नसबंदी के भौतिक तरीके।
रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय
सामान्य फार्माकोपियन प्राधिकरण
बंध्याकरणओएफएस.1.1.0016.15
कला के बजाय। जीएफग्यारहवीं, अंक 2
यह सामान्य फार्माकोपिया मोनोग्राफ बाँझ औषधीय उत्पादों की तैयारी में उपयोग की जाने वाली नसबंदी के तरीकों और शर्तों को स्थापित करता है।
बाँझपन को व्यवहार्य सूक्ष्मजीवों और उनके बीजाणुओं की अनुपस्थिति के रूप में समझा जाता है।
बंध्याकरण एक मान्य प्रक्रिया है जिसका उपयोग जीवित सूक्ष्मजीवों और उनके बीजाणुओं से मुक्त उत्पाद, उपकरण, सहायक पदार्थ और पैकेजिंग के लिए बाँझ खुराक रूपों की तैयारी में किया जाता है।
नसबंदी की स्थिति को बदलते समय, जिसमें स्टरलाइज़र लोड की मात्रा को बदलना भी शामिल है, को फिर से सत्यापित करना आवश्यक है।
नीचे वर्णित विधियां बैक्टीरिया, यीस्ट और मोल्ड्स को निष्क्रिय करने के लिए लागू होती हैं।
यदि संभव हो, तो उत्पादों को अंतिम पैकेजिंग (अंतिम नसबंदी) में निष्फल कर दिया जाता है।
ऐसे मामलों में जहां टर्मिनल नसबंदी संभव नहीं है, झिल्ली निस्पंदन विधि का उपयोग किया जाता है या अंतिम उत्पाद के बाद के नसबंदी के बिना सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में दवाओं का उत्पादन किया जाता है। इसके अतिरिक्त, अंतिम पैकेजिंग में वस्तु का प्रसंस्करण (जैसे गामा विकिरण द्वारा नसबंदी) करना संभव है। सभी मामलों में, पैकेजिंग और क्लोजर को पूरे शेल्फ जीवन के दौरान दवा की बाँझपन सुनिश्चित करना चाहिए।
बाँझपन आश्वासन स्तर
नीचे वर्णित विधियों के लिए, यदि आवश्यक हो तो बाँझपन आश्वासन स्तर (एसएएल) इंगित किया गया है।
नसबंदी प्रक्रिया का नसबंदी आश्वासन स्तर आश्वासन की डिग्री है जिसके साथ प्रक्रिया एक बैच में सभी वस्तुओं की बाँझपन सुनिश्चित करती है। किसी दी गई प्रक्रिया के लिए, बाँझपन आश्वासन स्तर को बैच में एक गैर-बाँझ वस्तु होने की संभावना के रूप में परिभाषित किया गया है। उदाहरण के लिए, 10 −6 के एसआरएल का अर्थ है कि 10 6 तैयार उत्पाद के निष्फल बैच में अधिकतम एक व्यवहार्य सूक्ष्मजीव की संभावना है। किसी विशेष उत्पाद के लिए बंध्याकरण प्रक्रिया की बाँझपन के आश्वासन का स्तर सत्यापन प्रक्रिया के दौरान स्थापित किया जाता है।
नसबंदी के तरीके और शर्तें
बंध्याकरण निम्नलिखित विधियों में से किसी एक या उनके संयोजन द्वारा किया जा सकता है।
- थर्मल तरीके:
- दबाव में संतृप्त भाप (ऑटोक्लेविंग);
- गर्म हवा (वायु नसबंदी)।
- रासायनिक तरीके:
- गैसें;
- एंटीसेप्टिक समाधान।
- निस्पंदन द्वारा बंध्याकरण (आवश्यक ताकना आकार के साथ फिल्टर के माध्यम से)।
- विकिरण नसबंदी विधि।
इन विधियों के संशोधन या संयोजन के उपयोग की अनुमति है बशर्ते कि चुनी गई नसबंदी प्रक्रिया प्रक्रिया की प्रभावशीलता और उत्पाद की अखंडता, पैकेजिंग और क्लोजर दोनों को सुनिश्चित करने के लिए मान्य हो।
सभी नसबंदी विधियों के लिए, मानक स्थितियों का उपयोग करते समय, यह पुष्टि करने के लिए कि पूरे उत्पाद बैच के लिए आवश्यक नसबंदी की शर्तें पूरी होती हैं, उत्पादन के महत्वपूर्ण चरणों में नसबंदी प्रक्रिया के दौरान निगरानी की जाती है।
थर्मल नसबंदी
दबाव में संतृप्त भाप के साथ बंध्याकरण (ऑटोक्लेविंग)
संतृप्त भाप के साथ बंध्याकरण तापमान पर किया जाता है
120-122 डिग्री सेल्सियस 120 केपीए के दबाव पर और 130-132 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 200 केपीए के दबाव में। इस विधि का उपयोग अक्सर जलीय घोल और अन्य तरल खुराक रूपों के लिए भली भांति बंद करके सीलबंद, पूर्व-निष्फल शीशियों, ampoules या अन्य प्रकार की पैकेजिंग में किया जाता है। स्टीम स्टेरलाइजर्स (आटोक्लेव) में नसबंदी की जाती है। मानक स्थितियां 8-15 मिनट के लिए 120 - 122 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर गर्म होती हैं। नसबंदी का समय उत्पाद के भौतिक-रासायनिक गुणों और मात्रा के साथ-साथ उपयोग किए गए उपकरणों (तालिका 1) पर निर्भर करता है।
तालिका 1 - समाधान के विभिन्न संस्करणों के लिए बंध्याकरण समय
वसा और तेल 2 घंटे के लिए 120 - 122 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर निष्फल होते हैं।
कांच, चीनी मिट्टी के बरतन, धातु, ड्रेसिंग और सहायक सामग्री से बने उत्पाद, यदि आवश्यक हो, तो सैनिटरी तकनीकी कपड़े, 120 - 122 ° C - 45 मिनट के तापमान पर निष्फल होते हैं।
130 - 132 ° - 20 मिनट के लिए। रबर उत्पादों को स्टरलाइज़ करने के लिए, इनमें से पहले मोड का उपयोग करें।
समय और तापमान के अन्य संयोजनों की अनुमति है यदि यह पहले साबित हो चुका है कि चयनित नसबंदी आहार माइक्रोबियल मार का आवश्यक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य स्तर प्रदान करता है। उपयोग की जाने वाली प्रक्रियाओं को 10 -6 से अधिक नहीं का बाँझपन आश्वासन स्तर प्रदान करना चाहिए।
आटोक्लेव को इस तरह से लोड किया जाता है कि पूरे लोड में तापमान एकरूपता सुनिश्चित हो सके। ऑटोक्लेविंग प्रक्रिया के दौरान, नसबंदी प्रक्रिया (तापमान, दबाव और समय) की शर्तों को दर्ज किया जाना चाहिए। तापमान को आमतौर पर नियंत्रण पैकेज में रखे थर्मोकपल का उपयोग करके मापा जाता है, साथ में अतिरिक्त थर्मोकपल को नसबंदी कक्ष के सबसे ठंडे स्थानों में रखा जाता है, जो पहले से स्थापित होते हैं। प्रत्येक नसबंदी चक्र की स्थितियों को दर्ज किया जाता है, उदाहरण के लिए, तापमान-समय चार्ट के रूप में या किसी अन्य उपयुक्त तरीके से।
प्रत्येक नसबंदी चक्र की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए, रासायनिक (टर्मो-टेम्पोरल) और जैविक संकेतक दोनों का उपयोग करना संभव है।
गर्म हवा नसबंदी (वायु नसबंदी)
इस थर्मल नसबंदी विधि के लिए, मानक स्थितियां कम से कम 160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर कम से कम . के लिए गर्म हो रही हैं
2 घंटे
गर्मी प्रतिरोधी पाउडर पदार्थ (सोडियम क्लोराइड, जिंक ऑक्साइड, तालक, सफेद मिट्टी, आदि) या खनिज और वनस्पति तेल, वसा, लैनोलिन, पेट्रोलियम जेली, मोम, आदि की नसबंदी के लिए, तापमान और नसबंदी का समय निर्धारित किया जाता है। नमूने के द्रव्यमान पर (तालिका 2 और 3)।
तालिका 2 - गर्मी प्रतिरोधी पाउडर के लिए बंध्याकरण की स्थिति
तालिका 3 - खनिज और वनस्पति तेलों, वसा, लैनोलिन, वैसलीन, मोम, आदि के लिए बंध्याकरण की स्थिति।
कांच, धातु, चीनी मिट्टी के बरतन, फिल्टर और फिल्टर रिसीवर के साथ स्टरलाइज़िंग निस्पंदन इकाइयों से बने उत्पादों को 180 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 60 मिनट के लिए या 160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 2.5 घंटे के लिए निष्फल किया जाता है।
220 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के वायु बंध्याकरण का उपयोग आमतौर पर कांच की पैकेजिंग की नसबंदी और अपक्षरण के लिए किया जाता है। इस मामले में, जैविक संकेतकों का उपयोग करने के बजाय गर्मी प्रतिरोधी एंडोटॉक्सिन की मात्रा में परिमाण के 3 आदेशों की कमी को सिद्ध किया जाना चाहिए।
समय और तापमान के संयोजन का उपयोग किया जा सकता है यदि यह पहले से सिद्ध हो चुका है कि चयनित नसबंदी आहार माइक्रोबियल मार का आवश्यक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य स्तर प्रदान करता है। उपयोग की जाने वाली प्रक्रियाओं को 10 -6 से अधिक नहीं का बाँझपन आश्वासन स्तर प्रदान करना चाहिए।
वायु नसबंदी एक विशेष शुष्क-गर्मी कैबिनेट में बाँझ हवा के मजबूर परिसंचरण या विशेष रूप से इस उद्देश्य के लिए डिज़ाइन किए गए अन्य उपकरणों पर किया जाता है। नसबंदी कैबिनेट को इस तरह से लोड किया जाता है ताकि पूरे भार में तापमान एकरूपता सुनिश्चित हो सके। नसबंदी कैबिनेट में तापमान आमतौर पर नियंत्रण पैकेज में रखे थर्मोकपल का उपयोग करके मापा जाता है, साथ में नसबंदी कैबिनेट के सबसे ठंडे स्थानों में रखे गए अतिरिक्त थर्मोकपल, जो पहले से स्थापित होते हैं। प्रत्येक नसबंदी चक्र के दौरान तापमान और समय दर्ज किया जाता है। प्रत्येक नसबंदी चक्र की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए, रासायनिक (टर्मो-टेम्पोरल) और जैविक संकेतक दोनों का उपयोग करना संभव है।
रासायनिक नसबंदी
रासायनिक नसबंदी गैस या समाधान के साथ की जाती है।
गैस नसबंदी
गैस नसबंदी का उपयोग केवल तभी किया जाता है जब अन्य विधियों का उपयोग नहीं किया जा सकता है। नसबंदी की इस पद्धति के साथ, निष्फल उत्पाद में गैस और नमी की पैठ सुनिश्चित की जानी चाहिए, साथ ही बाद में निष्फल उत्पाद में इसके अपघटन उत्पादों को एक स्तर तक गिराना और हटाना जो दवा का उपयोग करते समय विषाक्त प्रभाव पैदा नहीं करता है। .
गैस की आपूर्ति और पोस्ट-नसबंदी degassing प्रणाली से लैस गैस स्टेरलाइजर्स या माइक्रोएनेरोस्टैट्स (पोर्टेबल उपकरण) में गैस के साथ बंध्याकरण किया जाता है। एथिलीन ऑक्साइड आमतौर पर गैस के रूप में प्रयोग किया जाता है। इसकी उच्च आग के खतरे के कारण, इसे किसी भी अक्रिय गैस के साथ मिलाया जा सकता है।
गैस के साथ बंध्याकरण निम्नलिखित तरीकों से किया जाता है:
- - एथिलीन ऑक्साइड: स्टरलाइज़िंग खुराक 1200 मिलीग्राम / डीएम 3, तापमान से कम नहीं
18 डिग्री सेल्सियस, सापेक्षिक आर्द्रता 80%, होल्डिंग समय - 16 घंटे (पोर्टेबल डिवाइस); - - एथिलीन ऑक्साइड और मिथाइल ब्रोमाइड का मिश्रण (1:2.5):
ए) स्टरलाइज़िंग खुराक 2000 मिलीग्राम / डीएम 3, तापमान 55 डिग्री सेल्सियस, सापेक्षिक आर्द्रता 80%, होल्डिंग समय 4 घंटे;
बी) स्टरलाइज़िंग डोज़ 2000 mg/dm 3, तापमान 18 °C से कम नहीं, सापेक्षिक आर्द्रता 80%, एक्सपोज़र का समय 16 घंटे।
इसे अन्य मान्य गैस नसबंदी मोड का उपयोग करने की अनुमति है जो वस्तु की बाँझपन और सुरक्षा सुनिश्चित करते हैं।
एथिलीन ऑक्साइड उत्परिवर्तजन और विषाक्त हो सकता है, खासकर जब क्लोराइड आयनों वाली सामग्री का उपयोग करते हैं। एथिलीन ऑक्साइड और मिथाइल ब्रोमाइड की विषाक्तता के कारण, इन गैसों द्वारा निष्फल उत्पादों के उपयोग की अनुमति उनके डीगैसिंग के बाद ही दी जाती है, अर्थात, एक हवादार कमरे में नियामक दस्तावेज में निर्दिष्ट अनुमेय अवशिष्ट मात्रा के संपर्क में।
Degassing की स्थिति उद्देश्य, आवेदन की विधि, उत्पाद आयाम, उत्पाद सामग्री और पैकेजिंग पर निर्भर करती है, और उत्पाद के लिए नियामक और तकनीकी दस्तावेज में निर्दिष्ट होती है।
जब संभव हो, नसबंदी प्रक्रिया के दौरान निम्नलिखित संकेतक दर्ज किए जाते हैं: गैस एकाग्रता, सापेक्ष आर्द्रता, तापमान और नसबंदी का समय। माप उन क्षेत्रों में किए जाते हैं जहां नसबंदी की स्थिति सबसे खराब हासिल की जाती है, जो सत्यापन प्रक्रिया के दौरान स्थापित होती है।
निष्फल उत्पादों को 0.06 से 0.20 मिमी, चर्मपत्र आदि की मोटाई के साथ पॉलीथीन फिल्म के बैग में पैक किया जाता है। रबर, बहुलक सामग्री, कांच, धातु से बने उत्पादों के लिए विधि की सिफारिश की जाती है।
जैविक संकेतकों का उपयोग करके प्रत्येक लोड पर गैस नसबंदी प्रक्रिया की प्रभावशीलता की जाँच की जाती है।
प्रत्येक बैच के जारी होने से पहले, निश्चित संख्या में नमूनों पर बाँझपन की जाँच की जाती है।
समाधान के साथ रासायनिक नसबंदी
रासायनिक नसबंदी एंटीसेप्टिक समाधान (हाइड्रोजन पेरोक्साइड और पेरासिड) के साथ की जाती है। एंटीसेप्टिक समाधान के साथ नसबंदी की प्रभावशीलता सक्रिय पदार्थ की एकाग्रता, नसबंदी के समय और स्टरलाइज़िंग समाधान के तापमान पर निर्भर करती है।
6% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान के साथ स्टरलाइज़ करते समय, स्टरलाइज़िंग घोल का तापमान कम से कम 18 ° C होना चाहिए, नसबंदी का समय 6 घंटे है; 50 डिग्री सेल्सियस - 3 घंटे के तापमान पर।
डीओक्सोन -1 (पेरासिटिक एसिड द्वारा) के 1% घोल के साथ स्टरलाइज़ करते समय, स्टरलाइज़िंग घोल का तापमान कम से कम 18 ° C होना चाहिए, नसबंदी का समय 45 मिनट है।
एंटीसेप्टिक समाधान के साथ रासायनिक नसबंदी कांच, प्लास्टिक या बरकरार तामचीनी से ढके कंटेनरों से बने कंटेनरों में की जाती है, उत्पाद पूरी तरह से नसबंदी की अवधि के लिए समाधान में डूबा हुआ है। उसके बाद, उत्पाद को सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में बाँझ पानी से धोया जाता है।
एंटीसेप्टिक समाधान के साथ नसबंदी की विधि बहुलक सामग्री, रबर, कांच, संक्षारण प्रतिरोधी धातुओं से बने उत्पादों के लिए उपयोग की जाती है।
निस्पंदन द्वारा बंध्याकरण
कुछ सक्रिय तत्व और औषधीय उत्पाद जिन्हें ऊपर वर्णित किसी भी तरीके से अंतिम रूप से निष्फल नहीं किया जा सकता है, उन्हें झिल्ली फिल्टर का उपयोग करके निष्फल किया जा सकता है। ऐसे उत्पादों को विशेष सावधानियों की आवश्यकता होती है। निर्माण प्रक्रिया और कार्य वातावरण को यह सुनिश्चित करना चाहिए कि माइक्रोबियल संदूषण के जोखिम को कम से कम रखा जाए और नियमित रूप से निगरानी की जानी चाहिए। उपकरण, पैकेजिंग, क्लोजर और, जहां संभव हो, सामग्री को उचित रूप से निष्फल किया जाना चाहिए। पैकेज भरने से तुरंत पहले निस्पंदन करने की सिफारिश की जाती है। निस्पंदन के बाद के संचालन सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में किए जाते हैं।
पूर्व-निस्पंदन झिल्ली फिल्टर के माध्यम से 0.45 माइक्रोन से अधिक नहीं के छिद्र आकार के साथ किया जाता है। फिर समाधान झिल्ली फिल्टर के माध्यम से 0.22 माइक्रोन से अधिक नहीं के नाममात्र छिद्र आकार के साथ पारित किए जाते हैं, जो कम से कम 10 7 सूक्ष्मजीवों को बनाए रखने में सक्षम होते हैं। स्यूडोमोनास कमसतह के प्रति वर्ग सेंटीमीटर। अन्य प्रकार के फिल्टर जो समान निस्पंदन दक्षता प्रदान करते हैं, का उपयोग किया जा सकता है।
झिल्ली फिल्टर की उपयुक्तता उपयुक्त सूक्ष्मजीवों का उपयोग करके सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षण द्वारा स्थापित की जाती है, उदा। स्यूडोमोनास कम(एटीसीसी 19146, एनसीआईएमबी 11091 या सीआईपी 103020)। सक्रिय फिल्टर सतह के कम से कम 10 7 सीएफयू/सेमी 2 का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है। सूक्ष्मजीवों का निलंबन ट्रिप्टोन-सोया शोरबा में तैयार किया जाना चाहिए, जो फिल्टर से गुजरने के बाद, 32 डिग्री सेल्सियस से अधिक नहीं के तापमान पर एरोबिक परिस्थितियों में सड़न रोकनेवाला और ऊष्मायन किया जाता है।
निस्पंदन के स्तर को माइक्रोबियल संदूषण की कमी (एलडीआर) के लघुगणक के मूल्य के रूप में परिभाषित किया गया है। उदाहरण के लिए, यदि 107 सूक्ष्मजीवों को 0.22 µm के छिद्र आकार के साथ एक झिल्ली फिल्टर के माध्यम से निस्पंदन के दौरान बनाए रखा जाता है, तो वीएलएस कम से कम 7 है।
निस्पंदन से पहले माइक्रोबियल संदूषण के स्तर पर विचार किया जाना चाहिए, फिल्टर थ्रूपुट, उत्पाद बैच आकार, निस्पंदन अवधि, और फिल्टर से सूक्ष्मजीवों के साथ उत्पाद के संदूषण से बचने के लिए। फ़िल्टर के उपयोग की अवधि किसी विशिष्ट फ़िल्टर किए गए उत्पाद के संयोजन में इस फ़िल्टर के सत्यापन के दौरान स्थापित समय से अधिक नहीं होनी चाहिए। झिल्ली फिल्टर का पुन: उपयोग न करें।
रेडी-टू-यूज़ मेम्ब्रेन फ़िल्टर की अखंडता को फ़िल्टर के प्रकार और सत्यापन के चरण के लिए उपयुक्त परीक्षणों द्वारा फ़िल्टर करने से पहले और बाद में जाँचा जाता है, उदाहरण के लिए, प्रसार प्रवाह विधि या होल्डिंग दबाव द्वारा संतृप्ति परीक्षण ("बबल पॉइंट")। .
अन्य नसबंदी विधियों की तुलना में निस्पंदन नसबंदी के अधिक संभावित जोखिम के कारण, उन मामलों में झिल्ली फिल्टर के माध्यम से पूर्व-फिल्टर करने की सिफारिश की जाती है जहां अन्य तरीकों से माइक्रोबियल संदूषण का निम्न स्तर सुनिश्चित नहीं किया जा सकता है।
सड़न रोकनेवाला स्थितियों में दवाओं की प्राप्तिअंतिम उत्पाद के बाद के नसबंदी के बिना
अंतिम उत्पाद के बाद की नसबंदी के बिना सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में औषधीय उत्पादों को प्राप्त करने का लक्ष्य घटकों का उपयोग करके दवा की बाँझपन को बनाए रखना है, जिनमें से प्रत्येक को पहले ऊपर वर्णित विधियों में से एक द्वारा निष्फल किया गया था। यह स्वच्छता के एक निश्चित वर्ग के कमरों में प्रक्रिया को पूरा करने के साथ-साथ बाँझपन सुनिश्चित करने वाली स्थितियों और उपकरणों का उपयोग करके प्राप्त किया जाता है।
सड़न रोकनेवाला स्थितियों के तहत, निम्नलिखित किया जा सकता है: पैकेज भरने की प्रक्रिया, कैपिंग, सामग्री के सड़न रोकनेवाला मिश्रण, इसके बाद सड़न रोकनेवाला भरने और कैपिंग। निर्माण प्रक्रिया के दौरान सामग्री और तैयार उत्पाद की बाँझपन बनाए रखने के लिए, विशेष ध्यान दिया जाना चाहिए:
- - उत्पादन वातावरण की स्थिति;
- - कर्मचारी;
- - महत्वपूर्ण सतह;
- - पैकेजिंग और क्लोजर और ट्रांसफर प्रक्रियाओं की नसबंदी;
- - अंतिम पैकेजिंग भरने तक उत्पाद का अधिकतम स्वीकार्य भंडारण समय।
प्रक्रिया सत्यापन में उपरोक्त सभी का उचित सत्यापन शामिल है, साथ ही साथ कल्चर मीडिया का उपयोग करके सिमुलेशन परीक्षणों का उपयोग करके व्यवस्थित नियंत्रण जो कि माइक्रोबियल संदूषण (मीडिया भरण परीक्षण) के लिए ऊष्मायन और जांच की जाती है। फिल्टर-निष्फल और/या एसेप्टिक रूप से निर्मित उत्पाद के प्रत्येक बैच को जारी करने से पहले, उचित संख्या में नमूनों पर बाँझपन परीक्षण किया जाना चाहिए।
विकिरण नसबंदी विधि
आयनकारी विकिरण के साथ उत्पाद को विकिरणित करके विकिरण नसबंदी विधि की जाती है। इस विधि का उपयोग औषधीय हर्बल कच्चे माल, हर्बल दवाओं, हर्बल दवाओं आदि की नसबंदी के लिए किया जा सकता है।
-विकिरण, जिसका स्रोत या तो एक रेडियोआइसोटोप तत्व हो सकता है (उदाहरण के लिए, कोबाल्ट-60) या एक उपयुक्त इलेक्ट्रॉन त्वरक द्वारा आपूर्ति किया गया इलेक्ट्रॉन बीम।
इस नसबंदी विधि के लिए, अवशोषण खुराक से निर्धारित किया जाता है
10 से 50 किग्रा. अन्य खुराक का उपयोग किया जा सकता है यदि यह पहले साबित हो गया है कि चयनित आहार सूक्ष्मजीवों की घातकता का आवश्यक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य स्तर प्रदान करता है। उपयोग की जाने वाली प्रक्रियाओं और सावधानियों को 10 -6 से अधिक नहीं का बाँझपन आश्वासन स्तर प्रदान करना चाहिए।
विकिरण नसबंदी का लाभ इसकी कम प्रतिक्रियाशीलता और आसानी से नियंत्रित विकिरण खुराक है जिसे सटीक रूप से मापा जा सकता है। विकिरण नसबंदी न्यूनतम तापमान पर होती है, हालांकि, कुछ प्रकार के कांच और प्लास्टिक पैकेजिंग का उपयोग करते समय सीमाएं हो सकती हैं।
विकिरण नसबंदी प्रक्रिया के दौरान, तैयार उत्पाद द्वारा अवशोषित विकिरण को खुराक की परवाह किए बिना स्थापित डोसिमेट्रिक विधियों का उपयोग करके लगातार निगरानी की जानी चाहिए। आपूर्तिकर्ता से प्राप्त होने पर और फिर एक वर्ष से अधिक के अंतराल पर एक संदर्भ विकिरण सुविधा पर एक मानक स्रोत के खिलाफ डोसीमीटर को कैलिब्रेट किया जाता है।
यदि एक जैविक मूल्यांकन प्रदान किया जाता है, तो यह जैविक संकेतकों का उपयोग करके किया जाता है।
बंध्याकरण के जैविक संकेतक
जैविक संकेतक कुछ सूक्ष्मजीवों की मानकीकृत तैयारी हैं जिनका उपयोग नसबंदी प्रक्रिया की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए किया जाता है।
एक जैविक संकेतक आमतौर पर एक अक्रिय वाहक जैसे फिल्टर पेपर की एक पट्टी, एक कांच की प्लेट, या एक प्लास्टिक ट्यूब पर लागू होने वाले जीवाणु बीजाणु होते हैं। टीका लगाए गए वाहक को अलग किया जाता है ताकि इसके नुकसान या संदूषण को रोका जा सके और साथ ही, सूक्ष्मजीवों के साथ स्टरलाइज़िंग एजेंट के संपर्क को सुनिश्चित किया जा सके। बीजाणु निलंबन भली भांति बंद करके सील किए गए ampoules में हो सकते हैं।
जैविक संकेतक इस तरह से तैयार किए जाते हैं कि कुछ शर्तों के तहत उनकी सुरक्षा सुनिश्चित हो सके; उनकी समाप्ति तिथि होनी चाहिए।
जैविक संकेतकों के उत्पादन में उपयोग किए जाने वाले जीवाणुओं के समान उपभेदों को निष्फल होने के लिए सीधे तरल उत्पाद में या निष्फल होने के समान तरल उत्पाद में टीका लगाया जा सकता है। इस मामले में, यह दिखाया जाना चाहिए कि तरल उत्पाद का बीजाणुओं पर निरोधात्मक प्रभाव नहीं होता है, विशेष रूप से उनके अंकुरण पर।
एक जैविक संकेतक के लिए, निम्नलिखित विशेषताओं का संकेत दिया जाता है: संदर्भ सूक्ष्मजीवों के रूप में उपयोग किए जाने वाले बैक्टीरिया का प्रकार; मूल संग्रह में तनाव संख्या; प्रति वाहक व्यवहार्य बीजाणुओं की संख्या; मूल्य डी.
मूल्य डी- नसबंदी पैरामीटर (अवधि या अवशोषित खुराक) का मूल्य जो व्यवहार्य सूक्ष्मजीवों की संख्या को उनकी प्रारंभिक संख्या के 10% तक कम कर देता है। यह मान अच्छी तरह से परिभाषित प्रयोगात्मक नसबंदी की स्थिति के लिए समझ में आता है। जैविक संकेतक में केवल निर्दिष्ट सूक्ष्मजीव होने चाहिए। एक वाहक पर एक से अधिक प्रकार के जीवाणुओं वाले जैविक संकेतकों के उपयोग की अनुमति है। संस्कृति माध्यम और ऊष्मायन शर्तों के बारे में जानकारी प्रदान की जानी चाहिए।
संकेतकों को उन क्षेत्रों में रखने की सिफारिश की जाती है जो स्टरलाइज़िंग एजेंट के लिए कम से कम सुलभ हैं, जो पहले अनुभवजन्य रूप से या प्रारंभिक भौतिक माप के आधार पर निर्धारित किए गए हैं। स्टरलाइज़िंग एजेंट के संपर्क में आने के बाद, बीजाणु वाहक को सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में पोषक माध्यम में स्थानांतरित कर दिया जाता है।
यह एक पोषक माध्यम के साथ बंद ampoules में औद्योगिक उत्पादन के जैविक संकेतकों का उपयोग करने की अनुमति है, सीधे पैकेज में रखा गया है जो टीका वाहक की रक्षा करता है।
जैविक संकेतकों के लिए संदर्भ सूक्ष्मजीवों का चुनाव निम्नलिखित आवश्यकताओं को ध्यान में रखते हुए किया जाता है:
- - एक विशिष्ट नसबंदी विधि के लिए परीक्षण तनाव का प्रतिरोध उत्पाद को दूषित करने वाले सभी रोगजनक सूक्ष्मजीवों और अन्य सूक्ष्मजीवों के प्रतिरोध से अधिक होना चाहिए;
- - परीक्षण तनाव गैर-रोगजनक होना चाहिए;
- - टेस्ट स्ट्रेन की खेती आसान होनी चाहिए।
यदि, ऊष्मायन के बाद, संदर्भ सूक्ष्मजीवों की वृद्धि देखी जाती है, तो यह एक असंतोषजनक नसबंदी प्रक्रिया को इंगित करता है।
नसबंदी के जैविक संकेतकों के उपयोग की विशेषताएं
दबाव में संतृप्त भाप के साथ बंध्याकरण
नसबंदी चक्रों के सत्यापन में उपयोग के लिए दबावयुक्त संतृप्त भाप के साथ नसबंदी की निगरानी के लिए जैविक संकेतकों की सिफारिश की जाती है। इसका उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है रोग-कीट स्टीयरोथर्मोफिलस(उदाहरण के लिए, एटीसीसी 7953, एनसीटीसी 10007, एनसीआईएमबी 8157, या सीआईपी 52.81)। व्यवहार्य बीजाणुओं की संख्या प्रति वाहक 5 x 10 5 से अधिक होनी चाहिए। मूल्य डी 121 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 1.5 मिनट से अधिक होना चाहिए। जब एक जैविक संकेतक को 6 मिनट के लिए 120 केपीए के दबाव में (121 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर भाप से उपचारित किया जाता है, तो व्यवहार्य बीजाणुओं का संरक्षण देखा जाना चाहिए, और 15 मिनट के लिए उसी तापमान पर उपचार करना चाहिए संदर्भ सूक्ष्मजीवों की पूर्ण मृत्यु।
वायु नसबंदी
जैविक संकेतक तैयार करने के लिए अनुशंसित रोग-कीट subtilis(उदाहरण के लिए, वर. नाइजरएटीसीसी 9372, एनसीआईएमबी 8058 या सीआईपी 77.18)। व्यवहार्य बीजाणुओं की संख्या प्रति वाहक 1 10 5 से अधिक होनी चाहिए, मान डी 160 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 1 - 3 मिनट है। 220 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर गर्म हवा का उपयोग अक्सर कांच के उपकरणों को निष्फल और अपघटित करने के लिए किया जाता है। इस मामले में, गर्मी प्रतिरोधी बैक्टीरिया एंडोटॉक्सिन की मात्रा में 3 परिमाण की कमी जैविक संकेतकों के विकल्प के रूप में काम कर सकती है।
विकिरण नसबंदी
विकिरण की दी गई खुराक की प्रभावशीलता के अतिरिक्त मूल्यांकन के रूप में, विशेष रूप से त्वरित इलेक्ट्रॉनों द्वारा नसबंदी के मामले में, वर्तमान संचालन की निगरानी के लिए जैविक संकेतकों का उपयोग किया जा सकता है। विवादों की सिफारिश की जाती है रोग-कीट प्यूमिलस(उदाहरण के लिए, एटीसीसी 27.142, एनसीटीसी 10327, एनसीआईएमबी 10692, या सीआईपी 77.25)। व्यवहार्य बीजाणुओं की संख्या प्रति वाहक 1 10 7 से अधिक होनी चाहिए। मूल्य डी 1.9 kGy से अधिक होना चाहिए। यह सत्यापित किया जाना चाहिए कि 25 kGy (न्यूनतम अवशोषित खुराक) की खुराक के साथ जैविक संकेतक के विकिरण के बाद, संदर्भ सूक्ष्मजीवों की कोई वृद्धि नहीं देखी गई है।
गैस नसबंदी
चक्र सत्यापन और नियमित संचालन दोनों के लिए, सभी गैस नसबंदी प्रक्रियाओं के लिए जैविक संकेतकों का उपयोग आवश्यक है। बीजाणुओं का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है रोग-कीट subtilis(उदाहरण के लिए, वर. नाइजरएथिलीन ऑक्साइड का उपयोग करते समय ATCC 9372, NCIMB 8058, या CIP 77.18)। व्यवहार्य बीजाणुओं की संख्या प्रति वाहक 5 x 10 5 से अधिक होनी चाहिए। स्थिरता पैरामीटर इस प्रकार हैं: डी 600 मिलीग्राम/ली एथिलीन ऑक्साइड, 54 डिग्री सेल्सियस और 60% सापेक्ष आर्द्रता पर चक्र परीक्षण के लिए 2.5 मिनट से अधिक है। यह सत्यापित किया जाना चाहिए कि निर्दिष्ट मापदंडों के साथ 60 मिनट के नसबंदी चक्र के बाद, संदर्भ सूक्ष्मजीवों की कोई वृद्धि नहीं देखी गई है, जबकि 15 मिनट के नसबंदी चक्र के बाद कम तापमान (600 मिलीग्राम / एल, 30 डिग्री सेल्सियस, 60% आर्द्रता) पर ), बीजाणु व्यवहार्यता बनाए रखा जाता है।
जैविक संकेतक को स्टरलाइज़र और उत्पाद में अपर्याप्त नमी का पता लगाने में सक्षम होना चाहिए: जब यह नमी के बिना 60 मिनट के लिए 54 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 600 मिलीग्राम / एल की एकाग्रता पर एथिलीन ऑक्साइड के संपर्क में आता है, तो बीजाणु व्यवहार्यता को बनाए रखा जाना चाहिए। .
शिक्षा और विज्ञान मंत्रालय
बाल्टिक संघीय विश्वविद्यालय
इमैनुएल कांटो के नाम पर रखा गया
जैव पारिस्थितिकी के संकाय
नसबंदी के तरीके
द्वितीय वर्ष के छात्र
पूर्णकालिक शिक्षा
पंकिना ए.एन.,
वोलोशिना ए यू।
कैलिनिनग्राद
परिचय ………………………………………………………………………………..3
बंध्याकरण के तरीके…………………………………………………………………4
1 शारीरिक नसबंदी के तरीके……………………………….….5
1.1 इग्निशन……………………………………………………………………..5
1.2 सूखी गर्मी नसबंदी ………………………………………..5
1.3 नम गर्मी बंध्याकरण……………………………………………..5
1.4 उबालना……………………………………………………….5
1.5 भाप बंध्याकरण…………………………………………….6
1.6 ऑटोक्लेविंग …………………………………………………6
1.7 भिन्नात्मक नसबंदी……………………………………………….7
1.8 पाश्चराइजेशन………………………………………………………7
1.9 टाइन्डलाइज़ेशन ………………………………………………………..7
2 रासायनिक नसबंदी के तरीके ………………………………………….8
2.1 तरल विधि……………………………………………….8
2.2 गैस विधि……………………………………………………….8
2.3 प्लाज्मा……………………………………………………………….9
3 आयनकारी विकिरण द्वारा बंध्याकरण ……………………………… 9
3.1 विकिरण विधि……………………………………………………..10
3.2 पराबैंगनी विकिरण ……………………………………10
परिचय
जीवाणु और उनके बीजाणु, कवक, विषाणु, साथ ही सतहों, उपकरणों, भोजन और दवाओं पर पाए जाने वाले प्रियन प्रोटीन सहित सभी प्रकार के सूक्ष्मजीवों से किसी भी वस्तु की पूर्ण रिहाई है। यह थर्मल, रासायनिक, विकिरण, निस्पंदन विधियों द्वारा किया जाता है।
बंध्याकरण कदम:
कीटाणुशोधन;
पूर्व-नसबंदी सफाई (पीएसओ);
नसबंदी
नसबंदी के तरीके
1 नसबंदी के भौतिक तरीके
नसबंदी के भौतिक तरीकों में निष्फल वस्तुओं (थर्मल नसबंदी) पर उच्च तापमान का प्रभाव, साथ ही पराबैंगनी विकिरण, उच्च आवृत्ति धाराओं, अल्ट्रासोनिक कंपन, रेडियोधर्मी विकिरण, अवरक्त किरणों आदि के संपर्क में शामिल हैं।
फार्मेसी अभ्यास में, केवल उच्च तापमान के संपर्क में आने वाले तरीकों का उपयोग व्यंजन और दवाओं को निष्फल करने के लिए किया जाता है। पराबैंगनी विकिरण का उपयोग मुख्य रूप से फार्मेसी परिसर, कंटेनरों और फार्मेसी में प्रवेश करने वाले नुस्खे की हवा कीटाणुरहित करने के लिए किया जाता है।
नसबंदी के लिए उच्च तापमान का उपयोग प्रोटोप्लाज्म के अपरिवर्तनीय जमावट, इसके पाइरोजेनेटिक विनाश और माइक्रोबियल सेल के एंजाइम सिस्टम को नुकसान पर आधारित है। बाँझपन प्राप्त करने के लिए आवश्यक तापमान और हीटिंग की अवधि माइक्रोफ्लोरा के प्रकार और अन्य स्थितियों के आधार पर भिन्न हो सकती है।
अधिकांश रोगजनक लगभग 60 डिग्री सेल्सियस पर मर जाते हैं, लेकिन उनके बीजाणु बहुत अधिक तापमान का सामना कर सकते हैं। बहने वाली भाप और उबलते पानी सूक्ष्मजीवों को बहुत तेजी से मारते हैं, लेकिन कई बीजाणु इन परिस्थितियों में (विशेषकर चिपचिपा मीडिया में) कई घंटों तक जीवित रहते हैं। शुद्ध जलवाष्प वायु में मिलाने से अधिक प्रबल होती है।
दबावयुक्त भाप (100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर) सूक्ष्मजीवों को तेजी से मारती है। शुष्क गर्म हवा भाप की तुलना में अधिक तापमान पर बैक्टीरिया और उनके बीजाणुओं को मार देती है। विधि का चुनाव निष्फल होने वाली वस्तु के गुणों पर निर्भर करता है। नसबंदी विधि चुनते समय, वे जीवित माइक्रोफ्लोरा और बीजाणुओं के पूर्ण उन्मूलन के लिए प्रयास करते हैं, साथ ही साथ औषधीय पदार्थ को अपरिवर्तित रखते हैं।
पकाना
इग्निशन सबसे विश्वसनीय प्रकार की नसबंदी में से एक है। यह मफल या क्रूसिबल भट्टियों में वस्तु को 500-800 ° तक गर्म करके या नंगी आग पर शांत करके किया जाता है। प्लैटिनम सिरिंज सुई, चीनी मिट्टी के बरतन फिल्टर और अन्य चीनी मिट्टी के बरतन वस्तुओं को निर्जलित करने के लिए प्रयुक्त होता है। स्टील की वस्तुओं को इस तरह से कीटाणुरहित करने की अनुशंसा नहीं की जाती है, क्योंकि वे जंग खा जाते हैं और अपनी सख्तता खो देते हैं।
सूखी गर्मी नसबंदी
निष्फल होने वाली वस्तु को ओवन में 180°C के तापमान पर 20-40 मिनट के लिए या 200°C पर 10-20 मिनट के लिए गर्म किया जाता है। सूखी गर्मी कांच और चीनी मिट्टी के बरतन व्यंजन, वसा, पेट्रोलियम जेली, ग्लिसरीन, गर्मी प्रतिरोधी पाउडर (काओलिन, स्ट्रेप्टोसाइड, तालक, कैल्शियम सल्फेट, जिंक ऑक्साइड, आदि) को निष्फल कर देती है।
सुखाने वाले अलमारियाँ में फ्लास्क में जलीय घोलों को निष्फल करना असंभव है, क्योंकि उच्च तापमान पर पानी भाप में बदल जाता है और फ्लास्क को तोड़ा जा सकता है।
नम गर्मी द्वारा बंध्याकरण
नसबंदी की इस पद्धति का उपयोग करते समय, उच्च तापमान और आर्द्रता के प्रभाव संयुक्त होते हैं। यदि शुष्क गर्मी मुख्य रूप से सूक्ष्मजीवों के पाइरोजेनेटिक विनाश का कारण बनती है, तो नम गर्मी प्रोटीन जमावट का कारण बनती है, जिसमें पानी की भागीदारी की आवश्यकता होती है।
व्यवहार में, नम गर्मी नसबंदी 50-150 ° के तापमान पर की जाती है और निम्नलिखित तरीकों से की जाती है।
उबलना
यह विधि रबर की वस्तुओं, सर्जिकल उपकरणों, कांच के बने पदार्थों को निष्फल करती है। इंजेक्शन समाधान की नसबंदी के लिए उबलते का उपयोग करने की अनुशंसा नहीं की जाती है, क्योंकि यह दक्षता के मामले में भाप नसबंदी से काफी कम है।
भाप बंध्याकरण
द्रव को संतृप्त जल वाष्प (हवा के मिश्रण के बिना) कहा जाता है, जिसमें 760 मिमी एचजी का दबाव होता है। कला। और 100 डिग्री का तापमान। बहते हुए भाप के साथ स्टरलाइज़ेशन, घोल की मात्रा के आधार पर, 15-60 मिनट के लिए 100°C पर स्टीम स्टेरलाइज़र या आटोक्लेव में किया जाता है। यह फार्मेसियों में इंजेक्शन योग्य समाधानों को स्टरलाइज़ करने के सामान्य तरीकों में से एक है।
वाष्पदावी
दबाव में भाप नसबंदी (ऑटोक्लेविंग)। यह विभिन्न डिजाइनों के आटोक्लेव में किया जाता है। आटोक्लेव एक भली भांति बंद करके सीलबंद पोत है जिसमें एक मोटी दीवार वाले नसबंदी कक्ष और एक आवरण होता है। आटोक्लेव में एक सुरक्षा वाल्व होता है जो भाप को अतिरिक्त दबाव और एक दबाव गेज से बचने की अनुमति देता है। प्रत्येक आटोक्लेव में इसके संचालन और रखरखाव के साथ-साथ बॉयलर पर्यवेक्षण पासपोर्ट के लिए निर्देश होना चाहिए।
निष्फल होने वाली वस्तु को भाप कक्ष के अंदर रखा जाता है। जल कक्ष हीटिंग के अधीन है। सबसे पहले, आटोक्लेव को नल से तब तक गर्म किया जाता है जब तक कि भाप एक मजबूत निरंतर धारा में प्रवाहित न हो जाए और आटोक्लेव में हवा को विस्थापित न कर दे, जो जल वाष्प की तापीय चालकता को काफी कम कर देता है (जल वाष्प में 5% हवा की सामग्री के साथ, यह घट जाती है) 50% से)।
वाल्व को बंद करने के बाद आटोक्लेव को गर्म करने के दौरान, दबाव की निगरानी करना आवश्यक है, जिसके समानांतर भाप का तापमान बढ़ जाता है।
ऑटोक्लेविंग सबसे विश्वसनीय नसबंदी विधि है। आमतौर पर एक आटोक्लेव में बंध्यीकरण 119-121°C पर 5-30 मिनट के लिए किया जाता है, जो घोल की मात्रा पर निर्भर करता है। यह सूक्ष्मजीव के प्रकार की परवाह किए बिना पर्याप्त रूप से पूर्ण नसबंदी की गारंटी देता है। इस प्रकार, व्यंजन, कागज और कांच के फिल्टर, यंत्र, उच्च तापमान प्रतिरोधी औषधीय पदार्थों के जलीय घोल और ड्रेसिंग को निष्फल कर दिया जाता है।
भिन्नात्मक नसबंदी
भिन्नात्मक नसबंदी में, एक वस्तु (आमतौर पर एक जलीय घोल) को 30 मिनट के लिए 100 डिग्री सेल्सियस पर तरल भाप से गर्म किया जाता है, फिर घोल को 24 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर रखा जाता है, जिसके बाद इसे फिर से उसी स्थिति (30 मिनट) में निष्फल कर दिया जाता है। 100 डिग्री सेल्सियस पर)। वर्णित चक्र 3-5 बार दोहराया जाता है। पहले हीटिंग के दौरान, सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक रूप मर जाते हैं, बाद के हीटिंग के दौरान, नए दिखाई देने वाले वानस्पतिक रूप। अवधि के कारण, फार्मेसियों में इस पद्धति का उपयोग शायद ही कभी किया जाता है।
pasteurization
वस्तु का एकल ताप 60° के तापमान पर 1 घंटे के लिए या 70-80° के तापमान पर 30 मिनट के लिए। आपको रोगाणुओं के वानस्पतिक रूपों (थर्मोफिलिक को छोड़कर) को नष्ट करने की अनुमति देता है, लेकिन बीजाणु नहीं।
टाइन्डलाइज़ेशन
टिंडलाइजेशन (आंशिक पाश्चराइजेशन)। टाइन्डलाइज़ेशन के दौरान, वस्तु को 5 दिनों के लिए प्रतिदिन 1 घंटे के लिए 60-65° के तापमान पर या 3 दिनों के लिए 70-80° पर गर्म किया जाता है। यह थर्मोलैबाइल औषधीय पदार्थों को स्टरलाइज़ करने का एक विश्वसनीय और सौम्य तरीका है। हालांकि, इसकी अवधि के कारण, यह फार्मेसियों के लिए बहुत उपयुक्त नहीं है और बाद में लगभग कभी भी इसका उपयोग नहीं किया जाता है।
नसबंदी के रासायनिक तरीके
तरल विधि
तरल नसबंदी की मदद से गर्मी के प्रति संवेदनशील सामग्री से बने उत्पादों को संसाधित किया जाता है। कैमरों का उपयोग करके विशेष रासायनिक समाधानों का उपयोग करके प्रसंस्करण किया जाता है।
वे एक ढक्कन और एक छिद्रित शेल्फ के साथ एक स्टेनलेस स्टील के कंटेनर हैं। उपकरण को एक विशेष समाधान की कार्रवाई के तहत संसाधित किया जाता है, जिसे यदि आवश्यक हो, तो गरम किया जा सकता है।
ऐसे कक्षों का उपयोग उपकरणों के भंडारण और परिवहन के लिए भी किया जा सकता है।
गैस विधि
गैस नसबंदी एथिलीन ऑक्साइड और फॉर्मलाडेहाइड विधियों द्वारा किया जाता है। इसके लिए, विशेष स्थिर प्रतिष्ठानों का उपयोग किया जाता है।
एथिलीन ऑक्साइड विधि प्लास्टिक और बहुलक उत्पादों, प्रकाशिकी के प्रसंस्करण के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है। यह एक विशेष गैस कक्ष का उपयोग करके किया जाता है। कक्ष से हवा निकाल दी जाती है, और उसमें रखी वस्तुओं को गैस से उपचारित किया जाता है।
फॉर्मलाडेहाइड विधि कीटाणुशोधन के लिए अधिक उपयुक्त है, क्योंकि फॉर्मलाडेहाइड में कम मर्मज्ञ विशेषताएं होती हैं। इसके अलावा, प्रसंस्करण कक्ष में तापमान 80 डिग्री सेल्सियस तक पहुंचना चाहिए।
गैस नसबंदी विधियों का मुख्य लाभ प्रक्रिया का निम्न तापमान मोड है, जो उन उपकरणों को संसाधित करना संभव बनाता है जो उच्च तापमान और नमी के संपर्क की अनुमति नहीं देते हैं।
गैस स्टरलाइज़र एक गैस उपयोग प्रणाली से लैस होते हैं, जो उन्हें मनुष्यों और पर्यावरण दोनों के लिए हानिरहित बनाता है। उपकरण अंतर्निर्मित वायुयानों से सुसज्जित है। स्टरलाइज़िंग एजेंट बदली जा सकने वाले सीलबंद कार्ट्रिज में होता है, जो तभी खोला जाता है जब डिवाइस पूरी तरह से सील हो जाता है।
प्लाज्मा
प्लाज्मा नसबंदी विधि सबसे आधुनिक और व्यावहारिक तरीका है जो आपको किसी भी चिकित्सा उत्पादों और उपकरणों को संसाधित करने की अनुमति देता है जो नमी और तापमान के प्रति संवेदनशील होते हैं। यह विधि निम्न-तापमान प्लाज्मा और हाइड्रोजन पेरोक्साइड के एक जलीय घोल का उपयोग करके एक जैव-रासायनिक वातावरण के निर्माण पर आधारित है।
प्लाज्मा विधि का उपयोग करते समय, किसी भी रूप में सभी प्रकार के सूक्ष्मजीव नष्ट हो जाते हैं, कोई जहरीला अपशिष्ट उत्पन्न नहीं होता है।
प्लाज्मा स्टरलाइज़र में प्रसंस्करण एक सूखी प्रक्रिया है, 60 डिग्री सेल्सियस तक के तापमान पर होती है और 35 मिनट तक चलती है।
यह विधि ऑप्टिकल सिस्टम, पॉलिमर सामग्री से बने उत्पादों, विद्युत उपकरणों और केबलों, एंडोस्कोप और संबंधित उपकरणों, सेंसर, प्रत्यारोपण और अन्य उत्पादों के प्रसंस्करण में व्यापक आवेदन पाती है।
प्लाज्मा विधि आज सबसे अधिक प्रासंगिक और विश्वसनीय तरीकों में से एक है।
आयनकारी विकिरण द्वारा बंध्याकरण
विकिरण विधि
-किरणों के साथ विकिरण विधि या विकिरण नसबंदी का उपयोग एकल-उपयोग औद्योगिक नसबंदी के लिए विशेष प्रतिष्ठानों में किया जाता है - बहुलक सीरिंज, रक्त आधान प्रणाली, पेट्री डिश, पिपेट और अन्य नाजुक और थर्मोलैबाइल उत्पाद।
पराबैंगनी विकिरण
कई वर्षों से, नसबंदी के लिए दवा प्रौद्योगिकी में पराबैंगनी (यूवी) विकिरण (तरंग दैर्ध्य 253.7 एनएम) का उपयोग किया गया है। यूवी विकिरण के स्रोत - पारा क्वार्ट्ज लैंप। उनकी शक्तिशाली बैक्टीरियोस्टेटिक क्रिया दीपक के उत्सर्जन स्पेक्ट्रम और सूक्ष्मजीवों के डीएनए के अवशोषण स्पेक्ट्रम के संयोग पर आधारित है, जो क्वार्ट्ज लैंप विकिरण के लंबे समय तक संपर्क के दौरान उनकी मृत्यु का कारण हो सकता है। प्रोकैरियोटिक कोशिका में अपर्याप्त रूप से शक्तिशाली यूवी क्रिया के साथ, प्रकाश और अंधेरे की मरम्मत की प्रक्रियाएं सक्रिय होती हैं, और कोशिका ठीक हो सकती है। विधि का उपयोग आपूर्ति और निकास वेंटिलेशन में हवा की नसबंदी, बिक्स में उपकरण, साथ ही आसुत जल की नसबंदी के लिए किया जाता है।
उबालना एक नसबंदी विधि है जो नसबंदी की गारंटी देता है बशर्ते कि निष्फल सामग्री में कोई बीजाणु न हो। इनका उपयोग उपकरणों की सीरिंज, कांच और धातु के बर्तन, रबर ट्यूब आदि के प्रसंस्करण के लिए किया जाता है।
उबलते नसबंदी आमतौर पर एक स्टरलाइज़र में किया जाता है - एक आयताकार धातु बॉक्स जिसमें एक तंग-फिटिंग ढक्कन होता है। स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री को स्टरलाइज़र में जाली पर रखा जाता है और पानी से भर दिया जाता है। क्वथनांक बढ़ाने और पानी की कठोरता को खत्म करने के लिए, 1-2% सोडियम बाइकार्बोनेट (आसुत जल का उपयोग करना बेहतर है) जोड़ें। स्टरलाइज़र को ढक्कन के साथ बंद कर दिया जाता है और गर्म किया जाता है। नसबंदी की शुरुआत उबलते पानी का क्षण माना जाता है, उबलने का समय 15-30 मिनट है। नसबंदी के अंत में, उपकरण के साथ जाल को विशेष हुक के साथ साइड हैंडल द्वारा हटा दिया जाता है, और इसमें उपकरण बाँझ चिमटी या संदंश के साथ लिए जाते हैं, जिन्हें बाकी उपकरणों के साथ उबाला जाता है।
भाप नसबंदी दो तरीकों से की जाती है: 1) दबाव में भाप; 2) बहने वाली भाप।
भाप दबाव नसबंदीएक आटोक्लेव में उत्पादित। नसबंदी की यह विधि वायुमंडलीय से ऊपर के दबाव में निष्फल सामग्री पर संतृप्त जल वाष्प के प्रभाव पर आधारित है। इस तरह की नसबंदी के परिणामस्वरूप, एक ही उपचार के दौरान सूक्ष्मजीवों के वानस्पतिक और बीजाणु दोनों रूपों की मृत्यु हो जाती है।
आटोक्लेव (चित्र। 12) - एक विशाल बॉयलर, जो बाहर की तरफ धातु के आवरण से ढका होता है, एक ढक्कन के साथ भली भांति बंद करके सील किया जाता है, जो बॉयलर को हिंग वाले बोल्ट के साथ कसकर खराब कर दिया जाता है। एक और छोटा व्यास, जिसे नसबंदी कक्ष कहा जाता है, बाहरी बॉयलर में डाला जाता है। स्टरलाइज़ की जाने वाली वस्तुओं को इस कक्ष में रखा जाता है। दोनों बॉयलरों के बीच एक खाली जगह होती है जिसे वाटर-स्टीम चैंबर कहा जाता है। इस कक्ष में एक विशेष जल-मापी ट्यूब पर चिह्नित एक निश्चित स्तर पर बाहर की ओर तय की गई फ़नल के माध्यम से पानी डाला जाता है। जब पानी को भाप कक्ष में उबाला जाता है, तो भाप उत्पन्न होती है। नसबंदी कक्ष एक सुरक्षा वाल्व के साथ एक आउटलेट मुर्गा से सुसज्जित है ताकि जब दबाव आवश्यक स्तर से ऊपर उठ जाए तो भाप बच सके। नसबंदी कक्ष में बनाए गए दबाव को निर्धारित करने के लिए एक मैनोमीटर का उपयोग किया जाता है।
चावल। 12. आटोक्लेव की योजना। एम - दबाव नापने का यंत्र; पीसी - सुरक्षा वाल्व; बी - पानी के लिए कीप; के 2 - पानी छोड़ने के लिए नल; K 3 - भाप छोड़ने के लिए टैप करें
सामान्य वायुमंडलीय दबाव (760 मिमी एचजी) शून्य के रूप में लिया जाता है। दबाव नापने का यंत्र रीडिंग और तापमान के बीच एक निश्चित संबंध है (तालिका 2)।
तालिका 2. आटोक्लेव ऑपरेशन मोड
स्वचालित मोड नियंत्रण वाले आटोक्लेव वर्तमान में उपलब्ध हैं। सामान्य दबाव गेज के अलावा, वे एक इलेक्ट्रोकॉन्टैक्ट प्रेशर गेज से लैस होते हैं, जो दबाव को निर्धारित मूल्य से ऊपर बढ़ने से रोकता है और इस तरह आटोक्लेव में वांछित तापमान की स्थिरता सुनिश्चित करता है।
दबाव में भाप विभिन्न पोषक माध्यम (देशी प्रोटीन युक्त को छोड़कर), तरल पदार्थ (आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान, पानी, आदि) को निष्फल कर देता है; उपकरण, विशेष रूप से रबर भागों वाले।
पोषक माध्यम के ऑटोक्लेविंग का तापमान और अवधि पोषक माध्यम की तैयारी के लिए नुस्खा में निर्दिष्ट उनकी संरचना द्वारा निर्धारित की जाती है। उदाहरण के लिए, साधारण मीडिया (मांस-पेप्टोन अगर, मांस-पेप्टोन शोरबा) को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल किया जाता है। हालांकि, इस तापमान पर देशी प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट और अन्य पदार्थों से युक्त मीडिया को आसानी से गर्म करके निष्फल करना असंभव है। कार्बोहाइड्रेट वाले मीडिया को 100 डिग्री सेल्सियस पर या आटोक्लेव में 112 डिग्री सेल्सियस (0.5 एटीएम) पर 10-15 मिनट के लिए आंशिक रूप से निष्फल किया जाता है। विभिन्न तरल पदार्थ, रबर की नली, प्लग, बैक्टीरियल मोमबत्तियों और फिल्टर वाले उपकरणों को 120 डिग्री सेल्सियस (1 एटीएम) पर 20 मिनट के लिए निष्फल कर दिया जाता है।
ध्यान! आटोक्लेव में, संक्रमित सामग्री को भी बेअसर कर दिया जाता है। सूक्ष्मजीवों की संस्कृतियों वाले कप और टेस्ट ट्यूबों को भाप के प्रवेश के लिए ढक्कन में छेद वाले विशेष धातु की बाल्टियों या टैंकों में रखा जाता है और 1 घंटे के लिए 126 डिग्री सेल्सियस (1.5 एटीएम) पर एक आटोक्लेव में निष्फल किया जाता है। काम करने के बाद उपकरणों को उसी तरह निष्फल किया जाता है बैक्टीरिया के साथ जो विवाद उत्पन्न करते हैं।
केवल विशेष रूप से प्रशिक्षित व्यक्तियों को ही आटोक्लेव के साथ काम करने की अनुमति है, जिन्हें डिवाइस से जुड़े निर्देशों में निर्दिष्ट नियमों का कड़ाई से और सटीक रूप से पालन करना चाहिए।
आटोक्लेविंग तकनीक. 1. काम से पहले, सभी भागों की सेवाक्षमता और नल के लैपिंग की जांच करें।
2. बायलर के बाहर की ओर लगे फ़नल के माध्यम से पानी (आसुत या उबला हुआ) पानी गेज ग्लास के ऊपरी निशान तक डाला जाता है ताकि स्केल न बने। फ़नल के नीचे का नल बंद है।
3. स्टरलाइज़ की जाने वाली सामग्री को स्टरलाइज़ेशन चेंबर में एक विशेष जाली पर रखा जाता है। वस्तुओं को बहुत कसकर लोड नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि भाप उनके बीच स्वतंत्र रूप से गुजरनी चाहिए, अन्यथा वे सही तापमान तक गर्म नहीं होंगे और अस्थिर रह सकते हैं।
4. बेहतर सीलिंग के लिए ढक्कन पर रबर गैसकेट को चाक से रगड़ा जाता है।
5. ढक्कन को बंद कर दिया जाता है और आटोक्लेव के शरीर पर बोल्ट किया जाता है, और बोल्ट जोड़े में क्रॉसवाइज घुमाए जाते हैं।
6. नसबंदी कक्ष को बाहरी हवा से जोड़ने वाले एग्जॉस्ट कॉक को पूरी तरह से खोलें, और आटोक्लेव को गर्म करना शुरू करें। आटोक्लेव को आमतौर पर गैस या बिजली से गर्म किया जाता है।
जब आटोक्लेव को गर्म किया जाता है, तो पानी उबलता है, जिसके परिणामस्वरूप भाप बॉयलर की दीवारों के बीच उगता है और आंतरिक बॉयलर की दीवार में विशेष छेद के माध्यम से (चित्र 12 देखें), नसबंदी कक्ष में प्रवेश करता है और खुले आउटलेट मुर्गा के माध्यम से बाहर निकलता है। सबसे पहले, भाप आटोक्लेव में मौजूद हवा के साथ निकल जाती है। यह आवश्यक है कि सभी हवा को आटोक्लेव से बाहर निकाल दिया जाए, अन्यथा दबाव नापने का यंत्र की रीडिंग आटोक्लेव में तापमान के अनुरूप नहीं होगी।
भाप के एक निरंतर मजबूत जेट की उपस्थिति आटोक्लेव से हवा को पूरी तरह से हटाने का संकेत देती है; उसके बाद, आउटलेट मुर्गा बंद हो जाता है और आटोक्लेव के अंदर दबाव धीरे-धीरे बढ़ने लगता है।
7. नसबंदी की शुरुआत उस क्षण मानी जाती है जब दबाव नापने का यंत्र रीडिंग निर्दिष्ट मूल्य तक पहुंच जाता है। हीटिंग को विनियमित किया जाता है ताकि आटोक्लेव में दबाव एक निश्चित समय के लिए न बदले।
8. नसबंदी का समय बीत जाने के बाद, आटोक्लेव का ताप बंद हो जाता है, भाप को आउटलेट मुर्गा के माध्यम से छोड़ा जाता है। जब प्रेशर गेज की सुई शून्य हो जाए, तो ढक्कन खोलें। आटोक्लेव में बची भाप से जलने से बचने के लिए, ढक्कन को अपनी ओर खोलें।
आटोक्लेव में तापमान स्तर, यानी दबाव नापने का यंत्र की शुद्धता की जाँच की जा सकती है। इसके लिए, विभिन्न पदार्थों का उपयोग किया जाता है जिनका एक निश्चित गलनांक होता है: एंटीपायरिन (113 ° C), रेसोरिसिनॉल और सल्फर (119 ° C), बेंजोइक एसिड (120 ° C)। इन पदार्थों में से एक को नगण्य मात्रा में डाई (मैजेंटा या मेथिलीन नीला) के साथ मिलाया जाता है और एक कांच की ट्यूब में डाला जाता है, जिसे सील कर दिया जाता है और निष्फल होने वाली सामग्री के बीच एक ऊर्ध्वाधर स्थिति में रखा जाता है। यदि तापमान पर्याप्त है, तो पदार्थ पिघल जाएगा और संबंधित डाई के रंग में बदल जाएगा।
नसबंदी की प्रभावशीलता की जांच करने के लिए, एक ज्ञात बीजाणु संस्कृति के साथ एक टेस्ट ट्यूब को आटोक्लेव में रखा जाता है। ऑटोक्लेविंग के बाद, ट्यूब को 24-48 घंटों के लिए थर्मोस्टैट में स्थानांतरित कर दिया जाता है, वृद्धि की अनुपस्थिति या उपस्थिति नोट की जाती है। वृद्धि की अनुपस्थिति डिवाइस के सही संचालन को इंगित करती है।
भाप बंध्याकरणकोच उपकरण में उत्पादित। इस पद्धति का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां निष्फल होने वाली वस्तु 100 डिग्री सेल्सियस से ऊपर के तापमान पर बदल जाती है। द्रव भाप यूरिया, कार्बोहाइड्रेट, दूध, आलू, जिलेटिन, आदि युक्त पोषक माध्यम को निष्फल कर देता है।
कोच उपकरण (बॉयलर) एक धातु का सिलेंडर है जो बाहर की तरफ (गर्मी हस्तांतरण को कम करने के लिए) लगा या एस्बेस्टस से ढका होता है। सिलेंडर को एक शंक्वाकार ढक्कन के साथ बंद कर दिया जाता है जिसमें भाप से बचने के लिए एक छेद होता है। सिलेंडर के अंदर एक स्टैंड होता है, जिस स्तर तक पानी डाला जाता है। एक छेद वाली बाल्टी स्टैंड पर रखी जाती है, जिसमें निष्फल होने वाली सामग्री को रखा जाता है। कोच उपकरण को गैस या बिजली से गर्म किया जाता है। नसबंदी का समय ढक्कन के किनारों पर और भाप आउटलेट से भाप के जोरदार रिलीज के क्षण से गिना जाता है। 30-60 मिनट के लिए जीवाणुरहित करें। नसबंदी के अंत में, हीटिंग बंद कर दिया जाता है। सामग्री के साथ बाल्टी को उपकरण से हटा दिया जाता है और अगले दिन तक कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाता है। 30-60 मिनट के लिए 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर लगातार 3 दिनों तक वार्म अप किया जाता है। इस विधि को भिन्नात्मक नसबंदी कहा जाता है। पहले गर्म करने के दौरान, रोगाणुओं के वानस्पतिक रूप मर जाते हैं, जबकि बीजाणु बने रहते हैं। दिन के दौरान, बीजाणुओं के पास अंकुरित होने और वानस्पतिक रूपों में बदलने का समय होता है जो नसबंदी के दूसरे दिन मर जाते हैं। चूंकि यह संभव है कि कुछ बीजाणुओं के पास अंकुरित होने का समय नहीं था, सामग्री को अगले 24 घंटों के लिए रखा जाता है, और फिर तीसरी नसबंदी की जाती है। कोच तंत्र में द्रव भाप के साथ बंध्याकरण के लिए विशेष नियंत्रण की आवश्यकता नहीं होती है, क्योंकि तैयार पोषक माध्यम की बाँझपन डिवाइस के सही संचालन के संकेतक के रूप में कार्य करती है। स्टीम स्टरलाइज़ेशन एक आटोक्लेव में भी किया जा सकता है जिसमें ढक्कन बिना पेंच और आउटलेट कॉक खुला रहता है।
परीक्षण प्रश्न
1. किस संस्कृति मीडिया को भाप से निष्फल किया जा सकता है?
2. स्टेरलाइजर क्या है और यह कैसे काम करता है?
3. आसुत जल को उबालने के लिए नसबंदी के लिए क्यों इस्तेमाल किया जाना चाहिए?
4. आटोक्लेव के उपकरण और संचालन के तरीके का वर्णन करें।
5. आटोक्लेव में क्या निष्फल होता है?
6. ऑटोक्लेविंग में सही नसबंदी को कौन नियंत्रित करता है?
7. भाप नसबंदी क्या है?
8. कोच उपकरण की युक्ति का वर्णन कीजिए।
9. भिन्नात्मक नसबंदी का उद्देश्य क्या है?
व्यायाम
प्रपत्र भरिये।
कोच कॉइलर में फ्रैक्शनल स्टरलाइजेशन भी किया जा सकता है।
कोच कॉइलर का उपयोग मट्ठा और अंडे के पोषक माध्यम को जमाने के लिए किया जाता है, और साथ ही माध्यम के संघनन के साथ, इसे निष्फल किया जाता है।
कोच कॉइलरडबल दीवारों के साथ एक फ्लैट धातु बॉक्स है, जो गर्मी-इन्सुलेट सामग्री के साथ बाहर की तरफ ढका हुआ है। बाहरी दीवार के ऊपरी भाग में स्थित एक विशेष छेद के माध्यम से दीवारों के बीच की जगह में पानी डाला जाता है। छेद को एक डाट से बंद कर दिया जाता है जिसमें एक थर्मामीटर डाला जाता है। डिवाइस को दो कवरों से बंद करें: कांच और धातु। कांच के ढक्कन के माध्यम से, आप थक्के की प्रक्रिया का निरीक्षण कर सकते हैं। मीडिया के साथ टेस्ट ट्यूब को एक झुकी हुई स्थिति में कॉइलर के तल पर रखा जाता है।
कॉइलर का ताप गैस या बिजली का उपयोग करके किया जाता है। मीडिया को एक बार 90 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 1 घंटे के लिए या आंशिक रूप से - 3 दिनों में 80 डिग्री सेल्सियस पर 1 घंटे के लिए निष्फल किया जाता है।
टाइन्डलाइज़ेशन* - कम तापमान पर आंशिक नसबंदी - उन पदार्थों के लिए उपयोग किया जाता है जो 60 डिग्री सेल्सियस (उदाहरण के लिए, प्रोटीन तरल पदार्थ) के तापमान पर आसानी से नष्ट और विकृत हो जाते हैं। निष्फल होने वाली सामग्री को पानी के स्नान में या थर्मोस्टैट्स के साथ विशेष उपकरणों में लगातार 5 दिनों के लिए 56-58 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक घंटे के लिए गर्म किया जाता है।
* (नसबंदी की विधि का नाम टाइन्डल के नाम पर रखा गया है, जिन्होंने इसे प्रस्तावित किया था।)
pasteurization- रोगाणुओं के गैर-बीजाणु रूपों के विनाश के लिए पाश्चर द्वारा प्रस्तावित 1 घंटे के लिए 65-70 डिग्री सेल्सियस पर नसबंदी। दूध, शराब, बीयर, फलों के रस और अन्य उत्पादों को पाश्चराइज करें। लैक्टिक एसिड और रोगजनक बैक्टीरिया (ब्रुसेला, माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस, शिगेला, साल्मोनेला, स्टैफिलोकोकस, आदि) से छुटकारा पाने के लिए दूध को पास्चुरीकृत किया जाता है। बीयर, फलों के रस, वाइन का पाश्चराइजेशन विभिन्न प्रकार के किण्वन का कारण बनने वाले सूक्ष्मजीवों को मारता है। पाश्चुरीकृत खाद्य पदार्थों को सबसे अच्छा प्रशीतित रखा जाता है।
परीक्षण प्रश्न
1. कोच कॉइलर का उद्देश्य और उपकरण क्या है?
2. कॉइलर में नसबंदी के तरीके क्या हैं?
3. टाइन्डलाइज़ेशन क्या है?
4. पाश्चुरीकरण क्या है?
एंटीसेप्टिक्स और कीटाणुनाशक की कार्रवाई की प्रभावशीलता का मूल्यांकन। जीवाणुरोधी दवाओं के प्रति जीवाणु की संवेदनशीलता का निर्धारण
परिचय।मनुष्यों के लिए रोगजनक रोगाणुओं का विनाश विभिन्न रोगों की रोकथाम और उपचार में सबसे महत्वपूर्ण समस्याओं में से एक है। रोगाणुओं का मुकाबला करने के लिए, सड़न रोकनेवाला, एंटीसेप्टिक, कीटाणुशोधन और रोगाणुरोधी चिकित्सा विधियों का उपयोग किया जाता है। प्रत्येक विधि के अपने विशिष्ट लक्ष्य और आवेदन की शर्तें होती हैं।
विषय 7.1. रासायनिक और भौतिक कारकों के रोगाणुरोधी प्रभाव का आकलन करने के तरीके
परिचय।सड़न रोकनेवाला -उपायों की एक प्रणाली जो चिकित्सीय और नैदानिक जोड़तोड़ के दौरान मानव शरीर के ऊतकों या गुहाओं में पर्यावरण से सूक्ष्मजीवों के परिचय (प्रवेश) को रोकती है, साथ ही साथ प्रयोगशाला अध्ययनों में पोषक तत्व मीडिया और सूक्ष्मजीवों की संस्कृतियों में अनुसंधान के लिए सामग्री में। . एसेप्सिस विशेष स्वच्छता और स्वच्छ नियमों और काम करने के तरीकों के अनुपालन के साथ-साथ उपकरण, सामग्री, चिकित्सा कर्मियों के हाथों, परिसर आदि के विशेष प्रसंस्करण के लिए प्रदान करता है। रोगाणुओं के आंशिक (कीटाणुशोधन) या पूर्ण (नसबंदी) विनाश के उद्देश्य से।
रोगाणुरोधकों- सूक्ष्मजीवों के विनाश के उद्देश्य से चिकित्सीय और निवारक उपायों का एक जटिल जो त्वचा और श्लेष्म झिल्ली के क्षतिग्रस्त क्षेत्रों पर एक संक्रामक प्रक्रिया का कारण बन सकता है, उन्हें सूक्ष्मजीवी पदार्थों - एंटीसेप्टिक्स के साथ इलाज करके।
बंध्याकरण- वानस्पतिक रूपों और बीजाणुओं सहित सूक्ष्मजीवों का पूर्ण विनाश। नसबंदी विधियों के 3 मुख्य समूह हैं: भौतिक, यांत्रिक और रासायनिक। व्यावहारिक समस्या को हल करने के लिए उपयोग की जाने वाली विधि का चुनाव उस वस्तु पर निर्भर करता है जिसे निष्फल किया जाना है।
कीटाणुशोधन- पर्यावरणीय वस्तुओं की कीटाणुशोधन। नसबंदी के विपरीत, कीटाणुशोधन के परिणामस्वरूप अधिकांश, लेकिन सभी नहीं, रोगाणुओं की मृत्यु हो जाती है और इस प्रकार वस्तु के पूर्ण परिशोधन के बजाय केवल माइक्रोबियल संदूषण (संदूषण) में कमी प्रदान करता है। इसलिए जिन वस्तुओं को कीटाणुरहित किया गया है वे बिल्कुल सुरक्षित नहीं हैं।
▲ योजना
▲ कार्यक्रम
1. सड़न रोकनेवाला, एंटीसेप्टिक और कीटाणुशोधन। एंटीसेप्टिक्स और कीटाणुनाशक।
2. भौतिक और रासायनिक कारकों की रोगाणुरोधी क्रिया।
3. नसबंदी के तरीके; नसबंदी के लिए इस्तेमाल किया जाने वाला उपकरण।
4. नसबंदी की प्रभावशीलता, एंटीसेप्टिक और कीटाणुनाशक की कार्रवाई की निगरानी के तरीके।
प्रदर्शन
1. नसबंदी में प्रयुक्त उपकरण: आटोक्लेव, ओवन, निस्पंदन और यूवी विकिरण उपकरण।
लेकिन व्यायामछात्रों
1. उबालने और ऑटोक्लेविंग द्वारा किए गए नसबंदी की प्रभावशीलता को नियंत्रित करने के लिए जीवाणु परीक्षण वस्तुओं के साथ किए गए प्रयोगों के परिणामों को ध्यान में रखें। निष्कर्ष निकालने के लिए।
2. तैयार फसलों का उपयोग करके स्टेफिलोकोसी और एस्चेरिचिया कोलाई पर यूवी किरणों के जीवाणुरोधी प्रभाव का निर्धारण करें।
3. एंटीसेप्टिक और कीटाणुनाशक पदार्थों के रोगाणुरोधी प्रभाव को निर्धारित करने के लिए स्थापित प्रयोगों के परिणामों को ध्यान में रखें। निष्कर्ष निकालने के लिए।
दिशा-निर्देश
नसबंदी के तरीके
I. भौतिक तरीके।उच्च तापमान के संपर्क में। सबसे महत्वपूर्ण बायोपॉलिमर, मुख्य रूप से प्रोटीन के विकृतीकरण का कारण बनने की क्षमता के कारण उच्च तापमान का एक माइक्रोबायसाइडल प्रभाव होता है।
एक सुखाने और स्टरलाइज़िंग कैबिनेट (पाश्चर ओवन) में सूखी गर्मी द्वारा बंध्याकरण 45 मिनट के लिए 165-170 डिग्री सेल्सियस तक गर्म हवा के जीवाणुनाशक प्रभाव पर आधारित है। उच्च तापमान पर, कपास के प्लग, कागज जिसमें व्यंजन लपेटे जाते हैं, और कम तापमान पर, एक लंबी नसबंदी अवधि की आवश्यकता होती है। सूखी गर्मी कांच के बने पदार्थ (पेट्री डिश, टेस्ट ट्यूब, पिपेट, आदि) को निष्फल कर देती है।
वाष्पदावी- स्टीम स्टरलाइज़र (आटोक्लेव) में सुपरहीटेड स्टीम (ऊंचे दबाव पर) के साथ बंध्याकरण। नसबंदी के सबसे प्रभावी तरीकों में से एक, जिसका व्यापक रूप से न केवल सूक्ष्मजीवविज्ञानी में, बल्कि नैदानिक अभ्यास में भी उपयोग किया जाता है। आटोक्लेव के साथ काम करने के लिए विशेष निर्देशों के सटीक कार्यान्वयन और सुरक्षा नियमों के अनुपालन की आवश्यकता होती है। अधिकतम भाप तापमान को एक विशेष थर्मामीटर से मापा जाता है, जिसे निष्फल होने वाली सामग्री के साथ आटोक्लेव में रखा जाता है। कुछ मामलों में, एक विशिष्ट गलनांक वाले रसायनों का उपयोग किया जाता है: बेंज़ोनाफ्थोल (पीओ डिग्री सेल्सियस), बेंजोइक एसिड (120 डिग्री सेल्सियस)। कई पोषक तत्व मीडिया, ड्रेसिंग, लिनन 15-20 मिनट के लिए 1 एटीएम के दबाव में निष्फल होते हैं, 15 मिनट के लिए 0.5 एटीएम पर कार्बोहाइड्रेट के साथ पोषक तत्व मीडिया, और संक्रमित सामग्री की कीटाणुशोधन 1.5-2 एटीएम पर 20 -25 मिनट के लिए किया जाता है। (सारणी 7.1.1)।
तालिका 7.1.1. स्टीम स्टरलाइज़र (आटोक्लेव) में दबाव, तापमान और नसबंदी की अवधि के बीच संबंध
0 100 30-60 (आंशिक) 0.5 111 20-30
1 121 15-20 1,5 127 15-20
भाप बंध्याकरणएक आटोक्लेव में एक बिना ढके ढक्कन और एक खुले आउटलेट मुर्गा के साथ किया जाता है। यह नसबंदी विधि वनस्पति कोशिकाओं पर भाप के जीवाणुरोधी प्रभाव पर आधारित है। इसका उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां निष्फल होने वाली सामग्री उच्च तापमान का सामना नहीं कर सकती है, जैसे विटामिन, कार्बोहाइड्रेट के साथ पोषक तत्व मीडिया। पूर्ण परिशोधन के लिए, भिन्नात्मक नसबंदी के सिद्धांत का उपयोग किया जाता है, अर्थात। सामग्री को लगातार 3 दिनों के लिए 20-30 मिनट के लिए 100 "C (या 80-90 डिग्री सेल्सियस) पर निष्फल किया जाता है। इस मामले में, वनस्पति कोशिकाएं मर जाती हैं, और बीजाणु 1 दिन में रहते हैं और अंकुरित होते हैं। बाद में डबल हीटिंग सामग्री की पर्याप्त विश्वसनीय बाँझपन सुनिश्चित करता है।
टाइन्डलाइज़ेशन -यह 56-58 "सी पर लगातार 1 घंटे 5-6 दिनों के लिए सामग्री का एक आंशिक नसबंदी है। इसका उपयोग उन पदार्थों की नसबंदी के लिए किया जाता है जो उच्च तापमान (रक्त सीरम, विटामिन, आदि) पर आसानी से नष्ट हो जाते हैं।
लौ में प्रज्वलनस्पिरिट स्टोव या गैस बर्नर
परिवर्तन सीमित है, उदाहरण के लिए, बैक्टीरियोलॉजिकल लूप, विदारक सुई, चिमटी की नसबंदी के लिए।
आयनकारी विकिरण के संपर्क में। आयनकारी विकिरण का सूक्ष्मजैविक प्रभाव डीएनए अणु में क्षति पैदा करने की उनकी क्षमता पर आधारित होता है। थर्मल प्रभावों के प्रति संवेदनशील डिस्पोजेबल चिकित्सा उपकरणों और बैक्टीरियोलॉजिकल उपकरणों की नसबंदी के लिए (रोगाणुओं और सेल संस्कृतियों की खेती के लिए प्लास्टिक के व्यंजन, प्लास्टिक सीरिंज, रक्त आधान प्रणाली, आदि), आमतौर पर -विकिरण द्वारा नसबंदी का उपयोग किया जाता है।
I. यांत्रिक तरीके।वे एक छोटे छिद्र आकार के साथ विशेष झिल्ली फिल्टर के माध्यम से निस्पंदन पर आधारित होते हैं, जो यांत्रिक रूप से सूक्ष्मजीवों को बनाए रखने में सक्षम होते हैं। प्रयोगशाला अभ्यास में कागज और बहुलक फिल्टर का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। विभिन्न, कड़ाई से कैलिब्रेटेड आकारों के छिद्रों के साथ फिल्टर होते हैं, जो आपको न केवल बैक्टीरिया से, बल्कि वायरस से भी सामग्री की शुद्धि की गारंटी देता है, और यदि आवश्यक हो, तो कुछ मैक्रोमोलेक्यूल्स से। निस्पंदन का उपयोग तरल पदार्थों को जीवाणुरहित करने के लिए किया जाता है जो बैक्टीरिया के विषाक्त पदार्थों और बैक्टीरिया के अन्य अपशिष्ट उत्पादों को प्राप्त करने के लिए गर्मी (रक्त सीरम, रोगाणुरोधी समाधान, बैक्टीरिया और सेल संस्कृतियों के लिए पोषक तत्व मीडिया के घटक) का सामना नहीं कर सकते। जब आवश्यक हो, निस्पंदन वायु नसबंदी का प्रमुख तरीका है। ऐसा करने के लिए, माइक्रोबाइसाइड्स के साथ लगाए गए फिल्टर के माध्यम से हवा को पारित किया जाता है। इस तरह की नसबंदी प्रणाली का उपयोग किया जाता है, उदाहरण के लिए, विशेष रूप से खतरनाक संक्रमणों के रोगजनकों के साथ-साथ ऑपरेटिंग कमरे, प्रसूति वार्ड आदि में काम करने के लिए डेस्कटॉप बॉक्स में।
III. रासायनिक तरीके।वे रसायनों के साथ एक वस्तु के उपचार पर आधारित होते हैं जिनमें माइक्रोबायसाइडल प्रभाव होता है और माइक्रोफ्लोरा के पूर्ण विनाश को सुनिश्चित करने के लिए, कुछ प्रकार के जोखिम के अधीन सक्षम होते हैं। रासायनिक नसबंदी का उपयोग आमतौर पर विभिन्न उपकरणों और पुन: प्रयोज्य उपकरणों को संसाधित करने के लिए किया जाता है जो उच्च तापमान (फाइबर-ऑप्टिक उपकरण, चिकित्सा प्रत्यारोपण, आदि) के प्रति संवेदनशील होते हैं। स्टरलाइज़िंग एजेंटों में एथिलीन ऑक्साइड, हाइड्रोजन पेरोक्साइड, ग्लूटाराल्डिहाइड, पेरोक्सीएसेटिक एसिड, क्लोरीन डाइऑक्साइड शामिल हैं।
विधि चाहे जो भी हो, सभी मामलों में नसबंदी प्रक्रिया की प्रभावशीलता की नियमित निगरानी की आवश्यकता होती है। इस प्रयोजन के लिए, जैविक संकेतकों का उपयोग किया जाता है - ज्ञात सूक्ष्मजीव जो प्रसंस्करण की इस पद्धति के लिए सबसे अधिक प्रतिरोधी हैं (उदाहरण के लिए, बीजाणु बेसिलस स्टीयरोथर्मोफिलसऑटोक्लेविंग की दक्षता को नियंत्रित करने के लिए, बेसिलस सुबटिलिस- शुष्क गर्मी नसबंदी को नियंत्रित करने के लिए)। भौतिक-रासायनिक संकेतक भी हैं - पदार्थ जो दिखाई देते हैं
मेरे परिवर्तन (रंग बदलें, एकत्रीकरण की स्थिति, आदि) केवल तभी जब सही प्रसंस्करण मोड देखा जाता है।
कीटाणुशोधन के तरीके
कीटाणुशोधन के लिए भौतिक और रासायनिक विधियों का उपयोग किया जाता है।
I. भौतिक तरीके।उच्च तापमान के संपर्क में
यात्रा।
उबल रहा है।सिरिंज, छोटे सर्जिकल उपकरण, कांच की स्लाइड और कवरस्लिप, और कुछ अन्य वस्तुओं को स्टरलाइज़र में रखा जाता है जिसमें पानी डाला जाता है। कठोरता को खत्म करने और क्वथनांक को बढ़ाने के लिए, पानी में 1-2% सोडियम बाइकार्बोनेट घोल मिलाया जाता है। उबाल कम से कम 30 मिनट के लिए किया जाता है। उबालने पर, कुछ वायरस (उदाहरण के लिए, हेपेटाइटिस बी वायरस) और जीवाणु बीजाणु व्यवहार्य रहते हैं।
pasteurizationवनस्पति कोशिकाओं पर तापमान के जीवाणुरोधी प्रभाव के आधार पर, लेकिन जीवाणु बीजाणुओं पर नहीं। सामग्री को 5-10 मिनट के लिए 50-65 "C के तापमान पर गर्म किया जाता है, इसके बाद तेजी से ठंडा किया जाता है। आमतौर पर पेय और खाद्य उत्पादों (शराब, बीयर, जूस, दूध, आदि) को पास्चुरीकृत किया जाता है।
आयनकारी विकिरण के संपर्क में। पराबैंगनी विकिरण(यूवी) 260-300 माइक्रोन की तरंग दैर्ध्य के साथ एक काफी स्पष्ट माइक्रोबायसाइडल प्रभाव होता है, हालांकि, कुछ प्रकार के रोगाणुओं और बीजाणु यूवी के प्रतिरोधी होते हैं। इसलिए, यूवी विकिरण माइक्रोफ्लोरा के पूर्ण विनाश को सुनिश्चित करने में सक्षम नहीं है - वस्तु की नसबंदी। यूवी उपचार का उपयोग आमतौर पर बड़ी वस्तुओं के आंशिक कीटाणुशोधन (कीटाणुशोधन) के लिए किया जाता है: वस्तुओं की सतह, कमरे, चिकित्सा संस्थानों में हवा, सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगशालाएं आदि।
गामा विकिरणअधिकांश सूक्ष्मजीवों पर एक स्पष्ट माइक्रोबायसाइडल प्रभाव होता है, जिसमें बैक्टीरिया के वानस्पतिक रूप और अधिकांश प्रजातियों के बीजाणु, कवक, वायरस शामिल हैं। प्लास्टिक के व्यंजन और डिस्पोजेबल चिकित्सा उपकरणों की नसबंदी के लिए उपयोग किया जाता है। यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि गामा विकिरण के साथ उपचार संक्रामक एजेंटों जैसे कि प्रियन के विनाश को सुनिश्चित नहीं करता है।
द्वितीय. रासायनिक तरीके।यह एक कीटाणुरहित वस्तु का प्रसंस्करण है
तमी - सूक्ष्मजीवी रसायन। कुछ
इनमें से कुछ यौगिकों का विषाक्त प्रभाव हो सकता है
मानव शरीर पर, इसलिए उनका विशेष रूप से उपयोग किया जाता है
बाहरी वस्तुओं को संसाधित करने के लिए। कीटाणुनाशक के रूप में
आमतौर पर हाइड्रोजन पेरोक्साइड, क्लोरीन युक्त का उपयोग करें
एकता (0.1-10% ब्लीच समाधान, 0.5-5% समाधान)
क्लोरैमाइन, 0,1-10
हाइपो के दो-तिहाई मूल नमक का % घोल-
कैल्शियम क्लोरेट - डीटीएसजीके), फॉर्मलाडेहाइड, फिनोल (फिनोल, लाइसोल या कार्बोलिक एसिड का 3-5% घोल), आयोडोफोर्स। निस्संक्रामक का चुनाव और उसकी सघनता कीटाणुरहित की जाने वाली सामग्री पर निर्भर करती है। कीटाणुशोधन केवल चिकित्सा उपकरणों को शुद्ध करने के लिए पर्याप्त हो सकता है जो शरीर की प्राकृतिक बाधाओं (लैरींगोस्कोप, सिस्टोस्कोप, वेंटिलेटर) में प्रवेश नहीं करते हैं। कुछ पदार्थ (बोरिक एसिड, मेरथिओलेट, ग्लिसरीन) चिकित्सीय और नैदानिक सीरा, टीके और अन्य तैयारियों की तैयारी के लिए परिरक्षकों के रूप में उपयोग किए जाते हैं।
एंटीसेप्टिक तरीके
एंटीसेप्टिक्स के रूप में, केवल शरीर के लिए कम विषाक्तता वाले यौगिकों का उपयोग किया जाता है जिनमें रोगाणुरोधी प्रभाव होता है। सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला 70% एथिल अल्कोहल, 5% आयोडीन घोल, 0.1% KMn0 4 घोल, 0.5-1% मेथिलीन ब्लू या ब्रिलियंट ग्रीन का अल्कोहल घोल, 0.75-4.0% क्लोरहेक्सिडिन घोल, 1-3% हेक्साक्लोरोफीन घोल और कुछ अन्य हैं। यौगिक। रोगाणुरोधी एजेंटों को ड्रेसिंग, चिपकने वाले मलहम, डेन्चर, भरने की सामग्री, और इसी तरह के निर्माण में उपयोग की जाने वाली सामग्रियों में भी जोड़ा जाता है। उन्हें जीवाणुनाशक गुण प्रदान करने के लिए।
नसबंदी की प्रभावशीलता, एंटीसेप्टिक और कीटाणुनाशक की कार्रवाई की निगरानी के तरीके। उच्च तापमान की जीवाणुरोधी क्रिया का अध्ययन। पोषक तत्व शोरबा के साथ टेस्ट ट्यूबों में बीजाणु-गठन (3 टेस्ट ट्यूब) और गैर-बीजाणु-निर्माण (3 टेस्ट ट्यूब) संस्कृतियों के मिश्रण के साथ सिक्त रेशम के धागे रखें। प्रत्येक संस्कृति के साथ एक ट्यूब आटोक्लेव या उबाल लें; किसी भी प्रभाव के लिए नियंत्रण ट्यूबों को उजागर न करें। प्रसंस्करण के बाद, सभी फसलों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टैट में रखें। प्रयोग के परिणाम को चिह्नित करें और निष्कर्ष निकालें।
ड्रेसिंग और सर्जिकल उपकरणों की बाँझपन का नियंत्रण। परीक्षण के नमूने (या बड़े उपकरणों की सतह से स्वैब) तीन मीडिया पर बोए जाते हैं: चीनी शोरबा, थियोग्लाइकॉल माध्यम और सबौराड का तरल माध्यम। थर्मोस्टैट में फसलों को 14 दिनों के लिए इनक्यूबेट किया जाता है। सभी फसलों में वृद्धि के अभाव में, सामग्री को बाँझ माना जाता है।
यूवी किरणों की जीवाणुरोधी क्रिया का अध्ययन। स्टेफिलोकोकस का निलंबन or ई कोलाई 1 मिलीलीटर की मात्रा में एक आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान में, दीपक के केंद्र से 10-20 सेमी की दूरी पर रखें। विकिरणित और गैर-विकिरणित (नियंत्रण) जीवाणु निलंबन को पोषक तत्व शोरबा में डालें और इनक्यूबेट करें
37 डिग्री सेल्सियस पर 16-24 घंटों के लिए, जिसके बाद परिणामों का मूल्यांकन करें: माध्यम की मैलापन की अनुपस्थिति विकिरणित जीवाणु संस्कृति की मृत्यु के साथ जुड़ी हुई है, नियंत्रण में मैलापन नोट किया जाता है, जो विकास की उपस्थिति को इंगित करता है।
एंटीसेप्टिक और कीटाणुनाशक की रोगाणुरोधी कार्रवाई का निर्धारण। 1. दो प्रकार की परीक्षण वस्तुएँ तैयार करें: क) रेशम के धागे कल्चर में भिगोएँ ई कोलाई;बी) रेशम के धागों को बीजाणु बनाने वाली संस्कृति (बीजाणुओं की उच्च सामग्री के साथ) के साथ सिक्त किया जाता है। धागे को 5 और 60 मिनट के लिए फिनोल (5%), लाइसोल (5%), ब्लीच (10%) के घोल में रखा जाता है, फिर परीक्षण पदार्थों से धोया जाता है, पोषक तत्व शोरबा में बोया जाता है और अगले दिन तक थर्मोस्टेट में रखा जाता है। . नियंत्रण के नमूने रसायनों के संपर्क में नहीं आने चाहिए। प्रयोग के परिणाम पर ध्यान दें और निष्कर्ष निकालें।
2. स्टैफिलोकोकस या एस्चेरिचिया कोलाई की एक परीक्षण संस्कृति के साथ पेट्री डिश सीडेड (लॉन के साथ) में परीक्षण पदार्थों के घोल के साथ फिल्टर पेपर डिस्क को गीला करें और पोषक तत्व अगर की सतह पर रखें। डिश को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। अध्ययन किए गए पदार्थों की जीवाणुरोधी क्रिया को डिस्क के चारों ओर बनने वाले जीवाणु विकास अवरोध के क्षेत्रों के व्यास से आंका जाता है।
विषय 7.2। रोगाणुरोधी दवाओं की कार्रवाई की प्रभावशीलता का आकलन करने के तरीके
परिचय। रोगाणुरोधी (प्राकृतिक और सिंथेटिक एंटीबायोटिक्स) का उपयोग सूक्ष्मजीवों के कारण होने वाली बीमारियों के इलाज के लिए किया जाता है। प्रभावी चिकित्सा के लिए, ऐसी दवा का चयन करना आवश्यक है जिसमें इस संक्रामक एजेंट के खिलाफ सबसे बड़ी गतिविधि हो और सामान्य मानव माइक्रोफ्लोरा को कम से कम नुकसान हो। कई दवाओं (बहु-प्रतिरोध) के प्रतिरोध की अलग-अलग डिग्री के साथ बैक्टीरिया के उपभेदों का व्यापक वितरण चिकित्सीय दवाओं के लिए विशेष रूप से प्रासंगिक चिकित्सीय दवाओं के लिए गुणात्मक (डिस्क विधि) और मात्रात्मक (धारावाहिक कमजोर पड़ने की विधि) मूल्यांकन करता है।
कार्यक्रम
1. रोगाणुरोधी दवाओं के मुख्य समूहों का एक्शन स्पेक्ट्रा।
2. डिस्क विधि द्वारा जीवाणुओं पर रोगाणुरोधी दवाओं के प्रभाव का मूल्यांकन।
3. सीरियल कमजोर पड़ने की विधि द्वारा रोगाणुरोधी दवाओं की न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता (एमआईसी) का निर्धारण।
लेकिन।प्रदर्शन
1. विभिन्न समूहों के रोगाणुरोधी।
2. बैक्टीरिया की संवेदनशीलता को निर्धारित करने के लिए एंटीमाइक्रोबायल एजेंटों के साथ लगाए गए मानक पेपर डिस्क।
3. एंटीबायोटिक दवाओं के सबसे महत्वपूर्ण समूहों और उनके जीवाणुरोधी क्रिया के तंत्र के रोगाणुरोधी स्पेक्ट्रा की तालिकाएं और योजनाएं।
छात्रों को असाइनमेंट
1. डिस्क विधि का उपयोग करके विभिन्न एंटीबायोटिक दवाओं के लिए स्टेफिलोकोसी की संवेदनशीलता निर्धारित करने के लिए एक प्रयोग स्थापित करें।
2. प्रयोग के परिणामों के आधार पर, सीरियल कमजोर पड़ने की विधि द्वारा विभिन्न जीवाणु संस्कृतियों के लिए पेनिसिलिन की न्यूनतम निरोधात्मक सांद्रता निर्धारित करें।
दिशा-निर्देश
सीरियल कमजोर पड़ने की विधि द्वारा रोगाणुरोधी दवाओं के लिए बैक्टीरिया की संवेदनशीलता का मात्रात्मक निर्धारण। इस पद्धति का उपयोग न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता (एमपीसी) को निर्धारित करने के लिए किया जाता है - एक एंटीबायोटिक की सबसे कम सांद्रता जो अध्ययन किए गए बैक्टीरिया के विकास को पूरी तरह से दबा देती है। शारीरिक या बफर समाधान में या एक विशेष विलायक में एक निश्चित एकाग्रता (μg / ml या U / ml) पर दवा युक्त एक एंटीबायोटिक स्टॉक समाधान तैयार किया जाता है। स्टॉक समाधान का उपयोग एंटीबायोटिक के सीरियल (2-गुना) कमजोर पड़ने को पोषक माध्यम - शोरबा (1 मिलीलीटर की मात्रा में) या अगर में तैयार करने के लिए किया जाता है। अध्ययन किए गए जीवाणु संस्कृति से, मानक घनत्व का निलंबन तैयार किया जाता है और मीडिया पर 0.1 मिलीलीटर में एंटीबायोटिक के विभिन्न सांद्रता के साथ-साथ दवा (संस्कृति नियंत्रण) के बिना एक माध्यम पर टीका लगाया जाता है। संस्कृतियों को 37 डिग्री सेल्सियस पर 20-24 घंटे या उससे अधिक (धीरे-धीरे बढ़ने वाले बैक्टीरिया के लिए) के लिए ऊष्मायन किया जाता है, जिसके बाद प्रयोग के परिणाम पोषक तत्व शोरबा के बादल या अगर पर बैक्टीरिया के दृश्य विकास की उपस्थिति की तुलना में नोट किए जाते हैं। नियंत्रण के साथ IPC के रूप में लिया गया।
दवा की उच्चतम सांद्रता जो सीपीपी के विकास को रोकती है या कोशिकाओं में रोगज़नक़ प्रतिजनों के संचय को एमआईसी के रूप में लिया जाता है।
परिणामों की व्याख्या, अर्थात्। तालिका में दिए गए मानदंडों के आधार पर किए गए नैदानिक संवेदनशीलता का आकलन। 7.2.1. संवेदनशील उपभेदों में जीवाणु उपभेद शामिल होते हैं जिनकी वृद्धि एंटीबायोटिक दवाओं की औसत चिकित्सीय खुराक का उपयोग करते समय रोगी के रक्त सीरम में पाए जाने वाली दवा की सांद्रता में बाधित होती है। मध्यम प्रतिरोधी उपभेदों में वे उपभेद शामिल हैं जिनके विकास दमन के लिए रक्त सीरम में बनाए गए सांद्रता की आवश्यकता होती है जब दवा की अधिकतम चिकित्सीय खुराक प्रशासित होती है। सूक्ष्मजीव प्रतिरोधी होते हैं, जिनमें से अधिकतम स्वीकार्य खुराक का उपयोग करते समय शरीर में बनाई गई सांद्रता पर दवा द्वारा वृद्धि को दबाया नहीं जाता है।
तालिका 7.2.1। व्याख्यासीरियल dilutions की विधि द्वारा एंटीबायोटिक दवाओं के लिए बैक्टीरिया की संवेदनशीलता का निर्धारण करने के परिणाम
| एंटीबायोटिक दवाओं | एमआईसी (एमसीजी/एमएल) | ||
| बोध- | मध्यम | स्थिर- | |
| तन | सटीक | चिवी | |
| (एस) | (डी | (आर) | |
| पेनिसिलिन | |||
| बेंज़िलपेनिसिलिन: | |||
| स्टेफिलोकोसी के लिए | £0.12 | - | >0,25 |
| अन्य बैक्टीरिया के लिए | <1,5 | >1,5 | |
| ओक्सासिल्लिन | |||
| के लिए स्टाफीलोकोकस ऑरीअस | <2 | - | >4 |
| अन्य प्रकार के स्टेफिलोकोसी के लिए | <0,25 | - | >0,5 |
| मेथिसिल्लिन | <2 | - | >4 |
| एम्पीसिलीन: | |||
| स्टेफिलोकोसी के लिए | <0,25 | - | >0,5 |
| के लिए ई कोलाईऔर अन्य एंटरोबैक्टीरिया | <8 | >32 | |
| कार्बेनिसिलिन: | |||
| के लिए ई कोलाईऔर अन्य एंटरोबैक्टीरिया | <16 | >64 | |
| के लिए स्यूडोमोनास एरुगिनोसा | <128 | >512 | |
| पाइपेरासिलिन | |||
| के लिए ई कोलाईऔर अन्य एंटरोबैक्टीरिया | <16 | >64 | |
| के लिए स्यूडोमोनास एरुगिनोसा | >64 | - | >182 |
| एज़्लोसिलिन | <64 | - | >128 |
| सेफ्लोस्पोरिन | |||
| सेफ़ाज़ोलिन | <8 | >32 | |
| सेफालोटिन | <8 | >32 | |
| सेफैक्लोर | <8 | >32 | |
| सेफैलेक्सिन | <8 | >32 | |
| सेफुरोक्साइम | <8 | >32 |
विस्तार
मध्यम (डी
| सेफ़ामंडल | <8 | >32 | ||
| cefotaxime | <8 | 16-32 | >64 | |
| सेफ्ट्रिएक्सोन | <8 | 16-32 | >64 | |
| Cefoperazone | <16 | >64 | ||
| ceftazidime | <8 | >32 | ||
| Cefepime | नया बीटा | <8 -лактамы | >32 | |
| इमिपेनेम | <4 | >16 | ||
| मेरोपेनेम | <4 | >16 | ||
| क़ुइनोलोनेस | ||||
| नालिडिक्सिक अम्ल | एसआई6 | - | >32 | |
| सिप्रोफ्लोक्सासिं | <1 | >4 | ||
| ओफ़्लॉक्सासिन | <2 | >8 | ||
| नॉरफ्लोक्सासिन | <4 юзиды | >16 | ||
| अमीनोग्लि | ||||
| केनामाइसिन | <16 | >64 | ||
| जेंटामाइसिन | <4 | >16 | ||
| टोब्रामाइसिन | <4 | >16 | ||
| एमिकासिन | <16 | >64 | ||
| नेटिलमिसिन | <8 | >32 | ||
| टेट्रासाइक्लिन, मैक्रोलाइड्स, लिनकोसामाइड्स | ||||
| टेट्रासाइक्लिन | <2 | 4-8 | >16 | |
| डॉक्सीसाइक्लिन | <4 | >16 | ||
| इरीथ्रोमाइसीन | 50,5 | 1-4 | >8 | |
| azithromycin | <2 | >8 | ||
| क्लेरिथ्रोमाइसिन | <2 | >8 | ||
| एलेंडोमाइसिन | <2 | >8 | ||
| लिनकोमाइसिन | <2 | >8 | ||
| clindamycin | <0,25 | 0,5 | >1 | |
| अन्य समूहों के एंटीबायोटिक्स | ||||
| क्लोरैम्फेनिकॉल (शेर) | ओमीसेटिन) | <8 | >32 | |
| फ्यूसिडिक एसिड | <2 | 4-8 | >16 | |
| रिफैम्पिसिन | <2 | >8 | ||
| polymyxin | <50 ЕД/мл | >50 यू/एमएल | ||
| वैनकॉमायसिन | <4 | 8-16 | S32 | |
| फुराडोनिन | <32 | >128 |
रोगाणुरोधी दवाओं के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण करने के लिए सूक्ष्म परीक्षण प्रणाली।माइक्रोटेस्ट सिस्टम को कुछ प्रजातियों या संबंधित समूहों के बैक्टीरिया के एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति नैदानिक संवेदनशीलता को जल्दी से निर्धारित करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। मानक सांद्रता में परीक्षण की गई दवाएं तैयार प्लास्टिक प्लेटों के कुओं में हैं। प्रत्येक एंटीबायोटिक की दो सांद्रता के लिए अध्ययन की गई संस्कृति की संवेदनशीलता निर्धारित की जाती है: औसत चिकित्सीय और अधिकतम। एक पृथक कॉलोनी से सामग्री को एक मानक पोषक माध्यम के 5 मिलीलीटर में पेश किया जाता है जिसमें एक मापने वाले बैक्टीरियोलॉजिकल लूप (वॉल्यूम 1 μl) का उपयोग करके एक संकेतक होता है, और एक निलंबन तैयार किया जाता है। तैयार बैक्टीरियल सस्पेंशन को 0.1 मिली टैबलेट के कुओं में डाला जाता है और इस तरह के बैक्टीरिया के लिए इष्टतम माध्यम के तापमान और गैस संरचना की स्थितियों के तहत इनक्यूबेट किया जाता है। बैक्टीरिया की वृद्धि को संकेतक के रंग में बदलाव से आंका जाता है, जो अध्ययन के समय को काफी कम कर सकता है। यदि जीवाणु एंटीबायोटिक की उपस्थिति में व्यवहार्य रहते हैं, तो चयापचय उत्पादों के निकलने से संकेतक के रंग में परिवर्तन होता है। रंग परिवर्तन की अनुपस्थिति सूक्ष्म जीव की महत्वपूर्ण गतिविधि के पूर्ण दमन को इंगित करती है। परिणाम स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके ऊष्मायन के 4 घंटे बाद निर्धारित किए जाते हैं।
डिस्क विधि (प्रसार परीक्षण) द्वारा रोगाणुरोधी दवाओं के लिए बैक्टीरिया की नैदानिक संवेदनशीलता का निर्धारण। विधि एक पेपर डिस्क में निहित एंटीबायोटिक की कार्रवाई के तहत घने पोषक माध्यम पर बैक्टीरिया के विकास के दमन पर आधारित है। अगर में दवा के प्रसार के परिणामस्वरूप, डिस्क के चारों ओर एंटीबायोटिक का एक एकाग्रता ढाल बनता है। विकास अवरोध के क्षेत्र का आकार जीवाणु की संवेदनशीलता और दवा के गुणों (विशेष रूप से, अगर में प्रसार की दर) पर निर्भर करता है। नैदानिक अभ्यास में संवेदनशीलता का निर्धारण करने के लिए, एंटीबायोटिक दवाओं की कड़ाई से परिभाषित सामग्री के साथ तैयार मानक डिस्क का उपयोग किया जाता है। दवा की सामग्री प्रत्येक एंटीबायोटिक के चिकित्सीय सांद्रता और रोगजनक बैक्टीरिया के लिए एमआईसी के औसत मूल्यों के आधार पर निर्धारित की जाती है। प्रत्येक डिस्क पर दवा का नाम और इसकी मात्रा का संकेत दिया गया है। संवेदनशीलता का निर्धारण करने के लिए, अध्ययन किए गए जीवाणु संस्कृति से व्यवहार्य कोशिकाओं की एक मानक संख्या वाला निलंबन तैयार किया जाता है और मुलर-हिंटन या एजीवी मीडिया (विशेष मीडिया जो प्रसार को नहीं रोकता है) पर पेट्री डिश (व्यास 100 मिमी) में एक लॉन के साथ बीजित किया जाता है। रोगाणुरोधी पदार्थ और उन पर नकारात्मक प्रभाव नहीं डालते हैं)। डिस्क को एक सर्कल में डिश के केंद्र से 2.5 सेमी की दूरी पर एक एप्लीकेटर की मदद से बीज वाली सतह पर लगाया जाता है (चित्र 7.2.1)। कप पर 5 से अधिक डिस्क नहीं रखी गई हैं। फसलों को 35 डिग्री सेल्सियस पर 18-20 घंटे के लिए ऊष्मायन किया जाता है। यदि प्रक्रिया सही ढंग से की जाती है, तो डिस्क के चारों ओर एक समान जीवाणु लॉन की पृष्ठभूमि के खिलाफ,
एक गोल आकार वाले विकास के निषेध के क्षेत्र। परिणामों के लिए लेखांकन विकास अवरोध क्षेत्र के व्यास को मापकर किया जाता है। मापने वाले क्षेत्र के लिए, उस क्षेत्र को लें जहां बैक्टीरिया की वृद्धि पूरी तरह से अनुपस्थित है। प्राप्त परिणामों की व्याख्या (संवेदनशीलता के बारे में निष्कर्ष) तालिका में दिए गए मानदंडों के आधार पर की जाती है। 7.2.2.
तालिका 7.2.2। डिस्क विधि (एजीवी माध्यम पर) द्वारा एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति बैक्टीरिया की संवेदनशीलता का निर्धारण करने के परिणामों की व्याख्या
पेनिसिलिन
| बेंज़िलपेनिसिलिन: | ||||
| स्टेफिलोकोसी का परीक्षण करते समय | £20 | 21- | -28 | >29 |
| अन्य जीवाणुओं का परीक्षण करते समय | £10 | 11- | -16 | £17 |
| एम्पीसिलीन: | ||||
| स्टेफिलोकोसी का परीक्षण करते समय | <20 | 21- | -28 | £29 |
| जब परीक्षण किया गया ग्राम-नकारात्मक | ||||
| एनवाई बैक्टीरिया और एंटरोकॉसी | <9 | 10- | -13 | >14 |
| कार्बेनिसिलिन (25 एमसीजी) | £14 | 15- | -18 | >19 |
| कार्बेनिसिलिन (100 एमसीजी) पर | ||||
| परीक्षण पी. एरुगिनोसा | £11 | 12- | -14 | £15 |
| मेथिसिल्लिन | £13 | 14- | -18 | >19 |
| ऑक्सैसिलिन (10 एमसीजी) | $15 | 16- | -19 | £20 |
| एज़्लोसिलिन (के लिए पी.एरुगिनोसा) | £13 | 14- | -16 | £16 |
| पाइपरसिलिन (के लिए पी.एरुगिनोसा) | <17 | >18 | ||
| aztreonam | <15 | 16- | -21 | £22 |
सेफ्लोस्पोरिन
विस्तार
| एंटीबायोटिक दवाओं | व्यास | स्टंटिंग जोन | |
| (मिमी) | |||
| बोध- | मध्यम | स्थिर- | |
| तन | सटीक | चिवी | |
| (एस) | (डी | (आर) | |
| नया बीटा लैक्टम | |||
| इमिपेनेम*<13 | 14-15 | >16 | |
| मेरोपेनेम*<13 | 14-15 | >16 | |
| क़ुइनोलोनेस | |||
| सिप्रोफ्लोक्सासिं<15 | 16-20 | >21 | |
| ओफ़्लॉक्सासिन<12 | 13-16 | >17 | |
| नालिडिक्सिक अम्ल*<12 | 13-17 | >18 | |
| एमिनोग्लीकोसाइड्स | |||
| स्ट्रेप्टोमाइसिन<16 | 17-19 | >20 | |
| केनामाइसिन<14 | 15-18 | >19 | |
| जेंटामाइसिन £15 | - | >16 | |
| सिज़ोमाइसिन<15 | - | >16 | |
| टोब्रामाइसिन<14 | - | >15 | |
| एमिकासिन<14 | 15-16 | >17 | |
| नेटिलमिसिन<12 | 13-14 | >15 | |
| टेट्रासाइक्लिन, मैक्रोलाइड्स, लिनकोसामाइड्स | |||
| टेट्रासाइक्लिन<16 | 17-20 | >22 | |
| डॉक्सीसाइक्लिन<15 | 16-19 | >20 | |
| इरीथ्रोमाइसीन<17 | 18-21 | >22 | |
| azithromycin<13 | 14-17 | >18 | |
| रॉक्सिथ्रोमाइसिन*<14 | 15-18 | >19 | |
| क्लेरिथ्रोमाइसिन* £13 | 14-17 | >18 | |
| लिनकोमाइसिन<19 | 20-23 | £24 | |
| क्लिंडामाइसिन £14 | 15-20 | >21 | |
| ओलियंडोमाइसिन £16 | 17-20 | >21 | |
| अन्य समूहों के एंटीबायोटिक्स | |||
| chloramphenicol<15 | 16-18 | >19 | |
| फ्यूसिडिक एसिड<16 | 17-20 | >21 | |
| रिफैम्पिसिन<12 | 13-15 | >16 | |
| polymyxin<11 | 12-14 | >15 | |
| वैनकोमाइसिन: | |||
| स्टेफिलोकोसी के लिए<11 | - | >12 | |
| एंटरोकॉसी के लिए<14 | 15-16 | >17 | |
| रिस्टोमाइसिन<9 | 10-11 | >12 | |
| फुरडोनिन £15 | 16-18 | >19 | |
| फुरगिन £15 | 16-18 | >19 |
*प्रारंभिक आंकड़े।
डिस्क विधि के उपयोग की कई सीमाएँ हैं। यह विधि केवल तेजी से बढ़ने वाले जीवाणुओं की संवेदनशीलता को निर्धारित करने के लिए उपयुक्त है जो एक काफी सरल संरचना (मुलर-हिंटन या एजीडब्ल्यू) के मानक घने पोषक माध्यम पर 24 घंटों के भीतर एक सजातीय लॉन बनाते हैं जिसमें ऐसे पदार्थ नहीं होते हैं जो गतिविधि को कम कर सकते हैं एंटीबायोटिक दवाओं का या उनके प्रसार को रोकें। अन्यथा, प्राप्त जानकारी गलत होगी।
इस प्रकार, डिस्क विधि का उपयोग सभी धीमी गति से बढ़ने वाले और सबसे तेज़ बैक्टीरिया की एंटीबायोटिक संवेदनशीलता को निर्धारित करने के लिए नहीं किया जा सकता है, जिसमें कई मानव रोगजनक शामिल हैं। (माइकोबैक्टीरियम एसपीपी।, हेलिकोबैक्टर एसपीपी।, बैक्टेरॉइड्स एसपीपी।, प्रीवोटेला एसपीपी।, ब्रुसेला एसपीपी।, माइकोप्लाज्मा एसपीपी।और बहुत सारे)। कुछ फ़ास्टिडियस बैक्टीरिया की संवेदनशीलता का निर्धारण करते समय जिसके लिए मानक परीक्षण विकसित किए गए हैं (हीमोफिलस एसपीपी।, निसेरिया एसपीपी।,कुछ प्रकार के स्ट्रेप्टोकोकी), विशेष संस्कृति मीडिया और अतिरिक्त मानदंडों का उपयोग परिणामों की व्याख्या करते समय किया जाना चाहिए।
डिस्क विधि भी बैक्टीरिया की संवेदनशीलता का निर्धारण करते समय विश्वसनीय परिणाम नहीं देती है जो कि खराब रूप से अगर में फैलती है, उदाहरण के लिए, पॉलीपेप्टाइड एंटीबायोटिक्स (पॉलीमीक्सिन, रिस्टोमाइसिन)।
ई-परीक्षण का उपयोग करके रोगाणुरोधी दवाओं के लिए बैक्टीरिया की संवेदनशीलता का मात्रात्मक निर्धारण।ई-परीक्षण प्रसार पद्धति का एक प्रकार है जो आपको एंटीबायोटिक के एमआईसी को निर्धारित करने की अनुमति देता है। डिस्क के बजाय, मानक बहुलक स्ट्रिप्स का उपयोग किया जाता है, एक विशेष तकनीक (एबी बायोडिस्क) का उपयोग करके तैयार किया जाता है और एक निरंतर एकाग्रता ढाल के रूप में लागू स्थिर रोगाणुरोधी एजेंटों से युक्त होता है। पट्टी के दूसरी तरफ
तालिका 7.2.3। सीरियल कमजोर पड़ने की विधि द्वारा रोगाणुरोधी के एमआईसी का निर्धारण
ई-परीक्षण में आईपीसी मूल्यों का पैमाना होता है। जब पट्टी को अगर की सतह पर रखा जाता है, तो एक नियंत्रित प्रसार प्रक्रिया सुनिश्चित करती है कि पट्टी के चारों ओर पोषक माध्यम में पैमाने के अनुरूप दवा की एक स्थिर एकाग्रता ढाल बनाई जाती है। ई-परीक्षण का उपयोग करके संवेदनशीलता का निर्धारण करने की प्रक्रिया डिस्क विधि द्वारा परीक्षण के समान ही की जाती है। बीज के ऊष्मायन के बाद, पट्टी के चारों ओर एक अण्डाकार विकास अवरोध क्षेत्र बनता है। IPC मान ई-परीक्षण पट्टी के साथ अण्डाकार क्षेत्र के प्रतिच्छेदन से मेल खाता है। परिणामों की व्याख्या करने के लिए मानक मानदंड का उपयोग किया जाता है (नैदानिक संवेदनशीलता का आकलन) (तालिका 7.2.3)।
सूक्ष्म जीवों की पारिस्थितिकी
परिचय।सूक्ष्मजीवों की पारिस्थितिकी सामान्य सूक्ष्म जीव विज्ञान की एक शाखा है और कुछ बायोटोप्स में एक साथ रहने वाले सूक्ष्म और मैक्रो-जीवों के संबंधों का अध्ययन करती है। प्राकृतिक आवासों (मिट्टी, जल, वायु, जीवित जीवों) में, रोगाणु विभिन्न बायोकेनोज का हिस्सा होते हैं। मानव रोगों का कारण बनने वाले रोगाणुओं की पारिस्थितिकी बाहरी वातावरण में जीवित रहने की उनकी क्षमता से निर्धारित होती है, मेजबानों को बदलती है, प्रतिरक्षा प्रणाली की कार्रवाई की पृष्ठभूमि के खिलाफ मेजबान शरीर में बनी रहती है, और उनके वितरण के तरीकों से भी जुड़ी होती है, संचरण, और कई अन्य कारक। कई पर्यावरणीय परिस्थितियों का आकलन सैनिटरी माइक्रोबायोलॉजी के मुख्य कार्यों में से एक है।
सेनेटरी और बैक्टीरियोलॉजिकल रिसर्च पर्यावरण की वस्तुओं, खाद्य उत्पादों, पेय आदि के स्वच्छता और स्वच्छ मूल्यांकन में सैनिटरी डॉक्टरों और महामारी विज्ञानियों के व्यावहारिक कार्य को रेखांकित करता है। और संक्रामक रोगों की रोकथाम में अग्रणी भूमिका निभाते हैं। चिकित्सा सूक्ष्म जीव विज्ञान में अध्ययन का एक महत्वपूर्ण उद्देश्य मानव शरीर का सामान्य माइक्रोफ्लोरा है, जिसमें रोगाणु शामिल हैं जो त्वचा पर रहते हैं, विभिन्न अंगों के श्लेष्म झिल्ली (मौखिक गुहा, ग्रसनी, नासोफरीनक्स, ऊपरी श्वसन पथ, आंतों, विशेष रूप से बड़ी आंत) आदि।)। उनमें से कुछ हैं स्थायी (बाध्य)मानव शरीर के निवासी, अन्य - अस्थायी (वैकल्पिक या क्षणभंगुर)।सामान्य माइक्रोफ्लोरा एक महत्वपूर्ण शरीर प्रणाली है जो कई रोगजनक रोगाणुओं से सुरक्षा प्रदान करती है, प्रतिरक्षा प्रणाली की परिपक्वता और उत्तेजना, पाचन में शामिल कई विटामिन और एंजाइमों का उत्पादन आदि।
मानव माइक्रोफ्लोरा की गुणात्मक और मात्रात्मक संरचना जीवन भर बदलती रहती है और लिंग, आयु, आहार आदि पर निर्भर करती है। इसके अलावा, मानव माइक्रोफ्लोरा की संरचना में उतार-चढ़ाव बीमारियों की घटना और दवाओं के उपयोग के कारण हो सकता है, मुख्य रूप से एंटीबायोटिक्स और इम्युनोमोड्यूलेटर . कुछ संकेतकों के अनुसार मानव शरीर के माइक्रोफ्लोरा की गुणात्मक और मात्रात्मक संरचना का मूल्यांकन इसके उल्लंघन (डिस्बैक्टीरियोसिस) और इससे जुड़े परिणामों की पहचान करना संभव बनाता है।
विषय 8.1. जल, वायु और मिट्टी का माइक्रोफ्लोरा। जल, वायु और मिट्टी के स्वच्छता-जीवाणु विज्ञान के अध्ययन के तरीके
जी कार्यक्रम
1. पानी, हवा और मिट्टी का माइक्रोफ्लोरा।
2. स्वच्छता संकेतक सूक्ष्मजीव और उनका महत्व।
3. पानी की अगर-सूचकांक, यदि-अनुमापांक और माइक्रोबियल संख्या निर्धारित करने के लिए तरीके।
4. वायु की सूक्ष्मजीवी संख्या ज्ञात करने की विधियाँ।
5. परफ्रिंजेंस टिटर, कोलाई टिटर, और मृदा माइक्रोबियल गिनती निर्धारित करने के तरीके।
लेकिनप्रदर्शन
1. झिल्ली फिल्टर की विधि द्वारा पानी की स्वच्छता और जीवाणु संबंधी परीक्षा।
2. हवा की स्वच्छता और बैक्टीरियोलॉजिकल परीक्षा। क्रोटोव का उपकरण। पेट्री डिश में एमपीए पर सूक्ष्मजीवों का विकास। रक्त अगर पर हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी की वृद्धि।
3. मिट्टी का स्वच्छता और बैक्टीरियोलॉजिकल अध्ययन। वृद्धि प्रोटीस वल्गेरिस(शुकेविच के अनुसार)।
एछात्रों को असाइनमेंट
1. माइक्रोबियल संख्या, कोलाई-इंडेक्स और कोलाई-टाइटर निर्धारित करने के परिणामों के आधार पर पानी की स्वच्छता और बैक्टीरियोलॉजिकल स्थिति का आकलन करना।
2. माइक्रोबियल संख्या निर्धारित करने के परिणामों के आधार पर हवा की स्वच्छता और बैक्टीरियोलॉजिकल स्थिति का आकलन करना।
3. थर्मोफिलिक बैक्टीरिया के माइक्रोबियल संख्या, कोलाई-टाइटर, परफ्रिंजेंस-टाइटर और टिटर के निर्धारण के परिणामों के आधार पर मिट्टी की स्वच्छता और बैक्टीरियोलॉजिकल स्थिति का आकलन करना।
4. ग्लूकोज-पेप्टोन माध्यम पर हाथों की त्वचा से धोने के लिए टीका लगाएं।
दिशानिर्देश
पर्यावरण के अध्ययन के लिए सूक्ष्मजीवविज्ञानी तरीके
पर्यावरण, पानी, भोजन, आदि की विभिन्न वस्तुओं की स्वच्छता और स्वच्छ स्थिति का आकलन करने के लिए, स्वच्छता और बैक्टीरियोलॉजिकल अध्ययन किए जाते हैं, जिसका उद्देश्य महामारी के खतरे को निर्धारित करना है। हालांकि, रोगजनक रोगाणुओं का प्रत्यक्ष पता लगाना कई कठिनाइयों से जुड़ा है, मुख्य रूप से इन रोगाणुओं की कम सांद्रता के कारण, जो एक नियम के रूप में, हवा, पानी और मिट्टी में गुणा नहीं कर सकते हैं। इसलिए, स्वच्छता और सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में, एक या किसी अन्य वस्तु के कुल माइक्रोबियल संदूषण को निर्धारित करने और तथाकथित का पता लगाने के आधार पर अप्रत्यक्ष तरीकों का उपयोग किया जाता है। स्वच्छता-संकेतक बैक्टीरिया(सारणी 8.1.1)।
तालिका 8.1.1. पर्यावरण और भोजन के स्वच्छता-संकेतक बैक्टीरिया
| एक वस्तु | प्रदूषण की प्रकृति | स्वच्छता संकेतक बैक्टीरिया |
| पानी | मल | एस्चेरिचिया कोलाई समूह के बैक्टीरिया एस्चेरिचिया कोलाई, सिट्रोबैक्टर फ्रींडी, एंटरोबैक्टर एरोजेन्स, एंटरोकोकस फेसेलिस |
| धरती | वैसा ही | वही बैक्टीरिया और क्लोस्ट्रीडिया (क्लोस्ट्रीडियम परफिरिंगेंस, सीआई। स्पोरोजेन्सऔर आदि।) |
| औद्योगिक-रोजमर्रा- | थर्मोफिलिक बैक्टीरिया, रूप बदलनेवाला प्राणी | |
| वाय (क्षय कचरा) | वल्गरिस | |
| भोजन | मल | |
| उत्पादों | ताले एस. faecalis, पी. वल्गरिस | |
| ओरल ड्रिप | स्टाफीलोकोकस ऑरीअस | |
| सामान | मल | आंतों के पस के समूह के जीवाणु- |
| रोजमर्रा की जिंदगी | ताले, पी. वल्गरिस, ई. फेकलिस | |
| ओरल ड्रिप | एस। औरियस | |
| वायु | वैसा ही | एस. ऑरियस, एस. पायोजेनेस |
| पानी, | औद्योगिक | सूक्ष्म के उत्पादन उपभेद- |
| धरती, | वस्त्र | |
| वायु |
स्वच्छता-संकेतक रोगाणु, संकेत मल संदूषणपर्यावरण, एस्चेरिचिया कोलाई समूह (सीजीबी) के बैक्टीरिया हैं। वे परिवार के अलग-अलग जेनेरा से ताल्लुक रखते हैं एंटरोबैक्टीरियासी।बीजीकेपी के विभेदक नैदानिक लक्षण तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं। 8.1.2. किसी भी पर्यावरण या खाद्य उत्पादों में ई. कोलाई का पता लगाना ताजा मल संदूषण का सबसे विश्वसनीय संकेतक माना जाता है। बैक्टीरिया की उपस्थिति Citrobacterऔर एंटरोबैक्टरअपेक्षाकृत पुराने मल संदूषण को इंगित करता है। मिट्टी में क्लोस्ट्रीडियम परफिरेंस, सी. स्पोरोजेन्स, और अन्य क्लोस्ट्रीडिया की उपस्थिति, इसके ताजा और पुराने दोनों प्रकार के मल संदूषण को इंगित करती है, क्योंकि ये बैक्टीरिया बीजाणु बनाते हैं, जो उन्हें पर्यावरण में (विशेष रूप से, मिट्टी में) बने रहने की अनुमति देता है। लंबे समय तक। पर्यावरणीय वस्तुओं में पता लगाना एन्तेरोकोच्चुस फैकैलिसउनके मल संदूषण को भी इंगित करता है। थर्मोफिलिक बैक्टीरिया के समूह में असंबंधित बैक्टीरिया, विभिन्न परिवारों के प्रतिनिधि शामिल हैं जो 60 डिग्री सेल्सियस और उससे अधिक के तापमान पर गुणा कर सकते हैं। (लैक्टोबैसिलस लैक्टिस, स्ट्रेप्टोकोकस थर्मोफिलसऔर आदि।)। वे मानव आंत के स्थायी निवासी नहीं हैं और पर्यावरण के मल संदूषण के मानदंड के रूप में काम नहीं करते हैं। इन जीवाणुओं की संख्या में तेज वृद्धि सड़ने वाले कचरे के साथ मिट्टी के दूषित होने का संकेत दे सकती है, क्योंकि वे स्वयं-हीटिंग खाद और खाद में गुणा करते हैं।
तालिका 8.1.2। बीजीकेपी के विभेदक नैदानिक लक्षण
Escherichiaमिश्रण + - +
कोलाईअम्ल
Citrobacterवही + - पी + +
फ़्रीन्डी
एंटरोबैक्टरब्यूटेन - - + - + +
एरोजीनडियोल
प्रतीक: (+) - सकारात्मक प्रतिक्रिया, (-) - नकारात्मक प्रतिक्रिया, पी - विभिन्न प्रतिक्रियाएं।
जीनस से संबंधित बैक्टीरिया प्रोटीस (P.vulgaris)आदि) परिवार एंटरोबैक्टीरियासी,प्रकृति में व्यापक रूप से वितरित। ये पुटीय सक्रिय बैक्टीरिया जानवरों और पौधों के सड़ने वाले अवशेषों पर बड़ी संख्या में पाए जाते हैं। किसी भी भोजन में इन जीवाणुओं का पता लगाना इंगित करता है सड़न रोकनेवाला।
हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी (एस.पायोजेन्स),नासॉफिरिन्क्स और ग्रसनी के पारगमन निवासी होने के कारण, वे हवाई बूंदों द्वारा बलगम की बूंदों के साथ उत्सर्जित होते हैं। पर्यावरण में हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी के अस्तित्व की शर्तें व्यावहारिक रूप से वायुजनित संक्रमणों के अधिकांश अन्य रोगजनकों की विशेषता से भिन्न नहीं होती हैं। इनडोर वायु में हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी का पता लगाना किसी व्यक्ति के ग्रसनी, नासोफरीनक्स, ऊपरी श्वसन पथ में निहित रोगाणुओं के साथ इसके संभावित संदूषण को इंगित करता है और जो हवाई संक्रमण के प्रेरक एजेंट हैं। स्टाफीलोकोकस ऑरीअसनासॉफिरिन्क्स, ग्रसनी, साथ ही साथ मानव त्वचा का एक वैकल्पिक निवासी है। इनडोर वायु में या वहां स्थित वस्तुओं पर इसकी उपस्थिति एक संकेतक है हवाई संदूषण।स्टैफिलोकोकस ऑरियस और हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी का एक साथ पता लगाना वायु प्रदूषण के उच्च स्तर को इंगित करता है।
पानी की स्वच्छता और जीवाणु संबंधी परीक्षा
पानी की माइक्रोबियल संख्या का निर्धारण। नल का पानी 1 मिली की मात्रा में, खुले जलाशयों से पानी - 1.0 की मात्रा में लगाया जाता है; 0.1 और 0.01 मिली। सभी नमूनों को बाँझ पेट्री डिश में पेश किया जाता है, जिसके बाद उन्हें 10-12 मिलीलीटर पिघला हुआ डाला जाता है और 45-50 डिग्री सेल्सियस पोषक तत्व अगर तक ठंडा किया जाता है, जो सावधानी से होता है
पानी में अच्छी तरह मिला लें। फसलों को 37 डिग्री सेल्सियस पर 1-2 दिनों के लिए इनक्यूबेट किया जाता है। खुले जलाशयों के पानी को कप की दो श्रृंखलाओं में समानांतर रूप से टीका लगाया जाता है, जिनमें से एक को 37 डिग्री सेल्सियस पर 1 दिन के लिए और दूसरे को 2 दिनों के लिए 20 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। फिर सतह पर और माध्यम की गहराई में उगने वाली कॉलोनियों की संख्या को गिना और परिकलित किया जाता है पानी की माइक्रोबियल गिनती- 1 मिली में सूक्ष्मजीवों की संख्या।
पानी के इफ-टाइटर और इफ-इंडेक्स का निर्धारण। कोलाई अनुमापांकपानी - पानी की न्यूनतम मात्रा (एमएल) जिसमें सीजीबी का पता लगाया जाता है। कोलाई-सूचकांक- 1 लीटर पानी में बीजीकेपी की मात्रा। ये संकेतक अनुमापन (किण्वन) विधि या झिल्ली फिल्टर की विधि द्वारा निर्धारित किए जाते हैं।
अनुमापन विधि। पानी की विभिन्न मात्राओं को ग्लूकोज पेप्टोन माध्यम (1% पेप्टोन पानी, 0.5% ग्लूकोज घोल, 0.5% सोडियम क्लोराइड घोल, एंड्रीड इंडिकेटर और एक फ्लोट), और बड़ी मात्रा में टीकाकरण (100 और 10 मिली) में टीका लगाया जाता है। माध्यम का उपयोग किया जाता है, जिसमें इन पदार्थों की मात्रा 10 गुना होती है।
खुले सतह के जलाशयों के पानी की जांच 100 की मात्रा में की जाती है; दस; 1.0 और 0.1 मिली। नल के पानी के अध्ययन के लिए 100 मिलीलीटर के तीन खंडों, 10 मिलीलीटर के तीन खंडों और 1 मिलीलीटर के तीन खंडों में फसलें बनाई जाती हैं। टीकाकरण 1 दिन के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। किण्वन को फ्लोट में गैस के बुलबुले की उपस्थिति से आंका जाता है। किण्वित या बादल के नमूने एंडो माध्यम पर सुसंस्कृत होते हैं। उगाई गई कॉलोनियों से, ग्राम विधि के अनुसार स्मीयर बनाए जाते हैं, दागदार होते हैं और जेनेरा के बैक्टीरिया को अलग करने के लिए एक ऑक्सीडेज परीक्षण किया जाता है। एस्चेरिचिया, सिट्रोबैक्टरऔर एंटरोबैक्टरपरिवार के ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया से स्यूडोमोनैडेसी और पानी में रहने वाले अन्य ऑक्सीडेज-पॉजिटिव बैक्टीरिया। इस प्रयोजन के लिए, 2-3 पृथक कालोनियों को कांच की छड़ से माध्यम की सतह से हटा दिया जाता है, जिसे डाई-मिथाइल-पी-फेनिलेनेडियम से सिक्त फिल्टर पेपर पर एक स्ट्रोक के साथ लगाया जाता है। एक नकारात्मक ऑक्सीडेज परीक्षण के साथ, कागज का रंग नहीं बदलता है, एक सकारात्मक के साथ, यह 1 मिनट के भीतर नीला हो जाता है। ग्राम-नकारात्मक छड़ें जो ऑक्सीडेज नहीं बनाती हैं, उनकी फिर से किण्वन परीक्षण में जांच की जाती है - उन्हें 0.5 के साथ अर्ध-तरल पोषक तत्व अगर में पेश किया जाता है। % ग्लूकोज समाधान और 1 दिन के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट । यदि परिणाम सकारात्मक है, यदि अनुमापांक और यदि सूचकांक सांख्यिकीय तालिका के अनुसार निर्धारित किया जाता है। 8.1.3.
झिल्ली फिल्टर विधि। मेम्ब्रेन फिल्टर नंबर 3 को बन्सन फ्लास्क में लगे सेट्ज़ फ़नल में रखा जाता है, जो एक वैक्यूम पंप से जुड़ा होता है। आसुत जल में उबालकर मेम्ब्रेन फिल्टर पूर्व-निष्फल होते हैं। जल आपूर्ति नेटवर्क से पानी और आर्टिसियन कुओं से पानी 333 मिलीलीटर की मात्रा में फ़िल्टर किया जाता है। एक खुले जलाशय के साफ पानी को 100, 10, 1.0 और 0.1 मिली की मात्रा में फ़िल्टर किया जाता है, अधिक दूषित पानी को छानने से पहले बाँझ पानी से पतला किया जाता है।
तालिका 8.1.3। पानी के अध्ययन में एस्चेरिचिया कोलाई समूह के जीवाणुओं के सूचकांक का निर्धारण
कोलाई अनुमापांक
100 मिलीलीटर . के 3 खंडों से
पानी। फिर पेट्री डिश में एंडो मीडियम की सतह पर फिल्टर लगाए जाते हैं, और 1 दिन के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन के बाद, सीजीबी की विशिष्ट विकसित कॉलोनियों की संख्या गिना जाता है। 2-3 लाल कॉलोनियों से स्मीयर तैयार किए जाते हैं, जिन्हें ग्राम विधि के अनुसार दाग दिया जाता है और ऑक्सीडेज गतिविधि निर्धारित की जाती है। ऐसा करने के लिए, उस पर उगाए गए बैक्टीरिया कॉलोनियों के साथ फिल्टर को चिमटी के साथ स्थानांतरित किया जाता है, बिना मोड़ के, डाइमिथाइल-पी-फेनिलेनेडियम के साथ सिक्त फिल्टर पेपर के एक चक्र पर। ऑक्सीडेज की उपस्थिति में, सूचक कॉलोनी को नीला कर देता है। 2-3 कॉलोनियां जिन्होंने अपना मूल रंग नहीं बदला है, उन्हें 0.5% ग्लूकोज समाधान के साथ अर्ध-तरल माध्यम में टीका लगाया जाता है। संस्कृतियों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। गैस बनने की उपस्थिति में, फिल्टर पर लाल कॉलोनियों की संख्या की गणना की जाती है और कोलाई सूचकांक निर्धारित किया जाता है। पीने के पानी के लिए नियामक संकेतक तालिका में दिए गए हैं। 8.1.4.
तालिका 8.1.4. पेयजल मानक (GOST 2874-82)
| मानक |
सूचक
1 मिली पानी में रोगाणुओं की संख्या, 100 . से अधिक नहीं
1 लीटर पानी में एस्चेरिचिया कोलाई समूह के जीवाणुओं की संख्या 3
(अगर-सूचकांक), और नहीं
अनुमापांक ज्ञात करने के लिए एन्तेरोकोच्चुस फैकैलिसपानी का 10 गुना तनुकरण तैयार करें। 1 मिलीलीटर की मात्रा में पूरे पानी और इसके कमजोर पड़ने को तरल वैकल्पिक मीडिया (केएफ, पॉली-
मिक्सिनोवाया, आदि), 37 "सी पर 2 दिनों के लिए ऊष्मायन किया जाता है, 24 और 48 घंटों के बाद उन्हें घने वैकल्पिक-अंतर मीडिया पर लगाया जाता है: केएफ अगर, टीटीएक्स अगर (ट्राइफेनिलटेट्राजोलियम क्लोराइड के साथ मध्यम), पॉलीमीक्सिन्टेल्यूराइट अगर। स्ट्रेप्टोकोकी की पहचान की जाती है। ग्राम विधि के अनुसार कॉलोनियों, कोशिका आकृति विज्ञान और धुंधला के प्रकार के लिए। टीटीएक्स के साथ माध्यम पर, स्ट्रेप्टोकोकी गहरे लाल रंग की कॉलोनियां बनाते हैं, अगर पर टेल्यूराइट के साथ - काला।
मीडिया की रचना।केएफ माध्यम: 2% पोषक तत्व अगर, 1% खमीर निकालने, 2% लैक्टोज, 0.4% सोडियम एजाइड, 0.06% सोडियम कार्बोनेट, ब्रोमक्रेसोल लाल संकेतक।
पॉलीमीक्सिन माध्यम: 2% पोषक तत्व अगर, 1% खमीर निकालने, 1% ग्लूकोज, पॉलीमीक्सिन एम 200 यूनिट / एमएल, ब्रोमथाइमोल ब्लू इंडिकेटर।
पॉलीमीक्सिन्टेल्यूराइट अगर: 2% पोषक तत्व अगर, 1% खमीर निकालने, 1% ग्लूकोज, क्रिस्टल वायलेट 1: 800,000, पॉलीमीक्सिन एम 200 यू / एमएल, 0.01% पोटेशियम टेल्यूराइट।
ट्राइफेनिलटेट्राजोलियम क्लोराइड अगर (टीटीसी): 2% पोषक तत्व अगर, 1% खमीर निकालने, 1% ग्लूकोज, क्रिस्टल वायलेट 1: 800,000, 0.01% टीटीसी।
इंडेक्स को परिभाषित करते समय ई.फेकलिसकोलाई-सूचकांक की स्थापना में प्रयुक्त सांख्यिकीय सारणियों का उपयोग कर सकेंगे। इसके अलावा, इस उद्देश्य के लिए झिल्ली फिल्टर विधि का उपयोग किया जाता है। रोगजनक बैक्टीरिया का पता लगाने के लिए, झिल्ली फिल्टर के माध्यम से पानी पारित किया जाता है, जिसे तब तरल वैकल्पिक मीडिया में या घने विभेदक निदान मीडिया की सतह पर रखा जाता है।
वायु की स्वच्छता और जीवाणु संबंधी परीक्षा
हवा की माइक्रोबियल संख्या का निर्धारण।हवा के अध्ययन के लिए मात्रात्मक सूक्ष्मजीवविज्ञानी विधियां अवसादन (अवसादन), आकांक्षा या निस्पंदन के सिद्धांतों पर आधारित हैं।
अवसादन विधि। पोषक तत्व अगर के साथ दो पेट्री डिश को 60 मिनट के लिए खुला छोड़ दिया जाता है, जिसके बाद फसलों को 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टेट में इनक्यूबेट किया जाता है। परिणामों का मूल्यांकन दोनों व्यंजनों पर उगाई गई कॉलोनियों की कुल संख्या से किया जाता है: यदि 250 से कम कॉलोनियां हैं, हवा को स्वच्छ माना जाता है, 250-500 कॉलोनियां मध्यम डिग्री के प्रदूषण का संकेत देती हैं, जिसमें 500 से अधिक कॉलोनियों की संख्या प्रदूषित होती है।
आकांक्षा विधि। हवा की सूक्ष्म जीवाणुओं की संख्या निर्धारित करने के लिए यह एक अधिक सटीक मात्रात्मक विधि है। उपकरणों की मदद से एयर सीडिंग की जाती है। क्रोटोव उपकरण (चित्र 8.1.1) को इस तरह से डिज़ाइन किया गया है कि हवा को एक निश्चित गति से एक plexiglass प्लेट के एक संकीर्ण भट्ठा के माध्यम से चूसा जाता है जो पोषक तत्व अगर के साथ पेट्री डिश को बंद कर देता है।
चित्र.8.1.1. जीवाणु अनुसंधान के लिए क्रोटोव उपकरण
इसी समय, इनलेट स्लॉट के तहत कप के निरंतर घुमाव के कारण उन पर निहित सूक्ष्मजीवों वाले एरोसोल कण माध्यम की पूरी सतह पर समान रूप से तय होते हैं। थर्मोस्टेट में बुवाई के ऊष्मायन के बाद, सूत्र के अनुसार माइक्रोबियल संख्या की गणना की जाती है:
एक एक्स 1000 x~y
जहां ए प्लेट पर उगाई गई कॉलोनियों की संख्या है; वी डिवाइस के माध्यम से पारित हवा की मात्रा है, डीएम 3; 1000 - मानक वायु मात्रा, डीएम 3.
हवा की माइक्रोबियल संख्या का निर्धारण करते समय, पोषक तत्व अगर का उपयोग हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी को अलग करने के लिए किया जाता है - रक्त अगर को जेंटियन वायलेट के साथ जोड़ा जाता है, इसके बाद नियंत्रण माइक्रोस्कोपी और रक्त अगर पर संदिग्ध कॉलोनियों के चयनात्मक उपसंस्कृति का उपयोग किया जाता है।
मीडिया की रचना।जेंटियन वायलेट ब्लड एगर: 2% पोषक तत्व अगर, 5-10% डिफिब्रिनेटेड हॉर्स, खरगोश या राम रक्त, जेंटियन वायलेट (1:50,000)।
जर्दी-नमक अगर (वाईएसए): 2% पोषक तत्व अगर, 10% सोडियम क्लोराइड, 20 % (मात्रा से) जर्दी निलंबन (आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के 200 मिलीलीटर प्रति 1 अंडे की जर्दी)।
अन्य उपकरणों का उपयोग हवा का अध्ययन करने के लिए भी किया जा सकता है (डायकोव, रेचमेन्स्की, किकटेंको, पीएबी -1 - नमूनाकरण -
निक एरोसोल बैक्टीरियोलॉजिकल, पीओवी -1 - हवा के नमूने के लिए एक उपकरण), जिसकी मदद से हवा की एक निश्चित मात्रा को तरल या फिल्टर के माध्यम से पारित किया जाता है, और फिर पोषक मीडिया पर मापी गई फसलें बनाई जाती हैं। PAB-1 और POV-1 के उपयोग से बड़ी मात्रा में हवा की जांच करना और रोगजनक बैक्टीरिया और वायरस का पता लगाना संभव हो जाता है।
अस्पतालों (सर्जिकल, प्रसूति-स्त्री रोग, आदि) की हवा की जांच करते समय, रोगजनक और अवसरवादी बैक्टीरिया - नोसोकोमियल संक्रमण (स्टैफिलोकोकी, स्यूडोमोनास एरुगिनोसा, आदि) के प्रेरक एजेंट सीधे अलग होते हैं। स्टेफिलोकोकल एटियलजि के नोसोकोमियल संक्रमणों की स्थिति में, संक्रमण फैलाने के स्रोतों और तरीकों की पहचान करने के उद्देश्य से अध्ययन किया जाता है: फेज टाइपिंग द्वारा, पर्यावरणीय वस्तुओं से पृथक स्टैफिलोकोसी की पहचान, साथ ही साथ रोगियों और परिचारकों से, निर्धारित किया जाता है। माइक्रोबियल संख्या और सामग्री के मानक संकेतक स्टैफिलोकोकस ऑरियस, उद्धरण; अध्याय 2. नागरिकों को सामाजिक सेवाओं के एक सेट के साथ प्रदान करने के रूप में प्रदान की जाने वाली राज्य सामाजिक सहायता 10 पृष्ठ
बंध्याकरण - (अक्षांश से। प्रजनन क्षमता) - भौतिक कारकों और रासायनिक तैयारी दोनों के प्रभाव से m / o और उनके बीजाणुओं का पूर्ण विनाश है। पीएसओ कीटाणुशोधन और पीएसओ गुणवत्ता नियंत्रण के बाद नसबंदी की जाती है। बंध्याकरण सबसे महत्वपूर्ण कड़ी है, स्वास्थ्य सुविधाओं में नोसोकोमियल संक्रमण की रोकथाम के लिए अंतिम बाधा है। यह मरीज को किसी भी तरह के संक्रमण से बचाता है।
नसबंदी के तरीकों को विनियमित करने वाले दस्तावेज।
यह याद रखना चाहिए कि नसबंदी करने के लिए, संक्रामक सुरक्षा के क्षेत्र में कानूनों, निर्देशों, नियमों और अन्य शिक्षाप्रद और पद्धति संबंधी दस्तावेजों को जानना और लागू करने में सक्षम होना आवश्यक है। वर्तमान में, उद्योग मानक लागू है (बाकी। 42-21-8-85, जो चिकित्सा उपकरणों की नसबंदी और कीटाणुशोधन के तरीकों, साधनों और तरीकों को परिभाषित करता है, जो आदेश संख्या 408 द्वारा पूरक है "कीटाणुशोधन के लिए पद्धति संबंधी दिशानिर्देश, पीएसओ और नसबंदी, चिकित्सा आपूर्ति" , 30 दिसंबर, 1998 को रूस के स्वास्थ्य मंत्रालय द्वारा अनुमोदित। संख्या MU-287-113। ये दस्तावेज अनिवार्य हैं और सभी स्वास्थ्य सुविधाओं के लिए परिभाषित हैं और सबसे उपयुक्त साधनों और विधियों की एक विस्तृत पसंद प्रदान करते हैं। इस सुविधा की शर्तों के लिए रक्त या इंजेक्शन की तैयारी और कुछ प्रकार के चिकित्सा उपकरण जो ऑपरेशन के दौरान श्लेष्म झिल्ली के संपर्क में आते हैं, उनके नुकसान का कारण बन सकते हैं।
बंध्याकरण विधियों में अंतर है:
- शारीरिक(थर्मल): भाप, हवा, शीशा लगाना;
- रासायनिक: गैस, रसायन, विकिरण;
- प्लाज्मा और ओजोन(रसायनों का एक समूह)।
एक या किसी अन्य नसबंदी विधि का चुनाव वस्तु के गुणों और विधि पर ही निर्भर करता है - इसके फायदे और नुकसान। पैकेज्ड उत्पादों को विकेंद्रीकृत या केंद्रीकृत प्रणालियों के साथ-साथ औद्योगिक उद्यमों में निष्फल किया जाता है जो एकल-उपयोग वाले चिकित्सा उपकरणों का उत्पादन करते हैं। बिना पैकेजिंग वाले उत्पाद केवल विकेंद्रीकृत स्वास्थ्य देखभाल प्रणाली के साथ निष्फल होते हैं। स्वास्थ्य सुविधाओं में भाप और वायु नसबंदी के तरीके सबसे आम हैं।
स्टेरलाइजर्स: भाप, हवा, गैस।
भाप विधि:
विश्वसनीय गैर विषैले, सस्ती, न केवल सतह, बल्कि पूरे उत्पाद की बाँझपन सुनिश्चित करता है। यह अपेक्षाकृत कम तापमान पर किया जाता है, संसाधित सामग्री पर इसका कोमल प्रभाव पड़ता है, जिससे पैकेज में उत्पादों की नसबंदी की अनुमति मिलती है, जिससे एम / ओ के पुन: संदूषण के जोखिम को रोका जा सकता है।
इस विधि में स्टरलाइज़िंग एजेंट दबावयुक्त संतृप्त जल वाष्प है।
नसबंदी मोड:
पहला मोड (मुख्य) - t 132 0, 2 एटीएम।, 20` - मोटे कैलिको, धुंध, कांच से बने उत्पादों के लिए अभिप्रेत है, जिसमें "200 0 सी" चिह्नित सीरिंज शामिल हैं, जो संक्षारण प्रतिरोधी धातु से बने उत्पाद हैं।
दूसरा मोड (कोमल) - टी 120 0, 1.1 एटीएम।, 45` - पतले रबर, लेटेक्स, उच्च घनत्व पॉलीथीन से बने उत्पादों के लिए अनुशंसित।
तीसरा मोड - टी 134 0, 2 एटीएम।, 5`।
नसबंदी की स्थिति: दबाव में भाप द्वारा निष्फल सभी उत्पाद, पूर्व-स्थान पैकेजिंग - नसबंदी बक्से (बिक्स या कंटेनर)। फिल्टर के साथ या बिना, क्राफ्ट बैग और भाप नसबंदी के लिए डिज़ाइन की गई अन्य पैकेजिंग।
निष्फल उत्पादों का शेल्फ जीवन पैकेजिंग पर निर्भर करता है:
एक फिल्टर (सीएस) के बिना नसबंदी बक्से में निष्फल उत्पाद - 3 दिन (72 घंटे);
फिल्टर (सीएफ) के साथ नसबंदी बक्से में - 20 दिनों तक, फिल्टर के मासिक परिवर्तन के अधीन;
सूती कपड़े, क्राफ्ट पेपर से बने डबल सॉफ्ट पैकेजिंग में - 3 दिन। (72 घंटे)।
विधि के नुकसान:
अस्थिर धातुओं से बने उपकरणों के क्षरण का कारण बनता है;
घनीभूत होकर, यह निष्फल उत्पादों को मॉइस्चराइज़ करता है, जिससे भंडारण की स्थिति में सुधार होता है और एम / ओ के पुन: दूषित होने का खतरा बढ़ जाता है।
वायु विधि।
स्टरलाइज़िंग एजेंट शुष्क गर्म हवा है। विधि की एक विशिष्ट विशेषता यह है कि पैकेजिंग और उत्पादों की नमी नहीं होती है, और बाँझपन अवधि में कमी के साथ-साथ धातुओं का क्षरण भी होता है।
नसबंदी मोड:
पहला मोड (मुख्य) - टी 180 0 - 60 मिनट। - जंग प्रतिरोधी धातुओं सहित "200 0 सी", धातु उत्पादों के रूप में चिह्नित सीरिंज सहित कांच उत्पादों की नसबंदी के लिए डिज़ाइन किया गया।
दूसरा मोड (कोमल) - टी 160 0 - 150 मिनट। - सिलिकॉन रबर से बने उत्पादों के साथ-साथ कुछ उपकरणों और उपकरणों के कुछ हिस्सों की नसबंदी के लिए अभिप्रेत है।
नसबंदी की स्थिति: उत्पादों को पैकेजिंग पेपर में पैक किए गए जाल पर पैकेजिंग के बिना निष्फल किया जाता है जो वर्तमान उद्योग मानक की आवश्यकताओं को पूरा करता है।
विधि के नुकसान:निष्फल उत्पादों का धीमा और असमान ताप; उच्च तापमान का उपयोग करने की आवश्यकता; रबर, पॉलिमर से उत्पादों की नसबंदी के लिए उपयोग की असंभवता; सभी उपलब्ध पैकेजिंग सामग्री का उपयोग करने के लिए अव्यवहारिकता।
टिप्पणियाँ:सूखे उत्पादों को नसबंदी के अधीन किया जाता है; क्राफ्ट बैग में निष्फल उत्पाद, बैगी वेट-स्ट्रेंथ पेपर के बिना पैकेजिंग, स्टोर - 3 दिन। (72 घंटे); शहद के लिए क्रेप पेपर के 2-लेयर पैकेज में। लक्ष्य - 20 दिनों तक; पैकेजिंग के बिना निष्फल उत्पादों को काम की पाली (6 घंटे) के दौरान सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में नसबंदी के तुरंत बाद उपयोग किया जाना चाहिए।
ग्लासपरलेन विधि।ऑल-मेटल डेंटल और कॉस्मेटिक उपकरणों को कांच के मोतियों को माध्यम में 190-250 0 तक गर्म करके विसर्जित किया जाता है।
प्रसंस्करण समय विशिष्ट अजीवाणु के उपयोग के लिए निर्देशों में इंगित किया गया है।