريقة القرص له عدد من القيود. الطريقة مناسبة فقط لتحديد حساسية البكتيريا سريعة النمو التي تشكل عشبًا متجانسًا في غضون 24 ساعة على وسط مغذي قياسي كثيف بتركيبة بسيطة إلى حد ما (Muller-Hinton أو AGW) لا تحتوي على مواد يمكن أن تقلل من النشاط من المضادات الحيوية أو منع انتشارها. خلاف ذلك ، فإن المعلومات الواردة ستكون غير دقيقة.

وبالتالي ، لا يمكن استخدام طريقة القرص لتحديد مدى حساسية المضادات الحيوية لجميع البكتيريا بطيئة النمو والأكثر حساسية ، والتي تشمل العديد من مسببات الأمراض البشرية. (Mycobacterium spp. ، Helicobacter spp. ، Bacteroides spp. ، Prevotella spp. ، Brucella spp. ، Mycoplasma spp.واشياء أخرى عديدة). عند تحديد حساسية بعض أنواع البكتيريا شديدة الحساسية التي تم تطوير الاختبارات المعيارية لها (Haemophilus spp. ، Neisseria spp. ،أنواع معينة من المكورات العقدية) ، يجب استخدام وسائط الثقافة الخاصة والمعايير الإضافية عند تفسير النتائج.

لا تعطي طريقة القرص أيضًا نتائج موثوقة عند تحديد حساسية البكتيريا للمستحضرات التي تنتشر بشكل سيئ في أجار ، على سبيل المثال ، المضادات الحيوية متعددة الببتيد (بوليميكسين ، ريستومايسين).

التحديد الكمي لحساسية البكتيريا للأدوية المضادة للميكروبات باستخدام الاختبار الإلكتروني.الاختبار الإلكتروني هو نوع مختلف من طريقة الانتشار التي تسمح لك بتحديد الميكروفون للمضاد الحيوي. بدلاً من الأقراص ، يتم استخدام شرائح البوليمر القياسية ، المحضرة باستخدام تقنية خاصة (AB BIODISK) وتحتوي على عوامل مضادة للميكروبات مثبتة في شكل تدرج تركيز مستمر. على الجانب الآخر من الشريط

الجدول 7.2.3. تحديد MIC لمضادات الميكروبات بطريقة التخفيفات التسلسلية

يحتوي الاختبار الإلكتروني على مقياس لقيم IPC. عندما يتم وضع الشريط على سطح أجار ، تضمن عملية الانتشار الخاضعة للرقابة أن يتم إنشاء تدرج تركيز ثابت للعقار المطابق للمقياس في وسط المغذيات حول الشريط. يتم تنفيذ إجراء تحديد الحساسية باستخدام اختبار E بشكل مشابه للاختبار بواسطة طريقة القرص. بعد احتضان البذرة ، تتشكل منطقة تثبيط نمو بيضاوية الشكل حول الشريط. تتوافق قيمة IPC مع تقاطع المنطقة البيضاوية مع شريط الاختبار الإلكتروني. تستخدم المعايير القياسية لتفسير النتائج (تقييم الحساسية السريرية) (الجدول 7.2.3).

إيكولوجيا الكائنات الدقيقة

مقدمة.علم البيئة للكائنات الدقيقة هو فرع من علم الأحياء الدقيقة العام ويدرس العلاقة بين الكائنات الدقيقة والكائنات الحية التي تعيش معًا في بيئات حيوية معينة. في الموائل الطبيعية (التربة ، الماء ، الهواء ، الكائنات الحية) ، تعد الميكروبات جزءًا من التكاثر الحيوي المختلفة. يتم تحديد بيئة الميكروبات التي تسبب الأمراض البشرية من خلال قدرتها على البقاء على قيد الحياة في البيئة الخارجية ، وتغيير العوائل ، والاستمرار في الجسم المضيف على خلفية عمل الجهاز المناعي ، وترتبط أيضًا بطرق توزيعها ، انتقال ، وعدد من العوامل الأخرى. يعد تقييم عدد من الظروف البيئية إحدى المهام الرئيسية لعلم الأحياء الدقيقة الصحية.

البحوث الصحية والبكتريولوجية هي أساس العمل العملي لأطباء الصحة وعلماء الأوبئة في التقييم الصحي والصحي للأشياء البيئية والمنتجات الغذائية والمشروبات وما إلى ذلك. وتلعب دورًا رائدًا في الوقاية من الأمراض المعدية. من العناصر المهمة للدراسة في علم الأحياء الدقيقة الطبية البكتيريا الطبيعية لجسم الإنسان ، والتي تشمل الميكروبات التي تعيش على الجلد ، والأغشية المخاطية لمختلف الأعضاء (تجويف الفم ، والبلعوم ، والبلعوم الأنفي ، والجهاز التنفسي العلوي ، والأمعاء ، وخاصة الأمعاء الغليظة ، إلخ.). البعض منهم دائم (ملزم)سكان جسم الإنسان ، آخرون - مؤقت (اختياري أو مؤقت).البكتيريا الطبيعية هي نظام حيوي للجسم يوفر الحماية ضد العديد من الميكروبات المسببة للأمراض ، ونضوج وتحفيز جهاز المناعة ، وإنتاج عدد من الفيتامينات والإنزيمات المشاركة في الهضم ، وما إلى ذلك.

يتغير التركيب النوعي والكمي للنباتات الدقيقة البشرية طوال الحياة ويعتمد على الجنس والعمر والنظام الغذائي وما إلى ذلك. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن تكون التقلبات في تكوين البكتيريا البشرية بسبب حدوث الأمراض واستخدام الأدوية ، وفي المقام الأول المضادات الحيوية ومعدلات المناعة . إن تقييم التركيب النوعي والكمي للنباتات الدقيقة لجسم الإنسان وفقًا لبعض المؤشرات يجعل من الممكن تحديد انتهاكها (دسباقتريوز) والعواقب المرتبطة به.

الموضوع 8.1. ميكروفلورا من الماء والهواء والتربة. طرق الدراسة الصحية والبكتيرية للمياه والهواء والتربة

برنامج ز

1. الميكروفلورا من الماء والهواء والتربة.

2. الكائنات الحية الدقيقة الإرشادية الصحية وأهميتها.

3. طرق تحديد مؤشر if-index و if-titer والعدد الجرثومي للمياه.

4. طرق تحديد عدد الميكروبات في الهواء.

5. طرق تحديد عيار بيرفرينجنز ، عيار كولاي ، وعدد ميكروبات التربة.

لكنبرهنة

1. الفحص الصحي والبكتريولوجي للمياه بطريقة المرشحات الغشائية.

2. الفحص الصحي والبكتريولوجي للهواء. جهاز كروتوف. نمو الكائنات الحية الدقيقة على MPA في طبق بتري. نمو العقديات الحالة للدم على أجار الدم.

3. الدراسة الصحية والبكتريولوجية للتربة. نمو بروتيوس فولغاريس(بحسب شوكيفيتش).

أالاحالة للطلاب

1. لتقييم الحالة الصحية والبكتريولوجية للمياه بناءً على نتائج تحديد العدد الميكروبي ، مؤشر القولونية ونسبة القولونية.

2. لتقييم الحالة الصحية والبكتريولوجية للهواء بناءً على نتائج تحديد العدد الميكروبي.

3. لتقييم الحالة الصحية والبكتريولوجية للتربة على أساس نتائج تحديد عدد الميكروبات ، كولاي عيار ، عيار بيرفرينجنز ومعيار البكتيريا المحبة للحرارة.

4. تلقيح غسول من جلد اليدين على وسط الجلوكوز الببتون.

▲ إرشادات

الطرق الميكروبيولوجية لدراسة البيئة

لتقييم الحالة الصحية والصحية للعديد من كائنات البيئة والمياه والغذاء وما إلى ذلك ، يتم إجراء دراسات صحية وبكتريولوجية ، والغرض منها هو تحديد خطر الوباء. ومع ذلك ، فإن الاكتشاف المباشر للميكروبات المسببة للأمراض يرتبط بعدد من الصعوبات ، ويرجع ذلك أساسًا إلى انخفاض تركيز هذه الميكروبات ، والتي ، كقاعدة عامة ، لا يمكن أن تتكاثر في الهواء والماء والتربة. لذلك ، في الممارسة الصحية والميكروبيولوجية ، يتم استخدام طرق غير مباشرة ، بناءً على تحديد التلوث الميكروبي الكلي لجسم أو آخر وعلى اكتشاف ما يسمى البكتيريا الصحية(الجدول 8.1.1).

الجدول 8.1.1. البكتيريا الصحية الإرشادية للبيئة والغذاء

شيء	طبيعة التلوث	البكتيريا الإرشادية الصحية
ماء	برازي	بكتيريا مجموعة الإشريكية القولونية الإشريكية القولونية ، Citrobacter freundii ، Enterobacter aerogenes ، Enterococcus faecalis
التربة	نفس	نفس البكتيريا والمطثيات (Clostridium perfringens، CI. sporogenesوإلخ.)
	صناعي-كل يوم-	البكتيريا المحبة للحرارة ، بروتيوس
	vye (القمامة المتحللة)	الشائع
غذاء	برازي
منتجات		أقفال S. faecalis ، P. vulgaris
	بالتنقيط عن طريق الفم	المكورات العنقودية الذهبية
العناصر	برازي	البكتيريا من مجموعة با المعوية-
الحياة اليومية		أقفال P. vulgaris ، E. faecalis
	بالتنقيط عن طريق الفم	بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية
هواء	نفس	المكورات العنقودية الذهبية ، المكورات العنقودية الذهبية
ماء،	صناعي	سلالات الإنتاج الدقيقة
التربة،		الجلباب
هواء

الميكروبات الإرشادية الصحية ، مما يدل تلوث برازيالبيئة ، هي بكتيريا مجموعة Escherichia coli (CGB). ينتمون إلى أجناس مختلفة من الأسرة المعوية.يتم عرض العلامات التشخيصية التفاضلية لـ BGKP في الجدول. 8.1.2. يعتبر الكشف عن الإشريكية القولونية في أي منتجات بيئية أو غذائية المؤشر الأكثر موثوقية للتلوث البرازي الطازج. وجود البكتيريا Citrobacterو المعويةيشير إلى تلوث برازي قديم نسبيًا. يشير وجود كلوستريديوم بيرفرنجينز ، المطثية سبوروجينات ، والمطثيات الأخرى في التربة إلى تلوثها البرازي ، سواء كان طازجًا أو قديمًا ، لأن هذه البكتيريا تشكل جراثيم ، مما يسمح لها بالاستمرار في البيئة (على وجه الخصوص ، في التربة) من أجل وقت طويل. الكشف في الكائنات البيئية المكورات المعوية البرازيةيشير أيضًا إلى تلوثهم البرازي. تشتمل مجموعة البكتيريا المحبة للحرارة على بكتيريا غير مرتبطة ، وممثلين عن عائلات مختلفة يمكن أن تتكاثر عند درجة حرارة 60 درجة مئوية وما فوق. (Lactobacillus lactis ، Streptococcus thermophilusوإلخ.). إنهم ليسوا سكانًا دائمين للأمعاء البشرية ولا يعملون كمعايير للتلوث البرازي للبيئة. قد تشير الزيادة الحادة في عدد هذه البكتيريا إلى تلوث التربة بالنفايات المتحللة ، حيث تتكاثر في السماد الذاتي التسخين والسماد.

الجدول 8.1.2. علامات التشخيص التفريقي لـ BGKP

الإشريكيةمزيج + - +

القولونيةالأحماض

Citrobacterنفس + - ف + +

فريوندي

المعويةالبيوتان - - + - + +

الهوائياتديول

الرموز: (+) - رد فعل إيجابي ، (-) - رد فعل سلبي ، ف - تفاعلات مختلفة.

البكتيريا التي تنتمي إلى الجنس بروتيوس (P.vulgaris)إلخ) العائلات المعوية ،موزعة على نطاق واسع في الطبيعة. تم العثور على هذه البكتيريا المتعفنة بأعداد كبيرة على بقايا الحيوانات والنباتات المتحللة. يشير اكتشاف هذه البكتيريا في أي طعام تفوح منه رائحة العرق.

العقديات الحالة للدم (S.pyogenes) ،كونهم سكان عابرون للبلعوم الأنفي والبلعوم ، يتم إفرازهم بقطرات من المخاط عن طريق القطرات المحمولة جواً. لا تختلف شروط بقاء المكورات العقدية الحالة للدم في البيئة عمليًا عن المصطلحات المميزة لمعظم مسببات الأمراض الأخرى للعدوى المنقولة بالهواء. يشير اكتشاف المكورات العقدية الحالة للدم في الهواء الداخلي إلى احتمال تلوثها بالميكروبات الموجودة في البلعوم والبلعوم الأنفي والجهاز التنفسي العلوي للشخص والتي تعتبر عوامل مسببة للعدوى المنقولة بالهواء. المكورات العنقودية الذهبيةهو ساكن اختياري للبلعوم الأنفي والبلعوم وكذلك جلد الإنسان. وجوده في الهواء الداخلي أو على الأشياء الموجودة هناك مؤشر التلوث الجوي.يشير الاكتشاف المتزامن للمكورات العنقودية الذهبية والمكورات العقدية الحالة للدم إلى وجود درجة عالية من تلوث الهواء.

الفحص الصحي والبكتريولوجي للمياه

تحديد العدد الجرثومي للماء. يتم تلقيح ماء الصنبور بحجم 1 مل ، والماء من الخزانات المفتوحة - بأحجام 1.0 ؛ 0.1 و 0.01 مل. يتم إدخال جميع العينات في أطباق بتري المعقمة ، وبعد ذلك يتم سكبها مع 10-12 مل من السائل المنصهر وتبريدها إلى 45-50 درجة مئوية أجار مغذي ، والذي يتم بعناية

يخلط جيدًا بالماء. تحضن المحاصيل عند 37 درجة مئوية لمدة يوم أو يومين. يتم تلقيح المياه من الخزانات المفتوحة بالتوازي في سلسلتين من الأكواب ، أحدهما يحتضن عند 37 درجة مئوية لمدة يوم واحد ، والآخر لمدة يومين عند 20 درجة مئوية. ثم يتم حساب وحساب عدد المستعمرات المزروعة على السطح وفي عمق الوسط العد الميكروبي للماء- عدد الكائنات الحية الدقيقة في 1 مل.

تحديد عيار إذا - عيار و - إذا - الفهرس من الماء. كولي عيارالماء - الحد الأدنى من كمية الماء (مل) التي يتم فيها اكتشاف CGBs. مؤشر القولونية- كمية BGKP في 1 لتر من الماء. يتم تحديد هذه المؤشرات بواسطة طريقة المعايرة (التخمير) أو طريقة المرشحات الغشائية.

طريقة المعايرة. يتم تلقيح كميات مختلفة من الماء في وسط بيبتون الجلوكوز (1٪ ماء ببتون ، 0.5٪ محلول جلوكوز ، 0.5٪ محلول كلوريد الصوديوم ، مؤشر Andrede وعوامة) ، وللتلقيح بكميات كبيرة (100 و 10 مل) ، مركّز وسط يستخدم يحتوي على 10 أضعاف كمية هذه المواد.

يتم فحص مياه الخزانات السطحية المفتوحة بأحجام 100 ؛ عشرة؛ 1.0 و 0.1 مل. لدراسة ماء الصنبور ، يتم إنتاج المحاصيل في ثلاثة مجلدات بحجم 100 مل ، وثلاثة مجلدات من 10 مل وثلاثة مجلدات من 1 مل. يتم تحضين التطعيمات لمدة يوم واحد عند 37 درجة مئوية. يتم الحكم على التخمير من خلال وجود فقاعات غازية في العوامة. يتم استزراع العينات المخمرة أو الملبدة بالغيوم على وسط إندو. من المستعمرات المزروعة ، يتم عمل مسحات وملطخة وفقًا لطريقة الجرام ويتم إجراء اختبار أوكسيديز لتمييز بكتيريا الأجناس الإشريكية ، Citrobacterو المعويةمن البكتيريا سالبة الجرام من عائلة Pseudomonadaceae والبكتيريا الأخرى إيجابية أوكسيديز التي تعيش في الماء. لهذا الغرض ، تتم إزالة 2-3 مستعمرات معزولة من سطح الوسط بقضيب زجاجي ، يتم تطبيقه بضربة على ورق ترشيح مبلل بـ di-methyl-p-phenylenediamine. مع اختبار أوكسيديز سلبي ، لا يتغير لون الورق ، أما إذا كان موجبًا ، فإنه يتحول إلى اللون الأزرق في غضون دقيقة واحدة. يتم فحص قضبان سالبة الجرام التي لا تشكل أوكسيديز مرة أخرى في اختبار التخمير - يتم إدخالها في أجار المغذيات شبه السائلة مع 0.5 % محلول الجلوكوز وحضنت عند 37 درجة مئوية لمدة 1 يوم. إذا كانت النتيجة موجبة ، إذا تم تحديد العيار وإذا تم تحديد الفهرس وفقًا للجدول الإحصائي. 8.1.3.

طريقة تصفية الغشاء. يتم وضع مرشح الغشاء رقم 3 في قمع Seitz المركب في دورق بنسن ، وهو متصل بمضخة تفريغ. يتم تعقيم المرشحات الغشائية مسبقًا عن طريق الغليان في الماء المقطر. يتم تصفية المياه من شبكة إمدادات المياه والمياه من الآبار الارتوازية بحجم 333 مل. يتم ترشيح المياه النظيفة لخزان مفتوح بحجم 100 و 10 و 1.0 و 0.1 مل ، ويتم تخفيف المزيد من المياه الملوثة بالماء المعقم قبل الترشيح.

الجدول 8.1.3. تحديد مؤشر بكتريا مجموعة Escherichia coli في دراسة الماء

كولي عيار

من 3 مجلدات 100 مل

ماء. ثم يتم وضع المرشحات على سطح وسط إندو في أطباق بتري ، وبعد الحضانة عند 37 درجة مئوية لمدة يوم واحد ، يتم حساب عدد المستعمرات المزروعة النموذجية في CGBs. يتم تحضير المسحات من 2-3 مستعمرات حمراء ، ملطخة حسب طريقة الجرام ويتم تحديد نشاط أوكسيديز. للقيام بذلك ، يتم نقل المرشح الذي يحتوي على مستعمرات من البكتيريا المزروعة عليه بملاقط ، دون الدوران ، إلى دائرة من ورق الترشيح المبلل بـ dimethyl-p-phenylenediamine. في وجود أوكسيديز ، يتحول المؤشر إلى اللون الأزرق في المستعمرة. يتم تلقيح 2-3 مستعمرات لم يتغير لونها الأصلي في وسط شبه سائل بمحلول جلوكوز 0.5٪. يتم تحضين الثقافات لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية. في حالة وجود تكوين غاز ، يتم حساب عدد المستعمرات الحمراء على المرشح وتحديد مؤشر القولونية. ترد المؤشرات التنظيمية لمياه الشرب في الجدول. 8.1.4.

الجدول 8.1.4. معايير مياه الشرب (GOST 2874-82)

اساسي

فِهرِس

لا يزيد عدد الميكروبات في 1 مل من الماء عن 100

عدد البكتيريا من مجموعة Escherichia coli في 1 لتر من الماء 3

(if-index) ، لا أكثر

لتحديد العيار المكورات المعوية البرازيةتحضير 10 أضعاف التخفيفات من الماء. يتم تلقيح الماء الكامل ومخففاته بحجم 1 مل في أحد الوسائط الاختيارية السائلة (KF ، poly-

Mixinovaya ، وما إلى ذلك) ، التي تم تحضينها عند 37 درجة مئوية لمدة يومين ، بعد 24 و 48 ساعة يتم زرعها على وسائط تفاضلية اختيارية كثيفة: أجار KF ، أجار TTX (متوسط ​​مع ثلاثي فينيل تيترازوليوم كلوريد) ، أجار متعدد الزينتلوريت. يتم تحديد المكورات العقدية وفقًا. لنوع المستعمرات ومورفولوجيا الخلية والتلطيخ وفقًا لطريقة الجرام. على الوسط مع TTX ، تشكل العقديات مستعمرات حمراء داكنة ، على أجار مع تيلوريت - أسود.

تكوين وسائل الإعلام.وسط KF: 2٪ أجار المغذيات ، 1٪ مستخلص الخميرة ، 2٪ لاكتوز ، 0.4٪ أزيد الصوديوم ، 0.06٪ كربونات الصوديوم ، مؤشر أحمر برومكريزول.

وسط بوليميكسين: 2٪ أجار مغذي ، 1٪ مستخلص خميرة ، 1٪ جلوكوز ، بوليميكسين M 200 وحدة / مل ، مؤشر أزرق برومثيمول.

Polymyxintellurite agar: 2٪ أجار مغذي ، 1٪ مستخلص خميرة ، 1٪ جلوكوز ، كريستال بنفسجي 1: 800000 ، بوليميكسين M 200 U / مل ، 0.01٪ تيلوريت بوتاسيوم.

أجار ثلاثي فينيل تيترازوليوم كلوريد (TTC): 2٪ أجار مغذٍ ، 1٪ خلاصة خميرة ، 1٪ جلوكوز ، كريستال بنفسجي 1: 800،000 ، 0.01٪ TTC.

عند تحديد فهرس E.faecalisاستخدم الجداول الإحصائية المستخدمة في إنشاء مؤشر القولونية. بالإضافة إلى ذلك ، يتم استخدام طريقة الترشيح الغشائي لهذا الغرض. للكشف عن البكتيريا المسببة للأمراض ، يتم تمرير الماء من خلال المرشحات الغشائية ، والتي يتم وضعها بعد ذلك في وسط سائل اختياري أو على سطح وسط تشخيص تفاضلي كثيف.

الفحص الصحي والبكتريولوجي للهواء

تحديد عدد الميكروبات في الهواء.تعتمد الأساليب الميكروبيولوجية الكمية لدراسة الهواء على مبادئ الترسيب (الترسيب) أو الشفط أو الترشيح.

طريقة الترسيب. يُترك طبقان بتري مع أجار المغذيات مفتوحين لمدة 60 دقيقة ، وبعد ذلك يتم تحضين المحاصيل في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية ، ويتم تقييم النتائج من خلال العدد الإجمالي للمستعمرات المزروعة في كلا الطبقين: إذا كان هناك أقل من 250 خلية ، يعتبر الهواء نظيفًا ؛ تشير 250-500 مستعمرة إلى تلوث بدرجة متوسطة ، حيث يزيد عدد المستعمرات عن 500 - ملوثة.

طريقة الشفط. هذه طريقة كمية أكثر دقة لتحديد عدد الميكروبات في الهواء. يتم إجراء بذر الهواء بمساعدة الأجهزة. تم تصميم جهاز Krotov (الشكل 8.1.1) بحيث يمتص الهواء بسرعة معينة من خلال شق ضيق من لوح زجاجي يغلق طبق بتري بآجار المغذيات.

الشكل 8.1.1. جهاز كروتوف للبحوث البكتريولوجية

في هذه الحالة ، يتم تثبيت جزيئات الهباء الجوي التي تحتوي على كائنات حية دقيقة بشكل متساوٍ على كامل سطح الوسط بسبب الدوران المستمر للكوب تحت فتحة المدخل. بعد حضانة البذر في منظم الحرارة ، يتم حساب العدد الميكروبي وفقًا للصيغة:

أ × 1000س ~ ص

حيث a هو عدد المستعمرات المزروعة على الصفيحة ؛ V هو حجم الهواء الذي يمر عبر الجهاز ، dm 3 ؛ 1000 - حجم الهواء القياسي ، dm 3.

عند تحديد العدد الميكروبي للهواء ، يتم استخدام أجار المغذيات لعزل المكورات العقدية الحالة للدم مع إضافة البنفسج الجنطيانا ، متبوعًا بالفحص المجهري المتحكم وثقافة فرعية انتقائية للمستعمرات المشبوهة على أجار الدم.

تكوين وسائل الإعلام.أجار الدم البنفسجي الجنطيانا: 2٪ أجار مغذي ، 5-10٪ حصان منزوع الرجفان ، دم أرنب أو كبش ، جنطيانا بنفسجي (1: 50000).

أجار صفار الملح (YSA): 2٪ أجار مغذي ، 10٪ كلوريد صوديوم ، 20 % (بالحجم) تعليق صفار (صفار بيضة واحد لكل 200 مل من محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر).

يمكن أيضًا استخدام أجهزة أخرى لدراسة الهواء (Dyakov و Rechmensky و Kiktenko و PAB-1 - أخذ العينات -

نيك الهباء الجوي البكتريولوجي ، POV-1 - جهاز لأخذ عينات الهواء) ، وبمساعدته يتم تمرير حجم معين من الهواء عبر السوائل أو المرشحات ، ثم يتم قياس المحاصيل على وسائط المغذيات. يتيح استخدام PAB-1 و POV-1 فحص كميات كبيرة من الهواء واكتشاف البكتيريا والفيروسات المسببة للأمراض.

عند فحص الهواء في المستشفيات (الجراحة ، التوليد ، أمراض النساء ، إلخ) ، يتم عزل البكتيريا المسببة للأمراض والانتهازية - العوامل المسببة لعدوى المستشفيات (المكورات العنقودية ، الزائفة الزنجارية ، إلخ) بشكل مباشر. في حالة عدوى المستشفيات من مسببات المكورات العنقودية ، يتم إجراء دراسات تهدف إلى تحديد مصادر وطرق انتشار العدوى: عن طريق الكتابة بالعاثية ، يتم تحديد هوية المكورات العنقودية المعزولة عن الكائنات البيئية ، وكذلك من المرضى والمرافقين. المؤشرات القياسية لعدد الميكروبات ومحتواها Staphylococcus aureus، Quot؛ الفصل 2. المساعدة الاجتماعية الحكومية المقدمة في شكل تزويد المواطنين بمجموعة من الخدمات الاجتماعية 10 صفحة

Quot ؛ الفصل الثاني: المساعدة الاجتماعية التي تقدمها الدولة على شكل تزويد المواطنين بمجموعة من الخدمات الاجتماعية الصفحة 17

Quot ؛ الفصل الثاني: المساعدة الاجتماعية التي تقدمها الدولة على شكل تزويد المواطنين بمجموعة من الخدمات الاجتماعية الصفحة 18

التعقيم - (من عدم القدرة على الإنجاب) - هو التدمير الكامل للـ m / o وجراثيمها من خلال تأثير كل من العوامل الفيزيائية والمستحضرات الكيميائية. يتم التعقيم بعد تطهير PSO ومراقبة جودة PSO. التعقيم هو أهم رابط ، وهو الحاجز الأخير للوقاية من عدوى المستشفيات في مرافق الرعاية الصحية. يقي المريض من أي عدوى.

وثائق تنظم طرق التعقيم.

يجب أن نتذكر أنه من أجل إجراء التعقيم ، من الضروري معرفة القوانين والتعليمات والقواعد وغيرها من الوثائق التوجيهية والمنهجية في مجال السلامة المعدية والقدرة على تطبيقها. حاليًا ، معيار الصناعة ساري المفعول (الراحة. 42-21-8-85 ، التي تحدد طرق ووسائل وطرق تعقيم وتطهير الأجهزة الطبية ، والتي تكملها بالأمر رقم 408 "إرشادات منهجية للتطهير ، PSO والتعقيم والمستلزمات الطبية "، التي وافقت عليها وزارة الصحة الروسية في 30 ديسمبر 1998. رقم MU-287-113. هذه الوثائق إلزامية ومحددة لجميع المرافق الصحية وتوفر مجموعة واسعة من الوسائل والطرق الأنسب لظروف هذا المرفق.يمكن أن يتسبب الدم أو المستحضرات القابلة للحقن وأنواع معينة من الأدوات الطبية التي تتلامس مع الأغشية المخاطية أثناء العملية في تلفها.

تميز طرق التعقيم بين:

- بدني(حراري): بخار ، هواء ، زجاج ؛

- المواد الكيميائية: الغاز والكيماويات والإشعاع.

- البلازما والأوزون(مجموعة مواد كيميائية).

يعتمد اختيار طريقة أو طريقة أخرى للتعقيم على خصائص الكائن والطريقة نفسها - مزاياها وعيوبها. يتم تعقيم المنتجات المعبأة في أنظمة لامركزية أو مركزية ، وكذلك في المؤسسات الصناعية التي تنتج أجهزة طبية تستخدم مرة واحدة. يتم تعقيم المنتجات بدون تغليف فقط بنظام رعاية صحية لامركزي. طرق التعقيم بالبخار والهواء هي الأكثر شيوعًا في مرافق الرعاية الصحية.

المعقمات: بخار ، هواء ، غاز.

طريقة البخار:

موثوقة غير سامة وغير مكلفة ، تضمن عقم ليس فقط السطح ، ولكن المنتج بأكمله. يتم إجراؤه في درجة حرارة منخفضة نسبيًا ، وله تأثير لطيف على المواد المعالجة ، مما يسمح بتعقيم المنتجات في العبوة ، وبالتالي يمنع خطر إعادة تلوث m / o.

عامل التعقيم في هذه الطريقة هو بخار الماء المشبع المضغوط.

أوضاع التعقيم:

الوضع الأول (الرئيسي) - 132 0 ، 2 atm. ، 20` - مخصص للمنتجات المصنوعة من الكاليكو الخشن والشاش والزجاج ، بما في ذلك المحاقن التي تحمل علامة "200 0 C" ، والمنتجات المصنوعة من معدن مقاوم للتآكل.

الوضع الثاني (لطيف) - t 120 0 ، 1.1 atm. ، 45` - يوصى به للمنتجات المصنوعة من المطاط الرقيق ، واللاتكس ، والبولي إيثيلين عالي الكثافة.

الوضع الثالث - t 134 0 ، 2 atm. ، 5`.

شروط التعقيم: جميع المنتجات المعقمة بالبخار تحت الضغط ، التعبئة والتغليف المسبق - صناديق التعقيم (البكسيل أو الحاويات). مع أو بدون مرشحات وأكياس كرافت وعبوات أخرى مصممة للتعقيم بالبخار.

تعتمد مدة صلاحية المنتجات المعقمة على العبوة:

المنتجات المعقمة في صناديق التعقيم بدون مرشح (CS) - 3 أيام (72 ساعة) ؛

في صناديق التعقيم المزودة بفلتر (CF) - حتى 20 يومًا ، مع مراعاة تغيير الفلاتر شهريًا ؛

في عبوة مزدوجة ناعمة مصنوعة من قماش قطني ، ورق كرافت - 3 أيام. (72 ساعة).

عيوب الطريقة:

تسبب تآكل الأدوات المصنوعة من معادن غير مستقرة ؛

بالتحول إلى مكثف ، فإنه يرطب المنتجات المعقمة ، وبالتالي يحسن ظروف التخزين ويزيد من خطر إعادة تلوث m / o.

طريقة الهواء.

عامل التعقيم هو الهواء الساخن الجاف. السمة المميزة للطريقة هي عدم وجود ترطيب في العبوات والمنتجات ، وما يصاحب ذلك من انخفاض في فترة التعقيم ، وكذلك تآكل المعادن.

أوضاع التعقيم:

الوضع الأول (الرئيسي) - t 180 0-60 دقيقة. - مصممة لتعقيم المنتجات الزجاجية ، بما في ذلك المحاقن التي تحمل علامة "200 درجة مئوية" ، والمنتجات المعدنية ، بما في ذلك المعادن المقاومة للتآكل.

الوضع الثاني (لطيف) - t 160 0-150 دقيقة. - مخصص لتعقيم المنتجات المصنوعة من مطاط السيليكون وكذلك أجزاء من بعض الأجهزة والأجهزة.

شروط التعقيم: يتم تعقيم المنتجات بدون تغليف على شبكات معبأة في ورق تغليف يلبي متطلبات معايير الصناعة الحالية.

عيوب الطريقة:التسخين البطيء وغير المتكافئ للمنتجات المعقمة ؛ الحاجة إلى استخدام درجات حرارة أعلى ؛ استحالة الاستخدام لتعقيم المنتجات من المطاط والبوليمرات ؛ استحالة استخدام جميع مواد التغليف المتاحة.

ملحوظات:المنتجات الجافة تخضع للتعقيم ؛ المنتجات المعقمة في كيس كرافت ، عبوات بدون ورق رطب فضفاض ، مخزن - 3 أيام. (72 ساعة) ؛ في عبوة من طبقتين من ورق الكريب للعسل. الأهداف - ما يصل إلى 20 يومًا ؛ يجب استخدام المنتجات المعقمة بدون تغليف مباشرة بعد التعقيم خلال وردية العمل (6 ساعات) تحت ظروف معقمة.

طريقة جلاسبيرلين.يتم تعقيم جميع أدوات طب الأسنان ومستحضرات التجميل المعدنية بغمر حبات زجاجية مسخنة حتى 190-250 0 في الوسط.

يشار إلى وقت المعالجة في تعليمات استخدام جهاز التعقيم المحدد.