Metode fizice de sterilizare.
MINISTERUL SĂNĂTĂȚII AL FEDERĂȚIA RUSĂ
AUTORIZARE FARMACOPEIANĂ GENERALĂ
SterilizareaOFS.1.1.0016.15
În loc de art. GFXI, problema 2
Prezenta Monografie Farmacopeea Generală stabilește metodele și condițiile de sterilizare utilizate la prepararea medicamentelor sterile.
Sterilitatea este înțeleasă ca absența microorganismelor viabile și a sporilor acestora.
Sterilizarea este un proces validat utilizat în prepararea formelor de dozare sterile pentru a elibera produsul, echipamentele, excipienții și ambalarea din microorganismele vii și sporii acestora.
La modificarea condițiilor de sterilizare, inclusiv la modificarea volumului încărcăturii sterilizatorului, este necesară revalidarea.
Metodele descrise mai jos sunt aplicabile pentru inactivarea bacteriilor, drojdiilor și mucegaiurilor.
Dacă este posibil, produsele sunt sterilizate în ambalajul final (sterilizare finală).
În cazurile în care sterilizarea finală nu este posibilă, se utilizează metoda de filtrare prin membrană sau producerea de medicamente în condiții aseptice fără sterilizarea ulterioară a produsului final. În plus, este posibil să se efectueze prelucrarea obiectului (de exemplu, sterilizarea prin radiații gamma) în ambalajul final. În toate cazurile, ambalajul și închiderea trebuie să asigure sterilitatea medicamentului pe toată durata de valabilitate.
NIVEL DE ASIGURARE A STERILITATII
Pentru metodele descrise mai jos, dacă este necesar, este indicat nivelul de asigurare a sterilității (SAL).
Nivelul de asigurare a sterilizării unui proces de sterilizare este gradul de asigurare cu care procesul asigură sterilitatea tuturor articolelor dintr-un lot. Pentru un proces dat, nivelul de asigurare a sterilității este definit ca probabilitatea de a avea un articol nesteril în lot. De exemplu, un SRL de 10 -6 înseamnă că există o probabilitate de cel mult un microorganism viabil într-un lot sterilizat de 106 produse finite. Nivelul de asigurare a sterilității procesului de sterilizare pentru un anumit produs este stabilit în timpul procesului de validare.
METODE ŞI CONDIŢII DE STERILIZARE
Sterilizarea poate fi efectuată printr-una dintre următoarele metode sau o combinație a acestora.
- Metode termice:
- abur saturat sub presiune (autoclavare);
- aer cald (sterilizare aer).
- Metode chimice:
- gaze;
- soluții antiseptice.
- Sterilizare prin filtrare (prin filtre cu dimensiunea porilor cerută).
- Metoda de sterilizare prin radiații.
Utilizarea unei modificări sau combinații a acestor metode este permisă cu condiția ca procesul de sterilizare ales să fie validat pentru a asigura atât eficacitatea procesului, cât și integritatea produsului, a ambalajului și a închiderii.
Pentru toate metodele de sterilizare, inclusiv atunci când se utilizează condiții standard, pentru a confirma că sunt îndeplinite condițiile de sterilizare necesare pentru întregul lot de produs, monitorizarea este efectuată pe tot parcursul procesului de sterilizare în etapele critice ale producției.
Sterilizare termica
Sterilizare cu abur saturat sub presiune (autoclavare)
Sterilizarea cu abur saturat se efectuează la o temperatură
120 - 122°C la o presiune de 120 kPa și la o temperatură de 130 - 132 °C la o presiune de 200 kPa. Această metodă este folosită cel mai adesea pentru soluții apoase și alte forme de dozare lichide în fiole, fiole sau alte tipuri de ambalaje închise ermetic, presterilizate. Sterilizarea se realizează în sterilizatoare cu abur (autoclave). Condițiile standard sunt încălzirea la o temperatură de 120 - 122 ° C timp de 8-15 minute. Timpul de sterilizare depinde de proprietățile fizico-chimice și de volumul produsului, precum și de echipamentul utilizat (Tabelul 1).
Tabel 1 - Timpi de sterilizare pentru diferite volume de soluție
Grăsimile și uleiurile sunt sterilizate la o temperatură de 120 - 122 ° C timp de 2 ore.
Produsele din sticlă, porțelan, metal, pansamente și materiale auxiliare, dacă este necesar, haine tehnologice sanitare, se sterilizează la o temperatură de 120 - 122 ° C - timp de 45 de minute, la
130 - 132 ° С - timp de 20 de minute. Pentru a steriliza produsele din cauciuc, utilizați primul dintre aceste moduri.
Alte combinații de timp și temperatură sunt permise dacă s-a dovedit anterior că regimul de sterilizare selectat asigură nivelul necesar și reproductibil de distrugere microbiană. Procedurile utilizate trebuie să ofere un nivel de asigurare a sterilității de cel mult 10-6.
Autoclava este încărcată astfel încât să asigure uniformitatea temperaturii pe toată durata încărcăturii. În timpul procesului de autoclavare, trebuie înregistrate condițiile procesului de sterilizare (temperatură, presiune și timp). Temperatura se măsoară de obicei folosind termocupluri plasate în pachete de control, împreună cu termocupluri suplimentare amplasate în locurile cele mai reci ale camerei de sterilizare, care sunt instalate în prealabil. Condițiile fiecărui ciclu de sterilizare sunt înregistrate, de exemplu, sub forma unei diagrame temperatură-timp sau într-un alt mod adecvat.
Pentru a evalua eficacitatea fiecărui ciclu de sterilizare, este posibil să se utilizeze atât indicatori chimici (termo-temporali) cât și biologici.
Sterilizare cu aer cald (sterilizare cu aer)
Pentru această metodă de sterilizare termică, condițiile standard sunt încălzirea la o temperatură de cel puțin 160 °C timp de cel puțin
2 ore
Pentru sterilizarea substanţelor pulverulente rezistente la căldură (clorură de sodiu, oxid de zinc, talc, argilă albă etc.) sau uleiuri minerale şi vegetale, grăsimi, lanolină, vaselină, ceară etc., temperatura şi timpul de sterilizare se stabilesc în funcţie de asupra masei probei (Tabelul 2 și 3).
Tabel 2 - Condiții de sterilizare pentru pulberi rezistente la căldură
Tabel 3 - Condiții de sterilizare pentru uleiuri minerale și vegetale, grăsimi, lanolină, vaselină, ceară etc.
Produsele din sticla, metal, portelan, unitati de filtrare sterilizatoare cu filtre si recipiente de filtrat se sterilizeaza la o temperatura de 180 °C timp de 60 de minute, sau la o temperatura de 160 °C timp de 2,5 ore.
Sterilizarea cu aer peste 220°C este folosită în mod obișnuit pentru sterilizarea și depirogenarea ambalajelor din sticlă. În acest caz, ar trebui dovedită o reducere de 3 ordine de mărime a cantității de endotoxine rezistente la căldură în loc să se utilizeze indicatori biologici.
Pot fi utilizate combinații de timp și temperatură dacă s-a dovedit anterior că regimul de sterilizare selectat asigură nivelul necesar și reproductibil de distrugere microbiană. Procedurile utilizate trebuie să ofere un nivel de asigurare a sterilității de cel mult 10-6.
Sterilizarea aerului se realizează într-un cabinet special de căldură uscată cu circulație forțată a aerului steril sau pe alte echipamente special concepute în acest scop. Dulapul de sterilizare este încărcat astfel încât să asigure uniformitatea temperaturii pe întreaga încărcătură. Temperatura din dulapul de sterilizare se măsoară de obicei folosind termocupluri plasate în pachete de control, împreună cu termocupluri suplimentare amplasate în locurile cele mai reci ale dulapului de sterilizare, care sunt instalate în prealabil. Temperatura și timpul sunt înregistrate în timpul fiecărui ciclu de sterilizare. Pentru a evalua eficacitatea fiecărui ciclu de sterilizare, este posibil să se utilizeze atât indicatori chimici (termo-temporali) cât și biologici.
Sterilizarea chimică
Sterilizarea chimică se realizează cu gaz sau soluții.
Sterilizarea cu gaz
Sterilizarea cu gaz este utilizată numai dacă alte metode nu pot fi utilizate. Cu această metodă de sterilizare, trebuie să se asigure pătrunderea gazului și umidității în produsul sterilizat, precum și degazarea și îndepărtarea ulterioară a produselor de descompunere din produsul sterilizat la un nivel care să nu provoace un efect toxic la utilizarea medicamentului. .
Sterilizarea cu gaz se realizează în sterilizatoare cu gaz sau microaerostate (aparate portabile) echipate cu sistem de alimentare cu gaz și de degazare post-sterilizare. Oxidul de etilenă este de obicei folosit ca gaz. Datorită pericolului ridicat de incendiu, poate fi amestecat cu orice gaz inert.
Sterilizarea cu gaz se efectuează în următoarele moduri:
- - oxid de etilena: doza de sterilizare 1200 mg/dm 3, temperatura nu mai mica de
18 °C, umiditate relativă 80%, timp de menținere - 16 ore (dispozitiv portabil); - - un amestec de oxid de etilenă și bromură de metil (1:2,5):
a) doza de sterilizare 2000 mg/dm 3, temperatura 55°C, umiditate relativa 80%, timp de expunere 4 ore;
b) doza de sterilizare 2000 mg/dm 3 , temperatura nu mai mica de 18 °C, umiditate relativa 80%, timp de expunere 16 ore.
Este permisă utilizarea altor moduri de sterilizare cu gaz validate care asigură sterilitatea și siguranța obiectului.
Oxidul de etilenă poate fi mutagen și toxic, mai ales atunci când se utilizează materiale care conțin ioni de clorură. Datorită toxicității oxidului de etilenă și bromurii de metil, utilizarea produselor sterilizate cu aceste gaze este permisă numai după degazarea acestora, adică expunerea într-o încăpere ventilată la cantitățile reziduale admise specificate în documentația de reglementare.
Condițiile de degazare depind de scopul, metoda de aplicare, dimensiunile produsului, materialul și ambalajul produsului și sunt specificate în documentația de reglementare și tehnică a produsului.
Atunci când este posibil, în timpul procesului de sterilizare se înregistrează următorii indicatori: concentrația gazului, umiditatea relativă, temperatura și timpul de sterilizare. Măsurătorile se efectuează în acele zone în care condițiile de sterilizare sunt cele mai proaste realizate, ceea ce se stabilește în timpul procesului de validare.
Produsele sterilizate sunt ambalate în pungi de folie de polietilenă cu o grosime de 0,06 până la 0,20 mm, pergament etc. Metoda este recomandată pentru produsele din cauciuc, materiale polimerice, sticlă, metal.
Eficacitatea procesului de sterilizare cu gaz este verificată la fiecare încărcătură folosind indicatori biologici.
Înainte de eliberarea fiecărui lot, sterilitatea este verificată pe un anumit număr de probe.
Sterilizare chimică cu soluții
Sterilizarea chimică se realizează cu soluții antiseptice (peroxid de hidrogen și peracid). Eficacitatea sterilizării cu soluții antiseptice depinde de concentrația substanței active, timpul de sterilizare și temperatura soluției de sterilizare.
La sterilizarea cu o soluție de peroxid de hidrogen 6%, temperatura soluției de sterilizare trebuie să fie de cel puțin 18 ° C, timpul de sterilizare este de 6 ore; la o temperatură de 50 ° C - 3 ore.
La sterilizarea cu o soluție 1% de deoxon-1 (cu acid peracetic), temperatura soluției de sterilizare trebuie să fie de cel puțin 18 ° C, timpul de sterilizare este de 45 de minute.
Sterilizarea chimică cu soluții antiseptice se efectuează în recipiente închise din sticlă, plastic sau recipiente acoperite cu email intact, cu produsul complet scufundat în soluție pe durata sterilizării. După aceea, produsul este spălat cu apă sterilă în condiții aseptice.
Metoda de sterilizare cu soluții antiseptice este utilizată pentru produsele din materiale polimerice, cauciuc, sticlă, metale rezistente la coroziune.
Sterilizarea prin filtrare
Unele ingrediente active și medicamente care nu pot fi sterilizate în mod terminal prin oricare dintre metodele descrise mai sus pot fi sterilizate folosind filtre cu membrană. Astfel de produse necesită precauții speciale. Procesul de fabricație și mediul de lucru ar trebui să asigure că riscul de contaminare microbiană este menținut la minimum și ar trebui să fie monitorizate în mod regulat. Echipamentele, ambalajele, dispozitivele de închidere și, acolo unde este posibil, ingredientele trebuie să fie sterilizate în mod corespunzător. Se recomandă filtrarea imediat înainte de a umple pachetul. Operatiunile urmatoare filtrarii se desfasoara in conditii aseptice.
Prefiltrarea se realizează prin filtre cu membrană cu o dimensiune a porilor de cel mult 0,45 μm. Apoi soluțiile sunt trecute prin filtre cu membrană cu o dimensiune nominală a porilor de cel mult 0,22 microni, capabile să rețină cel puțin 107 microorganisme. Pseudomonas diminuta pe centimetru pătrat de suprafață. Pot fi utilizate și alte tipuri de filtre care asigură aceeași eficiență de filtrare.
Adecvarea filtrelor cu membrană este stabilită prin teste microbiologice folosind microorganisme adecvate, de ex. Pseudomonas diminuta(ATCC 19146, NCIMB 11091 sau CIP 103020). Se recomandă utilizarea a cel puțin 10 7 CFU/cm 2 de suprafață activă a filtrului. Suspensia de microorganisme trebuie preparată în bulion de triptonă-soia, care, după trecerea prin filtru, este colectată aseptic și incubată în condiții aerobe la o temperatură care nu depășește 32 °C.
Nivelul de filtrare este definit ca valoarea logaritmului de reducere (LDR) a contaminării microbiene. De exemplu, dacă 107 microorganisme sunt reținute în timpul filtrării printr-un filtru cu membrană cu o dimensiune a porilor de 0,22 µm, VLS este de cel puțin 7.
Trebuie luate în considerare nivelul de contaminare microbiană înainte de filtrare, debitul filtrului, dimensiunea lotului de produs, durata de filtrare și pentru a evita contaminarea produsului cu microorganisme din filtru. Perioada de utilizare a filtrului nu trebuie să depășească timpul stabilit în timpul validării acestui filtru în combinație cu un anumit produs filtrat. Nu reutilizați filtre cu membrană.
Integritatea filtrului cu membrană gata de utilizare este verificată înainte și după filtrare prin teste adecvate tipului de filtru și stadiului de verificare, de exemplu, testul de saturație („punct de bule”) prin metoda fluxului de difuzie sau presiunea de menținere .
Datorită riscului potențial mai mare asociat cu sterilizarea prin filtrare în comparație cu alte metode de sterilizare, prefiltrarea prin filtre cu membrană este recomandată în cazurile în care niveluri scăzute de contaminare microbiană nu pot fi atinse prin alte mijloace.
Primirea medicamentelor în condiții asepticefără sterilizarea ulterioară a produsului final
Scopul obținerii de medicamente în condiții aseptice fără sterilizarea ulterioară a produsului final este de a menține sterilitatea medicamentului folosind componente, fiecare dintre acestea fiind sterilizat anterior printr-una dintre metodele descrise mai sus. Acest lucru se realizează prin desfășurarea procesului în încăperi de o anumită clasă de curățenie, precum și prin utilizarea condițiilor și a echipamentelor care asigură sterilitatea.
În condiții aseptice, se pot desfășura: procesul de umplere a ambalajului, acoperire, amestecare aseptică a ingredientelor, urmată de umplere și acoperire aseptică. Pentru a menține sterilitatea ingredientelor și a produsului finit în timpul procesului de fabricație, trebuie acordată o atenție deosebită:
- – starea mediului de producție;
- – personalul;
- – suprafete critice;
- – sterilizarea ambalajelor și închiderilor și procedurilor de transfer;
- - timpul maxim admisibil de păstrare a produsului până la umplerea ambalajului final.
Validarea procesului include verificarea adecvată a tuturor celor de mai sus, precum și controale sistematice folosind teste de simulare folosind medii de cultură care sunt incubate și examinate pentru contaminare microbiană (teste de umplere cu mediu). Înainte de eliberarea fiecărui lot de produs sterilizat cu filtru și/sau fabricat aseptic, testarea sterilității trebuie efectuată pe un număr adecvat de probe.
Metoda de sterilizare prin radiații
Metoda de sterilizare prin radiații se realizează prin iradierea produsului cu radiații ionizante. Această metodă poate fi utilizată pentru sterilizarea materiilor prime din plante, medicamente din plante, medicamente din plante etc.
radiația y, a cărei sursă poate fi fie un element radioizotop (de exemplu, cobalt-60), fie un fascicul de electroni furnizat de un accelerator de electroni corespunzător.
Pentru această metodă de sterilizare se stabilește doza de absorbție de la
10 până la 50 kGy. Alte doze pot fi utilizate dacă s-a dovedit anterior că regimul selectat asigură nivelul necesar și reproductibil de letalitate al microorganismelor. Procedurile și precauțiile utilizate trebuie să ofere un nivel de asigurare a sterilității de cel mult 10-6.
Avantajul sterilizării cu radiații este reactivitatea sa scăzută și o doză de radiații ușor de controlat, care poate fi măsurată cu precizie. Sterilizarea prin radiații are loc la o temperatură minimă, cu toate acestea, pot exista limitări atunci când se utilizează anumite tipuri de ambalaje din sticlă și plastic.
În timpul procesului de sterilizare cu radiații, radiațiile absorbite de produsul finit trebuie monitorizate în mod constant folosind metode dozimetrice stabilite, indiferent de doză. Dozimetrele sunt etalonate față de o sursă standard la o instalație de radiație de referință la primirea de la furnizor și apoi la intervale care nu depășesc un an.
Dacă se oferă o evaluare biologică, aceasta se realizează folosind indicatori biologici.
INDICATORI BIOLOGICI DE STERILIZARE
Indicatorii biologici sunt preparate standardizate ale anumitor microorganisme utilizate pentru a evalua eficacitatea unui proces de sterilizare.
Un indicator biologic este de obicei spori bacterieni aplicați pe un purtător inert, cum ar fi o bandă de hârtie de filtru, o placă de sticlă sau un tub de plastic. Purtătorul inoculat este izolat pentru a preveni deteriorarea sau contaminarea acestuia și, în același timp, pentru a asigura contactul agentului de sterilizare cu microorganismele. Suspensiile de spori pot fi în fiole închise ermetic.
Indicatorii biologici sunt pregătiți astfel încât să le asigure siguranța în anumite condiții; trebuie să aibă o dată de expirare.
Aceleași tulpini bacteriene care sunt utilizate în producerea indicatorilor biologici pot fi inoculate direct în produsul lichid care urmează să fie sterilizat sau într-un produs lichid similar celui care este sterilizat. În acest caz, trebuie demonstrat că produsul lichid nu are un efect inhibitor asupra sporilor, în special asupra germinării acestora.
Pentru un indicator biologic sunt indicate următoarele caracteristici: tipul de bacterii utilizate ca microorganisme de referință; numărul tulpinii din colecția originală; numărul de spori viabili per purtător; valoare D.
Valoare D– valoarea parametrului de sterilizare (durata sau doza absorbita) care reduce numarul de microorganisme viabile la 10% din numarul lor initial. Această valoare are sens pentru condiții de sterilizare experimentală bine definite. Indicatorul biologic trebuie să conțină doar microorganismele specificate. Este permisă utilizarea indicatorilor biologici care conțin mai mult de un tip de bacterii pe un purtător. Trebuie furnizate informații despre mediul de cultură și condițiile de incubație.
Se recomandă amplasarea indicatorilor în zonele cel mai puțin accesibile agentului de sterilizare, determinate anterior empiric sau pe baza măsurătorilor fizice preliminare. După expunerea la agentul de sterilizare, purtătorul de spori este transferat într-un mediu nutritiv în condiții aseptice.
Este permisă folosirea indicatorilor biologici ai producției industriale în fiole închise cu un mediu nutritiv plasat direct în ambalaj care protejează purtătorul inoculat.
Alegerea microorganismelor de referință pentru indicatorii biologici se efectuează ținând cont de următoarele cerințe:
- - rezistența tulpinii de testat la o anumită metodă de sterilizare trebuie să fie mai mare decât rezistența tuturor microorganismelor patogene și a altor microorganisme care contaminează produsul;
- - tulpina testată trebuie să fie nepatogenă;
- – tulpina de testare trebuie să fie ușor de cultivat.
Dacă, după incubare, se observă creșterea microorganismelor de referință, aceasta indică un proces de sterilizare nesatisfăcător.
Caracteristici ale utilizării indicatorilor biologici de sterilizare
Sterilizarea cu abur saturat sub presiune
Indicatorii biologici pentru monitorizarea sterilizării cu abur saturat sub presiune sunt recomandați pentru utilizare în validarea ciclurilor de sterilizare. Se recomandă utilizarea bacil stearothermophilus(de exemplu, ATCC 7953, NCTC 10007, NCIMB 8157 sau CIP 52.81). Numărul de spori viabili trebuie să depășească 5 x 10 5 per purtător. Valoare D la o temperatură de 121 ° C ar trebui să fie mai mult de 1,5 minute. Când un indicator biologic este tratat cu abur la o temperatură de (121 ± 1) °C sub o presiune de 120 kPa timp de 6 minute, trebuie respectată conservarea sporilor viabili, iar tratamentul la aceeași temperatură timp de 15 minute ar trebui să conducă la moartea completă a microorganismelor de referință.
Sterilizarea aerului
Recomandat pentru pregătirea indicatorilor biologici bacil subtilis(De exemplu, var. Niger ATCC 9372, NCIMB 8058 sau CIP 77.18). Numărul de spori viabili trebuie să depășească 1 ∙ 10 5 pe purtător, valoarea D la o temperatură de 160 °C este de 1 - 3 min. Aerul cald la temperaturi peste 220°C este adesea folosit pentru sterilizarea și depirogenizarea echipamentelor din sticlă. În acest caz, o scădere a cantității de endotoxine bacteriene rezistente la căldură cu 3 ordine de mărime poate servi ca înlocuitor pentru indicatorii biologici.
Sterilizarea prin radiații
Indicatorii biologici pot fi utilizați pentru a monitoriza operațiunile în curs ca o evaluare suplimentară a eficacității unei doze date de radiații, în special în cazul sterilizării cu electroni accelerați. Se recomandă dispute bacil pumilus(de exemplu, ATCC 27.142, NCTC 10327, NCIMB 10692 sau CIP 77.25). Numărul de spori viabili trebuie să depășească 1 ∙ 10 7 per purtător. Valoare D ar trebui să fie mai mare de 1,9 kGy. Trebuie verificat că după iradierea indicatorului biologic cu o doză de 25 kGy (doza minimă absorbită) nu se observă creșterea microorganismelor de referință.
Sterilizarea cu gaz
Utilizarea indicatorilor biologici este esențială pentru toate procedurile de sterilizare cu gaz, atât pentru validarea ciclului, cât și pentru operațiunile de rutină. Se recomandă utilizarea sporilor bacil subtilis(De exemplu, var. Niger ATCC 9372, NCIMB 8058 sau CIP 77.18) când se utilizează oxid de etilenă. Numărul de spori viabili trebuie să depășească 5 x 10 5 per purtător. Parametrii de stabilitate sunt următorii: D este mai mult de 2,5 min pentru un test de ciclu la 600 mg/l oxid de etilenă, 54°C și 60% umiditate relativă. Trebuie verificat că după un ciclu de sterilizare de 60 de minute cu parametrii specificați nu se observă creșterea microorganismelor de referință, în timp ce după un ciclu de sterilizare de 15 minute la o temperatură mai scăzută (600 mg/l, 30 °C, umiditate 60% ), viabilitatea sporilor este menținută.
Indicatorul biologic ar trebui să poată detecta umiditatea insuficientă în sterilizator și produs: atunci când este expus la oxid de etilenă la o concentrație de 600 mg/l la o temperatură de 54 °C timp de 60 de minute fără umiditate, viabilitatea sporilor trebuie menținută. .
MINISTERUL EDUCAȚIEI ȘI ȘTIINȚEI
UNIVERSITATEA FEDERALĂ BALTICĂ
NUMIT DUPA IMMANUEL KANT
FACULTATEA DE BIOECOLOGIE
METODE DE STERILIZARE
Elevii anul II
Învățământ cu normă întreagă
Pankina A. N.,
Voloshina A. Yu.
Kaliningrad
Introducere……………………………………………………………………………………………..3
Metode de sterilizare…………………………………………………………………….……4
1 Metode de sterilizare fizică………………………………………….….5
1.1 Aprindere………………………………………………………..……..5
1.2 Sterilizarea cu căldură uscată……………………………………………..5
1.3 Sterilizarea cu căldură umedă……………………………………………..5
1.4 Fierberea…………………………………………………………………………....5
1.5 Sterilizarea cu abur…………………………………………...6
1.6 Autoclavarea……………………………………………………………………….6
1.7 Sterilizarea fracționată……………………………………….………....7
1.8 Pasteurizarea……………………………………………………………….7
1.9 Tindalizare……………………………………………………….……..7
2 Metode de sterilizare chimică………………………………….…………….8
2.1 Metoda lichidului………………………………………………………………….8
2.2 Metoda gazului………………………………………………………….…………….8
2.3 Plasma…………………………………………………….………….9
3 Sterilizarea prin radiații ionizante………………………………………9
3.1 Metoda radiației……………………………………….…………..10
3.2 Radiația ultravioletă……………………………………………………….10
Introducere
Sterilizarea este eliberarea completă a oricărui obiect din toate tipurile de microorganisme, inclusiv bacterii și sporii acestora, ciuperci, virioni, precum și din proteinele prionice care se găsesc pe suprafețe, echipamente, alimente și medicamente. Se realizează prin metode termice, chimice, radiații, filtrare.
Etape de sterilizare:
dezinfectare;
curățare pre-sterilizare (PSO);
sterilizare.
Metode de sterilizare
1 Metode fizice de sterilizare
Metodele fizice de sterilizare includ efectul temperaturii ridicate asupra obiectelor sterilizate (sterilizare termică), precum și expunerea la radiații ultraviolete, curenți de înaltă frecvență, vibrații ultrasonice, radiații radioactive, raze infraroșii etc.
În practica farmaciei, pentru sterilizarea vaselor și medicamentelor se folosesc numai metode bazate pe expunerea la temperaturi ridicate. Iradierea cu ultraviolete este utilizată în principal pentru dezinfectarea aerului din spațiile farmaciei, recipientelor și rețetelor care intră în farmacie.
Utilizarea temperaturii ridicate pentru sterilizare se bazează pe coagularea ireversibilă a protoplasmei, distrugerea pirogenetică a acesteia și deteriorarea sistemelor enzimatice ale celulei microbiene. Temperatura și durata încălzirii necesare pentru obținerea sterilității pot varia în funcție de tipul de microfloră și de alte condiții.
Majoritatea agenților patogeni mor la aproximativ 60°C, dar sporii lor pot rezista la temperaturi mult mai ridicate. Aburul curgător și apa clocotită ucid microorganismele mult mai repede, dar mulți spori supraviețuiesc câteva ore în aceste condiții (mai ales în medii vâscoase). Vaporii de apă puri sunt mai puternici decât atunci când sunt amestecați cu aer.
Aburul sub presiune (la temperaturi peste 100°C) ucide microorganismele mai repede. Aerul cald uscat ucide bacteriile și sporii lor la o temperatură mai mare decât aburul. Alegerea metodei depinde de proprietățile obiectului de sterilizat. Atunci când aleg o metodă de sterilizare, ei se străduiesc să elimine complet microflora și sporii vii, păstrând în același timp substanța medicinală neschimbată.
Calcinare
Aprinderea este unul dintre cele mai fiabile tipuri de sterilizare. Se realizează în cuptoare cu mufă sau creuzet prin încălzirea obiectului la 500-800 ° sau prin calcinarea lui pe foc gol. Folosit pentru sterilizarea ace de seringă de platină, filtre de porțelan și alte articole din porțelan. Nu este recomandată sterilizarea în acest fel a obiectelor din oțel, deoarece acestea ruginesc și își pierd întărirea.
Sterilizare la căldură uscată
Obiectul de sterilizat se încălzește într-un cuptor la temperatura de 180°C timp de 20-40 minute sau la 200°C timp de 10-20 minute. Căldura uscată sterilizează vase din sticlă și porțelan, grăsimi, vaselina, glicerina, pulberile termorezistente (caolin, streptocid, talc, sulfat de calciu, oxid de zinc etc.).
Este imposibil să sterilizați soluțiile apoase în baloane în dulapuri de uscare, deoarece apa la temperaturi ridicate se transformă în abur și balonul poate fi spart.
Sterilizarea la caldura umeda
Atunci când se utilizează această metodă de sterilizare, se combină efectele temperaturii ridicate și ale umidității. Dacă căldura uscată provoacă în principal distrugerea pirogenetică a microorganismelor, atunci căldura umedă provoacă coagularea proteinelor, care necesită participarea apei.
În practică, sterilizarea cu căldură umedă se efectuează la o temperatură de 50-150 ° și se realizează în următoarele moduri.
Fierbere
Această metodă sterilizează obiecte din cauciuc, instrumente chirurgicale, sticlărie. Nu se recomandă utilizarea fierberii pentru sterilizarea soluțiilor injectabile, deoarece este semnificativ inferior sterilizării cu abur în ceea ce privește eficiența.
Sterilizare cu abur
Fluidul se numește vapori de apă saturati (fără amestec de aer), având o presiune de 760 mm Hg. Artă. și o temperatură de 100°. Sterilizarea cu abur curgător se efectuează într-un sterilizator cu abur sau în autoclavă la 100°C timp de 15-60 minute, în funcție de volumul soluției. Aceasta este una dintre metodele comune de sterilizare a soluțiilor injectabile în farmacii.
Autoclavare
Sterilizare cu abur sub presiune (autoclavare). Se realizează în autoclave de diferite modele. Autoclava este un vas închis ermetic format dintr-o cameră de sterilizare cu pereți groși și o carcasă. Autoclava are o supapă de siguranță care permite aburului să iasă la suprapresiune și un manometru. Fiecare autoclavă trebuie să aibă instrucțiuni de funcționare și întreținere, precum și un pașaport de supraveghere a cazanului.
Obiectul de sterilizat este plasat în interiorul camerei de abur. Camera de apă este supusă încălzirii. În primul rând, autoclava este încălzită cu robinetul deschis până când aburul curge într-un flux puternic continuu și deplasează aerul din autoclavă, ceea ce reduce semnificativ conductivitatea termică a vaporilor de apă (cu un conținut de 5% aer în vapori de apă, scade cu 50%).
În timpul încălzirii autoclavei după închiderea supapei, este necesar să se monitorizeze presiunea, în paralel cu creșterea căreia temperatura aburului crește.
Autoclavarea este cea mai fiabilă metodă de sterilizare. De obicei, sterilizarea în autoclavă se efectuează la 119-121°C timp de 5-30 minute, în funcție de volumul soluției. Aceasta garanteaza o sterilizare suficient de completa, indiferent de tipul de microorganism. Astfel, se sterilizează vasele, filtrele din hârtie și sticlă, instrumentele, soluțiile apoase de substanțe medicinale rezistente la temperaturi ridicate și pansamentele.
Sterilizarea fracționată
În sterilizarea fracționată, un obiect (de obicei o soluție apoasă) se încălzește cu abur fluid la 100°C timp de 30 de minute, apoi soluția se menține la temperatura camerei timp de 24 de ore, după care se sterilizează din nou în aceleași condiții (30 de minute). la 100°C). Ciclul descris se repetă de 3-5 ori. În timpul primei încălziri, formele vegetative ale microorganismelor mor, în timpul încălzirii ulterioare, formele vegetative nou apărute. Datorită duratei, această metodă este rar folosită în farmacii.
Pasteurizare
Încălzirea unică a obiectului la o temperatură de 60° timp de 1 oră sau la o temperatură de 70-80° timp de 30 de minute. Vă permite să distrugeți formele vegetative ale microbilor (cu excepția celor termofile), dar nu și sporii.
Tindalizare
Tindalizare (pasteurizare fracționată). În timpul tindalizării, obiectul este încălzit la o temperatură de 60-65° timp de 1 oră zilnic timp de 5 zile sau la 70-80° timp de 3 zile. Acesta este un mod fiabil și blând de a steriliza substanțele medicinale termolabile. Cu toate acestea, datorită duratei sale, nu este foarte potrivit pentru farmacii și aproape niciodată nu este folosit în acestea din urmă.
Metode chimice de sterilizare
metoda lichida
Cu ajutorul sterilizării lichide sunt prelucrate produse din materiale termosensibile. Prelucrarea se realizează folosind soluții chimice speciale folosind camere.
Sunt un recipient din oțel inoxidabil cu capac și un raft perforat. Uneltele sunt prelucrate sub acțiunea unei soluții speciale, care, dacă este necesar, poate fi încălzită.
Astfel de camere pot fi folosite și pentru depozitarea și transportul uneltelor.
metoda gazelor
Sterilizarea cu gaz se realizează prin metode cu oxid de etilenă și formaldehidă. Pentru aceasta se folosesc instalații staționare speciale.
Metoda oxidului de etilenă este potrivită pentru prelucrarea produselor din plastic și polimeri, optică. Se realizează folosind o cameră de gaz specială. Aerul este evacuat din cameră, iar obiectele introduse în ea sunt tratate cu gaz.
Metoda formaldehidei este mai potrivită pentru dezinfecție, deoarece formaldehida are caracteristici scăzute de penetrare. În plus, temperatura din camera de procesare ar trebui să atingă 80°C.
Principalul avantaj al metodelor de sterilizare cu gaz este modul de temperatură scăzută al procesului, care face posibilă prelucrarea instrumentelor care nu permit expunerea la temperatură ridicată și umiditate.
Sterilizatoarele cu gaz sunt echipate cu un sistem de utilizare a gazului, ceea ce le face inofensive atât pentru oameni, cât și pentru mediu. Echipamentul este echipat cu aeratoare încorporate. Agentul de sterilizare este în cartușe sigilate înlocuibile, care se deschid numai atunci când dispozitivul este complet sigilat.
Plasma
Metoda de sterilizare cu plasmă este cea mai modernă și practică metodă care vă permite să procesați orice produse și dispozitive medicale care sunt sensibile la umiditate și temperatură. Această metodă se bazează pe crearea unui mediu biocid folosind plasmă la temperatură joasă și o soluție apoasă de peroxid de hidrogen.
La utilizarea metodei cu plasmă, toate tipurile de microorganisme sub orice formă sunt distruse, nu se generează deșeuri toxice.
Prelucrarea într-un sterilizator cu plasmă este un proces uscat, are loc la temperaturi de până la 60°C și durează de la 35 de minute.
Această metodă își găsește cea mai largă aplicație în prelucrarea sistemelor optice, a produselor din materiale polimerice, a instrumentelor și cablurilor electrice, a endoscoapelor și a instrumentelor aferente, a senzorilor, a implanturilor și a altor produse.
Metoda cu plasmă este una dintre cele mai relevante și de încredere metode astăzi.
Sterilizarea prin radiații ionizante
metoda radiatiei
Metoda de radiație sau sterilizarea cu radiații cu raze γ este utilizată în instalații speciale de sterilizare industrială de unică folosință - seringi polimerice, sisteme de transfuzie de sânge, vase Petri, pipete și alte produse fragile și termolabile.
Radiația ultravioletă
De câțiva ani, radiația ultravioletă (UV) (lungime de undă 253,7 nm) a fost utilizată în tehnologia farmaceutică pentru sterilizare. Surse de radiații UV - lămpi de cuarț cu mercur. Acțiunea lor puternică bacteriostatică se bazează pe coincidența spectrului de emisie al lămpii și a spectrului de absorbție al ADN-ului microorganismelor, care poate fi cauza morții lor în timpul expunerii prelungite la radiația lămpii de cuarț. Cu o acțiune UV insuficient de puternică într-o celulă procariotă, procesele de reparare a luminii și întunericului sunt activate, iar celula se poate recupera. Metoda este utilizată pentru sterilizarea alimentării cu aer și a ventilației de evacuare, a echipamentelor în bixes, precum și pentru sterilizarea apei distilate.
Fierberea este o metoda de sterilizare care garanteaza sterilizarea cu conditia sa nu existe spori in materialul sterilizat. Sunt folosite pentru prelucrarea seringilor de instrumente, ustensile din sticlă și metal, tuburi de cauciuc etc.
Sterilizarea prin fierbere se realizează de obicei într-un sterilizator - o cutie metalică dreptunghiulară cu un capac etanș. Materialul de sterilizat se pune pe plasa din sterilizator si se umple cu apa. Pentru a crește punctul de fierbere și a elimina duritatea apei, adăugați 1-2% bicarbonat de sodiu (este mai bine să folosiți apă distilată). Sterilizatorul se inchide cu capac si se incalzeste Inceputul sterilizarii se considera momentul fierberii apei, timpul de fierbere este de 15-30 minute. La sfârșitul sterilizării, plasa cu unelte este îndepărtată de mânerele laterale cu cârlige speciale, iar uneltele din ea sunt luate cu pensete sau pensete sterile, care se fierb împreună cu restul uneltelor.
Sterilizarea cu abur se realizează în două moduri: 1) abur sub presiune; 2) curgerea aburului.
Sterilizare sub presiune cu abur produs în autoclavă. Această metodă de sterilizare se bazează pe efectul vaporilor de apă saturati asupra materialelor sterilizate la o presiune peste cea atmosferică. Ca urmare a unei astfel de sterilizări, atât formele vegetative, cât și cele de spori ale microorganismelor mor în timpul unui singur tratament.
Autoclavă (Fig. 12) - un cazan masiv, acoperit cu o carcasă metalică la exterior, închis ermetic cu un capac, care este înșurubat strâns la cazan cu șuruburi articulate. Un alt diametru, mai mic, care se numește camera de sterilizare, este introdus în boilerul exterior. Articolele care urmează să fie sterilizate sunt plasate în această cameră. Între ambele cazane există un spațiu liber numit cameră apă-abur. Apa este turnată în această cameră printr-o pâlnie fixată în exterior la un anumit nivel, marcată pe un tub special de dozare a apei. Când apa este fiartă într-o cameră de abur, se produce abur. Camera de sterilizare este echipată cu un robinet de evacuare cu o supapă de siguranță pentru ca aburul să iasă atunci când presiunea crește peste nivelul necesar. Un manometru este utilizat pentru a determina presiunea creată în camera de sterilizare.
Orez. 12. Schema autoclavei. M - manometru; PC - supapa de siguranta; B - pâlnie pentru apă; K 2 - robinet pentru evacuarea apei; K 3 - robinet pentru eliberarea aburului
Presiunea atmosferică normală (760 mm Hg) este considerată zero. Există o anumită relație între citirile manometrului și temperatură (Tabelul 2).
Tabelul 2. Mod de funcționare autoclavă
Autoclavele cu control automat al modului sunt acum disponibile. Pe lângă manometrul obișnuit, acestea sunt echipate cu un manometru cu electrocontact, care împiedică creșterea presiunii peste valoarea setată și astfel asigură constanta temperaturii dorite în autoclavă.
Diverse medii nutritive (cu excepția celor care conțin proteine native), lichide (soluție izotonă de clorură de sodiu, apă etc.) sunt sterilizate cu abur sub presiune; aparate, în special cele cu piese din cauciuc.
Temperatura și durata autoclavării mediilor nutritive este determinată de compoziția acestora, specificată în rețeta de preparare a mediului nutritiv. De exemplu, mediile simple (agar carne-peptonă, bulion de carne-peptonă) sunt sterilizate timp de 20 de minute la 120 ° C (1 atm). Cu toate acestea, la această temperatură este imposibil să se sterilizeze mediile care conțin proteine native, carbohidrați și alte substanțe ușor de schimbat prin încălzire. Mediile cu carbohidrați sunt sterilizate fracționat la 100°C sau într-o autoclavă la 112°C (0,5 atm) timp de 10-15 minute. Diverse lichide, dispozitive cu furtunuri de cauciuc, dopuri, lumânări bacteriene și filtre sunt sterilizate timp de 20 de minute la 120 ° C (1 atm).
Atenţie! În autoclave, materialul infectat este de asemenea neutralizat. Cupele și eprubetele care conțin culturi de microorganisme sunt plasate în găleți sau rezervoare metalice speciale cu orificii în capac pentru pătrunderea aburului și sterilizate într-o autoclavă la 126 ° C (1,5 atm) timp de 1 oră. Instrumentele sunt sterilizate în același mod după lucru. cu bacterii care generează controverse.
Numai persoane special instruite au voie să lucreze cu autoclavul, care trebuie să respecte cu strictețe și exact regulile specificate în instrucțiunile atașate dispozitivului.
Tehnica de autoclavare. 1. Înainte de lucru, verificați funcționalitatea tuturor pieselor și leparea robinetului.
2. Printr-o pâlnie fixată pe exteriorul cazanului se toarnă apă (distilată sau fiartă) până la marcajul superior al paharului de apă pentru ca să nu se formeze depuneri. Robinetul de sub pâlnie este închis.
3. Materialul de sterilizat se pune pe o plasă specială în camera de sterilizare. Articolele nu trebuie încărcate prea strâns, deoarece aburul trebuie să treacă liber între ele, altfel nu se vor încălzi la temperatura corectă și pot rămâne sterile.
4. Garnitura de cauciuc de pe capac este frecată cu cretă pentru o etanșare mai bună.
5. Capacul este închis și fixat cu șuruburi pe corpul autoclavului, iar șuruburile sunt răsucite în perechi în cruce.
6. Deschideți complet robinetul de evacuare care conectează camera de sterilizare la aerul exterior și începeți să încălziți autoclavul. Autoclava este de obicei încălzită cu gaz sau electricitate.
Când autoclavul este încălzit, apa fierbe, aburul rezultat se ridică între pereții cazanelor și prin orificii speciale din peretele cazanului interior (vezi Fig. 12), intră în camera de sterilizare și iese prin robinetul de evacuare deschis. Mai întâi, aburul scapă împreună cu aerul care se afla în autoclavă. Este esențial ca tot aerul să fie expulzat din autoclavă, altfel citirea manometrului nu va corespunde cu temperatura din autoclavă.
Apariția unui jet continuu puternic de abur indică îndepărtarea completă a aerului din autoclavă; după aceea, robinetul de evacuare este închis și presiunea din interiorul autoclavei începe să crească treptat.
7. Începutul sterilizării este considerat momentul în care citirile manometrelor ating valoarea specificată. Încălzirea este reglată astfel încât presiunea din autoclavă să nu se schimbe pentru un anumit timp.
8. După ce a trecut timpul de sterilizare, încălzirea autoclavei este oprită, aburul este eliberat prin robinetul de evacuare. Când acul manometrului scade la zero, deschideți capacul. Pentru a evita arsurile de la aburul rămas în autoclavă, deschideți capacul spre dvs.
Nivelul temperaturii din autoclavă, adică corectitudinea manometrului, poate fi verificat. Pentru aceasta se folosesc diverse substanțe care au un anumit punct de topire: antipirină (113 ° C), resorcinol și sulf (119 ° C), acid benzoic (120 ° C). Una dintre aceste substanțe se amestecă cu o cantitate neglijabilă de colorant (magenta sau albastru de metilen) și se toarnă într-un tub de sticlă, care este sigilat și plasat în poziție verticală între materialul de sterilizat. Dacă temperatura este suficientă, substanța se va topi și se va transforma în culoarea colorantului corespunzător.
Pentru a verifica eficacitatea sterilizării, o eprubetă cu o cultură de spori cunoscută este plasată în autoclavă. După autoclavare, tubul este transferat într-un termostat timp de 24-48 de ore, se observă absența sau prezența creșterii. Absența creșterii indică funcționarea corectă a dispozitivului.
Sterilizare cu abur produs în aparatul Koch. Această metodă este utilizată în cazurile în care obiectul de sterilizat se modifică la o temperatură de peste 100 ° C. Aburul fluid sterilizează mediile nutritive care conțin uree, carbohidrați, lapte, cartofi, gelatină etc.
Aparatul Koch (cazan) este un cilindru metalic învelit la exterior (pentru a reduce transferul de căldură) cu pâslă sau azbest. Cilindrul este închis cu un capac conic cu o gaură pentru a ieși din abur. În interiorul cilindrului există un suport, până la nivelul căruia se toarnă apă. Pe suport se pune o găleată cu orificiu, în care se pune materialul de sterilizat. Aparatul Koch este încălzit cu gaz sau electricitate. Timpul de sterilizare se numără din momentul eliberării viguroase a aburului la marginile capacului și de la ieșirea aburului. Sterilizați timp de 30-60 de minute. La sfârșitul sterilizării, încălzirea este oprită. Găleata cu materialul se scoate din aparat și se lasă la temperatura camerei până a doua zi. Încălzirea se efectuează timp de 3 zile la rând la o temperatură de 100 ° C timp de 30-60 de minute. Această metodă se numește sterilizare fracționată. În timpul primei încălziri, formele vegetative ale microbilor mor, în timp ce cele spori rămân. În timpul zilei, sporii au timp să germineze și să se transforme în forme vegetative care mor în a doua zi de sterilizare. Deoarece este posibil ca unii dintre spori să nu fi avut timp să germineze, materialul se păstrează încă 24 de ore, apoi se efectuează o a treia sterilizare. Sterilizarea cu abur fluid în aparatul Koch nu necesită un control special, deoarece sterilitatea mediului nutritiv pregătit servește ca un indicator al funcționării corecte a dispozitivului. Sterilizarea cu abur se poate face și în autoclavă cu capacul deșurubat și robinetul de evacuare deschis.
întrebări de testare
1. Ce medii de cultură pot fi sterilizate cu abur?
2. Ce este un sterilizator și cum funcționează?
3. De ce ar trebui folosită apa distilată pentru sterilizarea prin fierbere?
4. Descrieți dispozitivul și modul de funcționare al autoclavei.
5. Ce se sterilizează într-o autoclavă?
6. Ce controlează sterilizarea corectă în autoclavare?
7. Ce este sterilizarea cu abur?
8. Descrieți dispozitivul aparatului Koch.
9. Care este scopul sterilizării fracționate?
Exercițiu
Completati formularul.
Sterilizarea fracționată poate fi efectuată și într-un bobinator Koch.
Coagulatorul Koch este folosit pentru coagularea zerului și a mediilor nutritive de ouă, iar concomitent cu compactarea mediului, este sterilizat.
Bobinator Koch este o cutie metalica plata cu pereti dubli, acoperita la exterior cu material termoizolant. Apa este turnată în spațiul dintre pereți printr-un orificiu special situat în partea superioară a peretelui exterior. Orificiul este închis cu un dop în care este introdus un termometru. Închideți dispozitivul cu două capace: sticlă și metal. Prin capacul de sticlă, puteți observa procesul de coagulare. Tuburile de testare cu medii sunt plasate pe partea inferioară a bobinei într-o poziție înclinată.
Încălzirea bobinei se realizează cu gaz sau electricitate. Mediile sunt sterilizate o dată la o temperatură de 90 ° C timp de 1 oră sau fracționat - 3 zile la rând la 80 ° C timp de 1 oră.
Tindalizare* - sterilizare fracționată la temperaturi scăzute - utilizat pentru substanțe care sunt ușor distruse și denaturate la o temperatură de 60 ° C (de exemplu, lichide proteice). Materialul de sterilizat se încălzește într-o baie de apă sau în dispozitive speciale cu termostate la o temperatură de 56-58 ° C timp de o oră timp de 5 zile la rând.
* (Metoda de sterilizare poartă numele lui Tyndall, care a propus-o.)
Pasteurizare- sterilizare la 65-70°C timp de 1 oră, propusă de Pasteur pentru distrugerea formelor non-spore ale microbilor. Pasteurizați laptele, vinul, berea, sucuri de fructe și alte produse. Laptele este pasteurizat pentru a scăpa de acidul lactic și bacteriile patogene (Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Shigella, Salmonella, Staphylococcus etc.). Pasteurizarea berii, sucurilor de fructe, vinului ucide microorganismele care provoacă diferite tipuri de fermentație. Alimentele pasteurizate sunt cel mai bine păstrate la frigider.
întrebări de testare
1. Care este scopul și dispozitivul bobinatorului Koch?
2. Care sunt metodele de sterilizare în bobinator?
3. Ce este tindalizarea?
4. Ce este pasteurizarea?
EVALUAREA EFICIENȚEI ACȚIONĂRII ANTISEPTICELOR ȘI DEZINFECTANTELOR. DETERMINAREA SENSIBILITĂȚII BACTERIILOR LA MEDICAMENTE ANTIMICROBIENE
Introducere. Distrugerea microbilor patogeni pentru oameni este una dintre cele mai importante probleme în prevenirea și tratarea diferitelor boli. Pentru combaterea microbilor se folosesc metode de asepsie, antiseptice, dezinfecție și terapie antimicrobiană. Fiecare metodă are propriile sale scopuri și condiții specifice de aplicare.
Subiectul 7.1. METODE DE EVALUAREA EFECTULUI ANTIMICROBIAN AL FACTORILOR CHIMICI ȘI FIZICI
Introducere.asepsie - un sistem de măsuri care împiedică introducerea (pătrunderea) microorganismelor din mediu în țesuturile sau cavitățile corpului uman în timpul manipulărilor terapeutice și de diagnostic, precum și în materialul de cercetare, în mediile nutritive și culturile de microorganisme în studiile de laborator . Asepsis prevede respectarea regulilor și metodelor de lucru speciale sanitare și igienice, precum și prelucrarea specială a instrumentelor, materialelor, mâinilor lucrătorilor medicali, spațiilor etc. în scopul distrugerii parțiale (dezinfectie) sau complete (sterilizare) a microbilor.
Antiseptice- un complex de masuri terapeutice si preventive care vizeaza distrugerea microorganismelor care pot provoca un proces infectios pe zonele afectate ale pielii si mucoaselor, prin tratarea acestora cu substante microbicide - antiseptice.
Sterilizarea- distrugerea completă a microorganismelor, inclusiv a formelor vegetative și a sporilor. Există 3 grupe principale de metode de sterilizare: fizice, mecanice și chimice. Alegerea metodei folosite pentru rezolvarea unei probleme practice depinde de obiectul care trebuie sterilizat.
Dezinfectare- dezinfectarea obiectelor din mediu. Spre deosebire de sterilizare, dezinfecția are ca rezultat moartea majorității, dar nu a tuturor, formelor de microbi și astfel asigură doar o reducere a contaminării microbiene (contaminare), mai degrabă decât decontaminarea completă a obiectului. Prin urmare, obiectele care au fost dezinfectate nu sunt absolut sigure.
▲ Plan
▲ Program
1. Aseptic, antiseptic și dezinfectare. Antiseptice și dezinfectante.
2. Acțiunea antimicrobiană a factorilor fizici și chimici.
3. Metode de sterilizare; aparate folosite pentru sterilizare.
4. Metode de monitorizare a eficacitatii sterilizarii, actiunii antiseptice si dezinfectante.
Demonstrație
1. Aparatură folosită în sterilizare: autoclavă, cuptor, aparat de filtrare și iradiere UV.
DAR Exercițiu elevi
1. Luați în considerare rezultatele experimentelor efectuate cu obiecte de testare bacteriene pentru a controla eficiența sterilizării efectuate prin fierbere și autoclavare. Pentru a face o concluzie.
2. Determinați efectul antibacterian al razelor UV asupra stafilococilor și Escherichia coli folosind culturi gata preparate.
3. Luați în considerare rezultatele experimentelor puse la punct pentru a determina efectul antimicrobian al substanțelor antiseptice și dezinfectante. Pentru a face o concluzie.
Instrucțiuni
Metode de sterilizare
I. Metode fizice. Expunerea la temperaturi ridicate. Temperatura ridicată are un efect microbicid datorită capacității de a provoca denaturarea celor mai importanți biopolimeri, în primul rând proteine.
Sterilizare prin căldură uscată într-un cabinet de uscare și sterilizare (cuptoare Pasteur) se bazează pe efectul bactericid al aerului încălzit la 165-170 ° C timp de 45 de minute. La o temperatură mai ridicată are loc carbonizarea dopurilor de bumbac, a hârtiei în care sunt împachetate vasele, iar la o temperatură mai scăzută este necesară o perioadă lungă de sterilizare. Căldura uscată sterilizează sticlăria (vase Petri, eprubete, pipete etc.).
Autoclavare- Sterilizarea cu abur supraîncălzit (la presiune ridicată) într-un sterilizator cu abur (autoclavă). Una dintre cele mai eficiente metode de sterilizare, care este utilizată pe scară largă nu numai în practica microbiologică, ci și în practica clinică. Lucrul cu o autoclavă necesită implementarea exactă a instrucțiunilor speciale și respectarea regulilor de siguranță. Temperatura maximă a aburului se măsoară cu un termometru special, care se pune în autoclavă împreună cu materialul de sterilizat. În unele cazuri se folosesc substanțe chimice cu un punct de topire specific: benzonaftol (PO °C), acid benzoic (120 °C). Multe medii nutritive, pansamente, lenjerie sunt sterilizate la o presiune de 1 atm timp de 15-20 minute, medii nutritive cu carbohidrați la 0,5 atm timp de 15 minute, iar dezinfectarea materialului infectat se efectuează la 1,5-2 atm timp de 20 -25 min. (Tabelul 7.1.1).
Tabelul 7.1.1. Relația dintre presiune, temperatură și durata sterilizării într-un sterilizator cu abur (autoclavă)
0 100 30-60 (fracțional) 0,5 111 20-30
1 121 15-20 1,5 127 15-20
Sterilizare cu abur efectuat într-o autoclavă cu un capac deșurubat și un robinet de evacuare deschis. Această metodă de sterilizare se bazează pe efectul antibacterian al aburului asupra celulelor vegetative. Se foloseste in cazurile in care materialul de sterilizat nu poate rezista la temperaturi ridicate, precum mediile nutritive cu vitamine, carbohidrati. Pentru decontaminarea completă se utilizează principiul sterilizării fracționate, adică. materialul se sterilizează la 100 "C (sau 80-90 °C) timp de 20-30 de minute timp de 3 zile la rând. În acest caz, celulele vegetative mor, iar sporii rămân și germinează în 1 zi. Încălzire dublă ulterioară asigură o sterilitate suficient de sigură a materialului.
Tindalizare - aceasta este o sterilizare fracționată a materialelor la 56-58 "C timp de 1 oră 5-6 zile la rând. Se folosește pentru sterilizarea substanțelor care se distrug ușor la temperaturi ridicate (ser de sânge, vitamine etc.).
Aprindere în flacără aragaz sau arzător cu gaz
Schimbarea este limitată, de exemplu, pentru sterilizarea anselor bacteriologice, ace de disecție, pensete.
Expunerea la radiații ionizante. Efectul microbicid al radiațiilor ionizante se bazează pe capacitatea acestora de a provoca leziuni în molecula de ADN. Pentru sterilizarea instrumentelor medicale de unică folosință și a echipamentelor bacteriologice sensibile la efectele termice (vase de plastic pentru cultivarea microbilor și a culturilor celulare, seringi de plastic, sisteme de transfuzie de sânge etc.), se utilizează de obicei sterilizarea prin radiații γ.
I. Metode mecanice. Acestea se bazează pe filtrarea prin filtre speciale cu membrană cu pori mici, capabile să rețină mecanic microorganismele. Filtrele din hârtie și polimeri sunt utilizate pe scară largă în practica de laborator. Există filtre cu pori de diferite dimensiuni, strict calibrate, ceea ce vă permite să garantați purificarea materialului nu numai de bacterii, ci și de viruși și, dacă este necesar, de unele macromolecule. Filtrarea este folosită pentru sterilizarea materialelor lichide care nu pot rezista la căldură (ser de sânge, soluții antimicrobiene, componente ale mediilor nutritive pentru bacterii și culturi celulare), pentru a obține toxine bacteriene și alte produse reziduale ale bacteriilor. Filtrarea este metoda principală de sterilizare a aerului atunci când este necesar. Pentru a face acest lucru, aerul este trecut prin filtre impregnate cu microbicide. Astfel de sisteme de sterilizare sunt utilizate, de exemplu, în cutii de birou pentru lucrul cu agenți patogeni ai infecțiilor deosebit de periculoase, precum și în sălile de operație, maternități etc.
III. Metode chimice. Acestea se bazează pe tratarea unui obiect cu substanțe chimice care au efect microbicid și sunt capabile, sub rezerva anumitor moduri de expunere, să asigure distrugerea completă a microflorei. Sterilizarea chimică este de obicei utilizată pentru a procesa diverse dispozitive și instrumente reutilizabile care sunt sensibile la temperaturi ridicate (dispozitive cu fibră optică, implanturi medicale etc.). Agenții de sterilizare includ oxid de etilenă, peroxid de hidrogen, glutaraldehidă, acid peroxiacetic, dioxid de clor.
Indiferent de metodă, monitorizarea regulată a eficacității procedurii de sterilizare este necesară în toate cazurile. În acest scop, se folosesc indicatori biologici - microorganisme cunoscute care sunt cele mai rezistente la această metodă de prelucrare (de exemplu, spori). Bacil stearothermophilus pentru a controla eficiența autoclavării, Bacillus subtilis- pentru controlul sterilizării la căldură uscată). Există și indicatori fizico-chimici - substanțe care suferă vizibil
modificările mele (schimba culoarea, starea de agregare etc.) numai dacă se respectă modul corect de procesare.
Metode de dezinfecție
Pentru dezinfecție se folosesc metode fizice și chimice.
I. Metode fizice. Expunerea la temperaturi ridicate
tur.
Fierbere. Seringile, instrumentele chirurgicale mici, lamele de sticlă și lamele și alte articole sunt plasate în sterilizatoare în care se toarnă apă. Pentru a elimina duritatea și a crește punctul de fierbere, se adaugă în apă o soluție de bicarbonat de sodiu 1-2%. Fierberea se efectuează timp de cel puțin 30 de minute. Când sunt fierte, unii viruși (de exemplu, virusul hepatitei B) și sporii bacterieni rămân viabile.
Pasteurizare bazat pe efectul antibacterian al temperaturii asupra celulelor vegetative, dar nu asupra sporilor bacterieni. Materialul se încălzește la o temperatură de 50-65 "C timp de 5-10 minute, urmat de răcire rapidă. De obicei se pasteurizează băuturile și produsele alimentare (vin, bere, sucuri, lapte etc.).
Expunerea la radiații ionizante. radiații ultraviolete(UV) cu o lungime de undă de 260-300 microni are un efect microbicid destul de pronunțat, totuși, unele tipuri de microbi și spori sunt rezistenți la UV. Prin urmare, iradierea UV nu este capabilă să asigure distrugerea completă a microflorei - sterilizarea obiectului. Tratamentul UV este utilizat de obicei pentru dezinfecția parțială (dezinfectia) a obiectelor mari: suprafețe ale obiectelor, încăperi, aer în instituții medicale, laboratoare microbiologice etc.
Radiația gamma are un efect microbicid pronunțat asupra majorității microorganismelor, inclusiv a formelor vegetative ale bacteriilor și sporilor majorității speciilor, ciupercilor, virusurilor. Folosit pentru sterilizarea vaselor din plastic și a instrumentelor medicale de unică folosință. Trebuie avut în vedere faptul că tratamentul cu radiații gamma nu asigură distrugerea agenților infecțioși precum prionii.
II. Metode chimice. Aceasta este prelucrarea unui obiect dezinfectat
tami - substanțe chimice microbicide. niste
unii dintre acești compuși pot avea efecte toxice
asupra corpului uman, deci sunt folosite exclusiv
Pentru prelucrarea obiectelor externe. Ca dezinfectant
utilizați de obicei peroxid de hidrogen, care conține clor
unitate (0,1-10% soluție de înălbitor, 0,5-5% soluție
cloramină, 0,1-10
% soluție dintr-o sare bazică de două treimi de hipo-
Clorat de calciu - DTSGK), formaldehidă, fenoli (3-5% soluție de fenol, lizol sau acid carbolic), iodofori. Alegerea dezinfectantului și concentrația acestuia depind de materialul de dezinfectat. Dezinfecția poate fi suficientă pentru a decontamina doar instrumentele medicale care nu pătrund în barierele naturale ale organismului (laringoscoape, cistoscoape, ventilatoare). Unele substante (acid boric, mertiolat, glicerina) sunt folosite ca conservanti pentru prepararea serurilor terapeutice si de diagnostic, a vaccinurilor si a altor preparate.
Metode antiseptice
Ca antiseptice, se folosesc numai compuși cu toxicitate scăzută pentru organism care au efect antimicrobian. Cele mai utilizate sunt alcool etilic 70%, soluție de iod 5%, soluție de KMn0 4 0,1%, soluții de alcool 0,5-1% de albastru de metilen sau verde strălucitor, soluție de clorhexidină 0,75-4,0%, soluție de hexaclorofen 1-3% și altele. compuși. Agenții antimicrobieni sunt, de asemenea, adăugați la materialele utilizate la fabricarea pansamentelor, tencuielilor adezive, protezelor dentare, materialelor de obturație și altele asemenea. pentru a le conferi proprietăți bactericide.
Metode de monitorizare a eficacității sterilizării, a acțiunii antiseptice și dezinfectante. Studiul acțiunii antibacteriene a temperaturilor ridicate. Puneți fire de mătase umezite cu un amestec de culturi care formează spori (3 eprubete) și care nu formează spori (3 eprubete) în eprubete cu bulion nutritiv. Se autoclavează sau se fierbe câte un tub cu fiecare cultură; Nu expuneți tuburile de control la niciun impact. După procesare, păstrați toate culturile într-un termostat la 37 ° C timp de 24 de ore.Marcați rezultatul experimentului și trageți o concluzie.
Controlul sterilității pansamentelor și instrumentelor chirurgicale. Probele de testat (sau tampoane de pe suprafața instrumentelor mari) sunt semănate pe trei medii: bulion de zahăr, mediu tioglicol și mediu lichid Sabouraud. Culturile sunt incubate într-un termostat timp de 14 zile. În absența creșterii în toate culturile, materialul este considerat steril.
Studiul acțiunii antibacteriene a razelor UV. Suspendarea stafilococului sau E coliîntr-o soluție izotonică de clorură de sodiu în volum de 1 ml, se așează la o distanță de 10-20 cm de centrul lămpii. Se inoculează suspensiile bacteriene iradiate și neiradiate (de control) în bulion nutritiv și se incubează
la 37 °C timp de 16-24 ore, după care se evaluează rezultatele: absența turbidității mediului se asociază cu moartea culturii bacteriene iradiate, la martor se notează turbiditate, ceea ce indică prezența creșterii.
Determinarea acțiunii antimicrobiene a antiseptice și dezinfectante. 1. Se prepară două tipuri de obiecte de testare: a) fire de mătase înmuiate în cultură E coli; b) fire de mătase umezite cu o cultură formatoare de spori (cu un conținut ridicat de spori). Firele se pun în soluții de fenol (5%), lizol (5%), înălbitor (10%) timp de 5 și 60 de minute, apoi se spală din substanțele testate, se semănează în bulion nutritiv și se pun într-un termostat până a doua zi. . Probele de control nu trebuie expuse la substanțe chimice. Notați rezultatul experimentului și trageți o concluzie.
2. Umeziți discurile de hârtie de filtru cu soluții de substanțe de testat și puneți pe suprafața agarului nutritiv într-o cutie Petri însămânțată (cu gazon) cu o cultură de testare de stafilococ sau Escherichia coli. Incubați vasul timp de 24 de ore la 37°C. Acțiunea antibacteriană a substanțelor studiate se apreciază după diametrul zonelor de inhibare a creșterii bacteriene formate în jurul discurilor.
Subiectul 7.2. METODE DE EVALUAREA EFICIENȚEI ACȚIONĂRII MEDICAMENTELOR ANTIMICROBIENE
Introducere. Antimicrobienele (antibiotice naturale și sintetice) sunt folosite pentru tratarea bolilor cauzate de microorganisme. Pentru o terapie eficientă, este necesar să se selecteze un medicament care are cea mai mare activitate împotriva acestui agent infecțios și are cel mai puțin rău microflorei umane normale. Distribuția largă a tulpinilor bacteriene cu grade diferite de rezistență la multe medicamente (multirezistență) face ca evaluarea calitativă (metoda discului) și cantitativă (metoda diluției în serie) a sensibilității bacteriene la medicamentele terapeutice să fie deosebit de relevantă.
▲ Program
1. Spectrele de acțiune ale principalelor grupe de medicamente antimicrobiene.
2. Evaluarea efectului medicamentelor antimicrobiene asupra bacteriilor prin metoda discului.
3. Determinarea concentrației minime inhibitorii (MIC) a medicamentelor antimicrobiene prin metoda diluțiilor în serie.
DAR. Demonstrație
1. Antimicrobiene de diferite grupe.
2. Discuri de hârtie standard impregnate cu agenți antimicrobieni pentru a determina susceptibilitatea bacteriilor la aceștia.
3. Tabele și schemele spectrelor antimicrobiene ale celor mai importante grupe de antibiotice și mecanismele acțiunii lor antibacteriene.
Temă către studenți
1. Stabiliți un experiment pentru a determina sensibilitatea stafilococilor la diferite antibiotice folosind metoda discului.
2. Pe baza rezultatelor experimentului, se determină concentrația minimă inhibitoare a penicilinei pentru diferite culturi bacteriene prin metoda diluțiilor în serie.
Instrucțiuni
Determinarea cantitativă a sensibilității bacteriilor la medicamentele antimicrobiene prin metoda diluțiilor în serie.Această metodă este utilizată pentru a determina concentrația minimă inhibitorie (MPC) - cea mai mică concentrație a unui antibiotic care suprimă complet creșterea bacteriilor studiate. Se prepară o soluție stoc de antibiotic care conține medicamentul la o anumită concentrație (μg / ml sau U / ml) în soluție fiziologică sau tampon sau într-un solvent special. Soluția stoc este utilizată pentru a prepara diluții în serie (de două ori) ale antibioticului într-un mediu nutritiv - bulion (într-un volum de 1 ml) sau agar. Din cultura bacteriană studiată se prepară o suspensie de densitate standard și se inoculează în 0,1 ml pe medii cu diferite concentrații de antibiotic, precum și pe un mediu fără medicament (controlul culturii). Culturile sunt incubate la 37°C timp de 20-24 ore sau mai mult (pentru bacterii cu creștere lentă), după care rezultatele experimentului se notează pentru tulburarea bulionului nutritiv sau apariția unei creșteri vizibile a bacteriilor pe agar, comparativ cu cu controlul.luat ca IPC.
cea mai mare concentrație de medicament care împiedică dezvoltarea CPP sau acumularea de antigene patogeni în celule este luată ca MIC.
Interpretarea rezultatelor, de ex. evaluarea sensibilității clinice, efectuată pe baza criteriilor prezentate în tabel. 7.2.1. Tulpinile sensibile includ tulpini bacteriene a căror creștere este inhibată la concentrațiile medicamentului găsite în serul sanguin al pacientului atunci când se utilizează doze terapeutice medii de antibiotice. Tulpinile moderat rezistente includ tulpini a căror suprimare a creșterii necesită concentrații care sunt create în serul sanguin atunci când sunt administrate dozele terapeutice maxime ale medicamentului. Microorganismele sunt rezistente, a căror creștere nu este suprimată de medicament la concentrații create în organism atunci când se utilizează dozele maxime admise.
Tabelul 7.2.1. Interpretare rezultatele determinării sensibilității bacteriilor la antibiotice prin metoda diluțiilor în serie
| Antibiotic | CMI (mcg/ml) | ||
| simt- | intermediar | grajd- | |
| corp | exacte | chivy | |
| (S) | (D | (R) | |
| Penicilinele | |||
| Benzilpenicilina: | |||
| pentru stafilococi | 0,12 GBP | - | >0,25 |
| pentru alte bacterii | <1,5 | >1,5 | |
| Oxacilina | |||
| pentru Staphylococcus aureus | <2 | - | >4 |
| pentru alte tipuri de stafilococi | <0,25 | - | >0,5 |
| meticilină | <2 | - | >4 |
| Ampicilină: | |||
| pentru stafilococi | <0,25 | - | >0,5 |
| pentru E coliși alte enterobacterii | <8 | >32 | |
| Carbenicilina: | |||
| pentru E coliși alte enterobacterii | <16 | >64 | |
| pentru Pseudomonas aeruginosa | <128 | >512 | |
| Piperacilină | |||
| pentru E coliși alte enterobacterii | <16 | >64 | |
| pentru Pseudomonas aeruginosa | >64 | - | >182 |
| Azlocilină | <64 | - | >128 |
| Cefalosporine | |||
| Cefazolin | <8 | >32 | |
| Cefalotina | <8 | >32 | |
| Cefaclor | <8 | >32 | |
| Cefalexină | <8 | >32 | |
| Cefuroxima | <8 | >32 |
Continuare
intermediar (D
| Cefamandol | <8 | >32 | ||
| Cefotaxima | <8 | 16-32 | >64 | |
| Ceftriaxonă | <8 | 16-32 | >64 | |
| Cefoperazonă | <16 | >64 | ||
| Ceftazidimă | <8 | >32 | ||
| cefepimă | Noua versiune beta | <8 -лактамы | >32 | |
| Imipenem | <4 | >16 | ||
| Meropenem | <4 | >16 | ||
| Chinolone | ||||
| Acidul nalidixic | SI6 | - | >32 | |
| Ciprofloxacina | <1 | >4 | ||
| Ofloxacina | <2 | >8 | ||
| Norfloxacină | <4 юзиды | >16 | ||
| Aminogli | ||||
| Kanamicină | <16 | >64 | ||
| Gentamicină | <4 | >16 | ||
| tobramicină | <4 | >16 | ||
| Amikacin | <16 | >64 | ||
| Netilmicină | <8 | >32 | ||
| Tetracicline, macrolide, lincosamide | ||||
| Tetraciclină | <2 | 4-8 | >16 | |
| Doxiciclina | <4 | >16 | ||
| Eritromicina | 50,5 | 1-4 | >8 | |
| Azitromicină | <2 | >8 | ||
| Claritromicină | <2 | >8 | ||
| Aleandomicină | <2 | >8 | ||
| Lincomicina | <2 | >8 | ||
| Clindamicina | <0,25 | 0,5 | >1 | |
| Antibiotice din alte grupe | ||||
| Cloramfenicol (leu | omicetina) | <8 | >32 | |
| Acidul fusidic | <2 | 4-8 | >16 | |
| Rifampicina | <2 | >8 | ||
| Polimixină | <50 ЕД/мл | >50 U/ml | ||
| Vancomicina | <4 | 8-16 | S32 | |
| Furadonin | <32 | >128 |
Sisteme de microtestare pentru determinarea sensibilității la medicamentele antimicrobiene. Sistemele de microtestare sunt concepute pentru a determina rapid sensibilitatea clinică la antibiotice a bacteriilor din anumite specii sau grupuri înrudite. Medicamentele testate în concentrații standard sunt în godeurile plăcilor de plastic gata făcute. Se determină sensibilitatea culturii studiate la două concentrații ale fiecărui antibiotic: media terapeutică și maximă. Materialul dintr-o colonie izolată este introdus în 5 ml de mediu nutritiv standard care conține un indicator utilizând o buclă bacteriologică măsurată (volum 1 μl) și se prepară o suspensie. Suspensia bacteriană preparată se toarnă în godeurile tabletei cu 0,1 ml și se incubează în condițiile de temperatură și compoziție gazoasă a mediului care sunt optime pentru acest tip de bacterii. Creșterea bacteriilor este judecată de o schimbare a culorii indicatorului, care poate reduce semnificativ timpul de studiu. Dacă bacteriile rămân viabile în prezența unui antibiotic, eliberarea de produse metabolice duce la o schimbare a culorii indicatorului. Absența schimbării culorii indică suprimarea completă a activității vitale a microbilor. Rezultatele sunt determinate după 4 ore de incubare folosind un spectrofotometru.
Determinarea sensibilității clinice a bacteriilor la medicamentele antimicrobiene prin metoda discului (test de difuzie). Metoda se bazează pe suprimarea creșterii bacteriene pe un mediu nutritiv dens sub acțiunea unui antibiotic conținut într-un disc de hârtie. Ca urmare a difuzării medicamentului în agar, se formează un gradient de concentrație al antibioticului în jurul discului. Mărimea zonei de inhibare a creșterii depinde de sensibilitatea bacteriei și de proprietățile medicamentului (în special, viteza de difuzie în agar). Pentru a determina sensibilitatea în practica clinică, se folosesc discuri standard gata făcute cu un conținut strict definit de antibiotice. Conținutul medicamentului este determinat pe baza concentrațiilor terapeutice ale fiecărui antibiotic și a valorilor medii ale MIC pentru bacteriile patogene. Numele medicamentului și cantitatea acestuia sunt indicate pe fiecare disc. Pentru determinarea sensibilității, din cultura bacteriană studiată se prepară o suspensie care conține un număr standard de celule viabile și se însămânță cu gazon în vase Petri (diametru 100 mm) pe medii Muller-Hinton sau AGV (medii speciale care nu împiedică difuzia substanțe antimicrobiene și nu au un efect negativ asupra acestora). Discurile se aplică pe suprafața însămânțată cu ajutorul unui aplicator la o distanță de 2,5 cm de centrul vasului în cerc (Fig. 7.2.1). Pe cupă nu se pun mai mult de 5 discuri. Culturile sunt incubate timp de 18-20 de ore la 35 C. Dacă procedura este efectuată corect, pe fundalul unui gazon bacterian uniform în jurul discurilor,
Zone de inhibare a creșterii, având o formă rotundă. Contabilitatea rezultatelor se realizează prin măsurarea diametrului zonei de inhibare a creșterii. Pentru zona de măsurat, luați zona în care creșterea bacteriilor este complet absentă. Interpretarea rezultatelor obținute (concluzia despre sensibilitate) se realizează pe baza criteriilor date în tabel. 7.2.2.
Tabelul 7.2.2. Interpretarea rezultatelor determinării sensibilității bacteriilor la antibiotice prin metoda discului (pe mediu AGV)
Penicilinele
| Benzilpenicilina: | ||||
| la testarea stafilococilor | 20 GBP | 21- | -28 | >29 |
| la testarea altor bacterii | 10 GBP | 11- | -16 | 17 GBP |
| Ampicilină: | ||||
| la testarea stafilococilor | <20 | 21- | -28 | 29 GBP |
| când este testat gram negativ | ||||
| bacterii și enterococi | <9 | 10- | -13 | >14 |
| Carbenicilină (25 mcg) | 14 GBP | 15- | -18 | >19 |
| Carbenicilină (100 mcg) la | ||||
| Test P. aeruginosa | 11 GBP | 12- | -14 | 15 GBP |
| meticilină | 13 lire sterline | 14- | -18 | >19 |
| Oxacilină (10 mcg) | $15 | 16- | -19 | 20 GBP |
| Azlocilină (pentru P.aeruginosa) | 13 lire sterline | 14- | -16 | 16 GBP |
| Piperacilină (pentru P.aeruginosa) | <17 | >18 | ||
| Aztreonam | <15 | 16- | -21 | 22 GBP |
Cefalosporine
Continuare
| Antibiotic | Diametru | zone de pirozie | |
| (mm) | |||
| simt- | intermediar | grajd- | |
| corp | exacte | chivy | |
| (S) | (D | (R) | |
| Noi betalactame | |||
| imipenem*<13 | 14-15 | >16 | |
| Meropenem*<13 | 14-15 | >16 | |
| Chinolone | |||
| Ciprofloxacina<15 | 16-20 | >21 | |
| Ofloxacina<12 | 13-16 | >17 | |
| Acid nalidixic*<12 | 13-17 | >18 | |
| Aminoglicozide | |||
| Streptomicină<16 | 17-19 | >20 | |
| Kanamicină<14 | 15-18 | >19 | |
| Gentamicină 15 GBP | - | >16 | |
| Sizomicină<15 | - | >16 | |
| tobramicină<14 | - | >15 | |
| Amikacin<14 | 15-16 | >17 | |
| Netilmicină<12 | 13-14 | >15 | |
| Tetracicline, macrolide, lincosamide | |||
| Tetraciclină<16 | 17-20 | >22 | |
| Doxiciclina<15 | 16-19 | >20 | |
| Eritromicină<17 | 18-21 | >22 | |
| Azitromicină<13 | 14-17 | >18 | |
| Roxitromicină*<14 | 15-18 | >19 | |
| Claritromicină* 13 GBP | 14-17 | >18 | |
| Lincomicina<19 | 20-23 | 24 GBP | |
| Clindamicină 14 GBP | 15-20 | >21 | |
| Oleandomicină 16 GBP | 17-20 | >21 | |
| Antibiotice din alte grupe | |||
| Cloramfenicol<15 | 16-18 | >19 | |
| Acidul fusidic<16 | 17-20 | >21 | |
| Rifampicina<12 | 13-15 | >16 | |
| Polimixină<11 | 12-14 | >15 | |
| Vancomicina: | |||
| pentru stafilococi<11 | - | >12 | |
| pentru enterococi<14 | 15-16 | >17 | |
| Ristomicina<9 | 10-11 | >12 | |
| Furadonin 15 GBP | 16-18 | >19 | |
| Furagin 15 GBP | 16-18 | >19 |
*Date preliminare.
Utilizarea metodei disc are o serie de limitări. Metoda este potrivită doar pentru determinarea sensibilității bacteriilor cu creștere rapidă care formează un gazon omogen în 24 de ore pe un mediu nutritiv dens standard de compoziție destul de simplă (Muller-Hinton sau AGW) care nu conține substanțe care pot reduce activitatea a antibioticelor sau împiedică difuzarea acestora. În caz contrar, informațiile primite vor fi inexacte.
Astfel, metoda discului nu poate fi utilizată pentru a determina susceptibilitatea la antibiotice a tuturor bacteriilor cu creștere lentă și a celor mai exigente, care includ mulți agenți patogeni umani. (Mycobacterium spp., Helicobacter spp., Bacteroides spp., Prevotella spp., Brucella spp., Mycoplasma spp.și multe altele). La determinarea sensibilității unor bacterii pretențioase pentru care au fost dezvoltate teste standard (Haemophilus spp., Neisseria spp., anumite tipuri de streptococi), medii de cultură speciale și criterii suplimentare ar trebui utilizate la interpretarea rezultatelor.
De asemenea, metoda discului nu dă rezultate sigure atunci când se determină sensibilitatea bacteriilor la preparatele care difuzează slab în agar, de exemplu, antibiotice polipeptidice (polimixină, ristomicina).
Determinarea cantitativă a sensibilității bacteriilor la medicamentele antimicrobiene cu ajutorul testului E. E-testul este o variantă a metodei de difuzie care vă permite să determinați MIC al unui antibiotic. În loc de discuri, se folosesc benzi de polimer standard, preparate folosind o tehnologie specială (AB BIODISK) și care conțin agenți antimicrobieni imobilizați aplicați sub formă de gradient de concentrație continuu. Pe cealaltă parte a benzii
Tabelul 7.2.3. Determinarea MIC al antimicrobienelor prin metoda diluțiilor în serie
Testul E are o scară de valori IPC. Când banda este plasată pe suprafața agarului, un proces de difuzie controlată asigură crearea unui gradient de concentrație stabil al medicamentului corespunzător scalei în mediul nutritiv din jurul benzii. Procedura de determinare a sensibilității utilizând testul E se efectuează în mod similar cu testarea prin metoda discului. După incubarea semințelor, în jurul benzii se formează o zonă de inhibare a creșterii eliptice. Valoarea IPC corespunde intersecției zonei eliptice cu banda E-test. Criteriile standard sunt utilizate pentru interpretarea rezultatelor (evaluarea sensibilității clinice) (Tabelul 7.2.3).
ECOLOGIA MICROORGANISMELOR
Introducere. Ecologia microorganismelor este o ramură a microbiologiei generale și studiază relația dintre micro- și macro-organismele care trăiesc împreună în anumite biotopuri. În habitatele naturale (sol, apă, aer, organisme vii), microbii fac parte din diferite biocenoze. Ecologia microbilor care provoacă boli umane este determinată de capacitatea lor de a supraviețui în mediul extern, de a schimba gazdele, de a persista în corpul gazdă pe fundalul acțiunii sistemului imunitar și este, de asemenea, asociată cu metodele de distribuție a acestora, transmitere și o serie de alți factori. Evaluarea unui număr de condiții de mediu este una dintre sarcinile principale ale microbiologiei sanitare.
Cercetarea sanitară și bacteriologică stă la baza muncii practice a medicilor sanitari și epidemiologilor în evaluarea sanitară și igienă a obiectelor de mediu, produselor alimentare, băuturilor etc. și joacă un rol principal în prevenirea bolilor infecțioase. Un obiect important de studiu în microbiologia medicală este microflora normală a corpului uman, care include microbi care trăiesc pe piele, mucoase ale diferitelor organe (cavitatea bucală, faringe, nazofaringe, tractul respirator superior, intestine, în special intestinul gros, etc.). Unii dintre ei sunt permanent (obligatoriu) locuitori ai corpului uman, alții - temporară (opțională sau tranzitorie). Microflora normală este un sistem vital al organismului care oferă protecție împotriva multor microbi patogeni, maturizarea și stimularea sistemului imunitar, producerea unui număr de vitamine și enzime implicate în digestie etc.
Compoziția calitativă și cantitativă a microflorei umane se modifică de-a lungul vieții și depinde de sex, vârstă, dietă etc. În plus, fluctuațiile în compoziția microflorei umane se pot datora apariției bolilor și utilizării medicamentelor, în primul rând antibiotice și imunomodulatoare. . Evaluarea compoziției calitative și cantitative a microflorei corpului uman în funcție de anumiți indicatori face posibilă identificarea încălcării acesteia (disbacterioza) și a consecințelor asociate acesteia.
Subiectul 8.1. MICROFLORA APEI, AERULUI SI SOLULUI. METODE DE STUDIU SANITAR-BACTERIOLOGIC AL APEI, AERULUI SI SOLULUI
g Program
1. Microflora apei, a aerului și a solului.
2. Microorganismele indicative sanitare și semnificația lor.
3. Metode de determinare a indicelui dacă, a titrului și a numărului microbian al apei.
4. Metode de determinare a numărului microbian de aer.
5. Metode pentru determinarea titrului de perfringens, titrului coli și numărului de microbi din sol.
DAR Demonstrație
1. Examinarea sanitară și bacteriologică a apei prin metoda filtrelor cu membrană.
2. Examinarea sanitară și bacteriologică a aerului. aparatul lui Krotov. Creșterea microorganismelor pe MPA într-o cutie Petri. Creșterea streptococilor hemolitici pe agar cu sânge.
3. Studiul sanitar si bacteriologic al solului. Creştere Proteus vulgaris(după Șukevici).
A Temă către studenți
1. Să evalueze starea sanitară și bacteriologică a apei pe baza rezultatelor determinării numărului microbian, indicelui coli și titrului coli.
2. Să evalueze starea sanitară și bacteriologică a aerului pe baza rezultatelor determinării numărului microbian.
3. Aprecierea stării sanitare și bacteriologice a solului pe baza rezultatelor determinării numărului microbian, titrului de coli, titrului de perfringens și titrului bacteriilor termofile.
4. Inoculați o spălare de pe pielea mâinilor pe un mediu de glucoză-peptonă.
▲ Ghid
Metode microbiologice pentru studiul mediului
Pentru evaluarea stării sanitare și igienice a diferitelor obiecte din mediu, apă, alimente etc., se efectuează studii sanitare și bacteriologice, al căror scop este determinarea pericolului epidemic. Cu toate acestea, detectarea directă a microbilor patogeni este asociată cu o serie de dificultăți, în primul rând din cauza concentrației scăzute a acestor microbi, care, de regulă, nu se pot multiplica în aer, apă și sol. Prin urmare, în practica sanitară și microbiologică se folosesc metode indirecte, bazate pe determinarea contaminării microbiene totale a unuia sau altuia obiect și pe detectarea așa-numitelor bacterii sanitar-indicative(Tabelul 8.1.1).
Tabelul 8.1.1. Bacteriile sanitar-indicative ale mediului și alimentelor
| Un obiect | Natura poluării | Bacteriile Indicative Sanitare |
| Apă | fecale | Bacteriile din grupul Escherichia coli Escherichia coli, Citrobacter freundii, Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis |
| Pamantul | La fel | Aceleași bacterii și clostridii (Clostridium perfringens, CI. sporogenes si etc.) |
| Industrial-de zi cu zi- | bacterii termofile, Proteus | |
| vye (gunoi în descompunere) | vulgaris | |
| alimente | fecale | |
| produse | încuietori S. faecalis, P. vulgaris | |
| Picurare orală | Staphylococcus aureus | |
| Articole | fecale | Bacteriile din grupul pasajelor intestinale |
| viata de zi cu zi | încuietori, P. vulgaris, E. faecalis | |
| Picurare orală | S. aureus | |
| Aer | La fel | S. aureus, S. pyogenes |
| Apă, | Industrial | Tulpini de producție de micro- |
| pamantul, | halate | |
| aer |
Microbii sanitar-indicativ, indicativ contaminare fecală mediu, sunt bacteriile din grupul Escherichia coli (CGB). Ei aparțin unor genuri diferite ale familiei Enterobacteriaceae. Semnele diagnostice diferențiale ale BGKP sunt prezentate în tabel. 8.1.2. Detectarea E. coli în orice produs de mediu sau alimentar este considerat cel mai fiabil indicator al contaminării cu fecale proaspete. Prezența bacteriilor Citrobacterși Enterobacter indică o contaminare fecală relativ veche. Prezența Clostridium perfringens, C. sporogens și a altor clostridii în sol indică contaminarea fecală a acestuia, atât proaspătă, cât și veche, deoarece aceste bacterii formează spori, ceea ce le permite să persistă în mediu (în special, în sol) pentru o perioadă de timp. perioadă lungă de timp. Detectarea în obiecte din mediu Enterococcus faecalis indică, de asemenea, contaminarea lor cu fecale. Grupul de bacterii termofile include bacterii neînrudite, reprezentanți ai diferitelor familii care se pot înmulți la o temperatură de 60 ° C și peste. (Lactobacillus lactis, Streptococcus thermophilus si etc.). Nu sunt locuitori permanenți ai intestinului uman și nu servesc drept criterii pentru contaminarea cu fecale a mediului. O creștere bruscă a numărului acestor bacterii poate indica contaminarea solului cu deșeuri în descompunere, deoarece acestea se înmulțesc în gunoi de grajd și compost cu autoîncălzire.
Tabelul 8.1.2. Semne de diagnostic diferențial ale BGKP
Escherichia Amestecați + - +
coli acizi
Citrobacter Același + - p + +
freundii
Enterobacter Butan - - + - + +
aerogene diol
Simboluri: (+) - reacție pozitivă, (-) - reacție negativă, p - diverse reacții.
Bacteriile aparținând genului Proteus (P.vulgaris) etc.) familii Enterobacteriaceae, larg răspândit în natură. Aceste bacterii putrefactive se găsesc în număr mare pe rămășițele în descompunere ale animalelor și plantelor. Detectarea acestor bacterii în orice aliment indică carie putridă.
Streptococi hemolitici (S.pyogenes), fiind locuitori de tranzit ai nazofaringelui și faringelui, sunt excretați cu picături de mucus de către picăturile din aer. Termenii de supraviețuire a streptococilor hemolitici în mediu practic nu diferă de termenii caracteristici majorității altor agenți patogeni ai infecțiilor aeropurtate. Detectarea streptococilor hemolitici în aerul din interior indică o posibilă contaminare a acestuia cu microbii conținuti în faringe, nazofaringe, tractul respirator superior al unei persoane și care sunt agenții cauzatori ai infecțiilor din aer. Staphylococcus aureus este un locuitor opțional al nazofaringelui, faringelui, precum și al pielii umane. Prezența acestuia în aerul interior sau pe obiectele amplasate acolo este un indicator contaminare din aer. Detectarea simultană a Staphylococcus aureus și a streptococilor hemolitici indică un grad ridicat de poluare a aerului.
Examinarea sanitară și bacteriologică a apei
Determinarea numărului microbian al apei. Apa de la robinet se inoculează într-un volum de 1 ml, apa din rezervoare deschise - în volume de 1,0; 0,1 și 0,01 ml. Toate probele sunt introduse în vase Petri sterile, după care se toarnă cu 10-12 ml de topit și se răcesc la 45-50 ° C agar nutritiv, care este atent.
Se amestecă bine cu apă. Culturile sunt incubate la 37 °C timp de 1-2 zile. Apa din rezervoare deschise este inoculată în paralel pe două serii de căni, dintre care una este incubată la 37 °C timp de 1 zi, iar cealaltă timp de 2 zile la 20 °C. Apoi se numără și se calculează numărul de colonii crescute la suprafață și în adâncimea mediului. numărul microbian al apei- numarul de microorganisme in 1 ml.
Determinarea titrului if și indicelui if al apei. Coli-titru apă - cantitatea minimă de apă (ml) în care sunt detectate CGB. Coli-index- cantitatea de BGKP în 1 litru de apă. Acești indicatori sunt determinați prin metoda de titrare (fermentare) sau metoda filtrelor cu membrană.
Metoda de titrare. Se inoculează diferite volume de apă într-un mediu peptonic de glucoză (1% apă peptonă, 0,5% soluție de glucoză, 0,5% soluție de clorură de sodiu, indicator Andrede și un flotor), iar pentru inoculări în cantități mari (100 și 10 ml), un concentrat se foloseste mediu care contine de 10 ori cantitatea acestor substante.
Apa rezervoarelor de suprafață deschisă este examinată în volume de 100; zece; 1,0 și 0,1 ml. Pentru studiul apei de la robinet se fac culturi în trei volume de 100 ml, trei volume de 10 ml și trei volume de 1 ml. Inoculările sunt incubate timp de 1 zi la 37°C. Fermentarea se apreciază după prezența bulelor de gaz în flotor. Probele fermentate sau tulburi sunt cultivate pe mediu Endo. Din coloniile crescute se fac frotiuri, se colorează după metoda Gram și se efectuează un test de oxidază pentru diferențierea bacteriilor genurilor. Escherichia, Citrobacterși Enterobacter din bacterii gram-negative din familia Pseudomonadaceae și alte bacterii oxidazo-pozitive care trăiesc în apă. În acest scop se îndepărtează de pe suprafața mediului 2-3 colonii izolate cu o baghetă de sticlă, aplicată cu o lovitură pe hârtie de filtru umezită cu di-metil-p-fenilendiamină. Cu un test de oxidază negativ, culoarea hârtiei nu se schimbă, cu unul pozitiv, devine albastră în 1 min. Bacioanele gram-negative care nu formează oxidază sunt din nou examinate într-un test de fermentație - sunt introduse în agar nutritiv semi-lichid cu 0,5 % soluție de glucoză și incubată la 37 °C timp de 1 zi. Dacă rezultatul este pozitiv, dacă titrul și dacă indicele este determinat conform tabelului statistic. 8.1.3.
Metoda filtrului cu membrană. Filtrul cu membrană nr. 3 este plasat într-o pâlnie Seitz montată într-un balon Bunsen, care este conectat la o pompă de vid. Filtrele cu membrană sunt presterilizate prin fierbere în apă distilată. Apa din reteaua de alimentare cu apa si apa din fantanile arteziene se filtreaza intr-un volum de 333 ml. Apa curată dintr-un rezervor deschis este filtrată într-un volum de 100, 10, 1,0 și 0,1 ml, mai multă apă contaminată este diluată cu apă sterilă înainte de filtrare.
Tabelul 8.1.3. Determinarea indicelui de bacterii din grupul Escherichia coli în studiul apei
Coli-titru
din 3 volume de 100 ml
apă. Apoi filtrele sunt plasate pe suprafața mediului Endo în vase Petri, iar după incubare la 37°C timp de 1 zi, se numără numărul de colonii crescute tipice CGB-urilor. Se prepară frotiuri din 2-3 colonii roșii, colorate după metoda Gram și se determină activitatea oxidazei. Pentru a face acest lucru, filtrul cu colonii de bacterii crescute pe el este transferat cu o pensetă, fără a se întoarce, pe un cerc de hârtie de filtru umezită cu dimetil-p-fenilendiamină. În prezența oxidazei, indicatorul transformă colonia în albastru. 2-3 colonii care nu și-au schimbat culoarea inițială sunt inoculate într-un mediu semi-lichid cu soluție de glucoză 0,5%. Culturile sunt incubate timp de 24 de ore la 37°C. În prezența formării gazelor, se numără numărul de colonii roșii de pe filtru și se determină indicele coli. Indicatorii de reglementare pentru apa potabilă sunt prezentați în tabel. 8.1.4.
Tabelul 8.1.4. Standarde pentru apă potabilă (GOST 2874-82)
| standard |
Indicator
Numărul de microbi în 1 ml de apă, nu mai mult de 100
Numărul de bacterii din grupul Escherichia coli într-un litru de apă 3
(dacă-index), nu mai mult
Pentru a determina titrul Enterococcus faecalis se prepară diluții de apă de 10 ori. Apa întreagă și diluțiile sale într-un volum de 1 ml sunt inoculate într-unul dintre mediile elective lichide (KF, poli-
Mixinovaya etc.), incubate la 37”C timp de 2 zile, după 24 și 48 de ore se însămânță pe medii dens elective-diferențiale: agar KF, agar TTX (mediu cu clorură de trifeniltetrazolium), agar polimixintellurit. Se identifică streptococi. la tipul coloniilor, morfologia celulară și colorarea după metoda Gram. Pe mediul cu TTX, streptococii formează colonii roșu închis, pe agar cu telurit - negru.
Compoziția mass-media. Mediu KF: 2% agar nutritiv, 1% extract de drojdie, 2% lactoză, 0,4% azidă de sodiu, 0,06% carbonat de sodiu, indicator roșu de bromcrezol.
Mediu polimixină: agar nutritiv 2%, extract de drojdie 1%, glucoză 1%, polimixină M 200 unități/ml, indicator albastru de bromtimol.
Agar polimixintellurit: agar nutrient 2%, extract de drojdie 1%, glucoză 1%, violet cristal 1:800.000, polimixină M 200 U/ml, telurit de potasiu 0,01%.
Agar clorură de trifeniltetrazoliu (TTC): 2% agar nutrient, 1% extract de drojdie, 1% glucoză, cristal violet 1:800.000, 0,01% TTC.
La definirea unui index E.faecalis utilizați tabelele statistice utilizate la stabilirea indicelui coli. În plus, metoda filtrului cu membrană este utilizată în acest scop. Pentru a detecta bacteriile patogene, apa este trecută prin filtre cu membrană, care sunt apoi plasate în medii elective lichide sau pe suprafața mediilor dense de diagnostic diferențial.
Examinarea sanitară și bacteriologică a aerului
Determinarea numărului microbian de aer. Metodele microbiologice cantitative pentru studierea aerului se bazează pe principiile sedimentării (sedimentării), aspirației sau filtrării.
metoda de sedimentare. Două vase Petri cu agar nutritiv sunt lăsate deschise timp de 60 de minute, după care culturile sunt incubate într-un termostat la 37 ° C. Rezultatele sunt evaluate prin numărul total de colonii crescute pe ambele vase: dacă există mai puțin de 250 de colonii, aerul este considerat curat; 250-500 de colonii indică o poluare de grad mediu, cu numărul de colonii peste 500 - poluate.
metoda aspiratiei. Aceasta este o metodă cantitativă mai precisă pentru determinarea numărului microbian al aerului. Semănarea aerului se realizează cu ajutorul dispozitivelor. Aparatul lui Krotov (Fig. 8.1.1) este proiectat în așa fel încât aerul să fie aspirat cu o viteză dată printr-o fantă îngustă a unei plăci de plexiglas care închide vasul Petri cu agar nutritiv.
Fig.8.1.1. Aparatul Krotov pentru cercetare bacteriologică
În același timp, particulele de aerosoli cu microorganisme conținute pe ele sunt fixate uniform pe întreaga suprafață a mediului datorită rotației constante a cupei sub fanta de admisie. După incubarea semănării într-un termostat, numărul microbian este calculat conform formulei:
a x 1000 x~y
unde a este numărul de colonii crescute pe placă; V este volumul de aer trecut prin dispozitiv, dm 3; 1000 - volum de aer standard, dm 3.
La determinarea numărului microbian de aer, agar nutrient este utilizat pentru izolarea streptococilor hemolitici - agar sânge cu adaos de violet de gențiană, urmat de microscopie de control și subcultura selectivă a coloniilor suspecte pe agar sânge.
Compoziția mass-media. Agar cu sânge violet de gențiană: 2% agar nutrient, 5-10% sânge defibrinat de cal, iepure sau berbec, violet de gențiană (1:50.000).
Agar cu sare de gălbenuș (YSA): 2% agar nutritiv, 10% clorură de sodiu, 20 % (după volum) suspensie de gălbenuș (1 gălbenuș de ou la 200 ml soluție izotonică de clorură de sodiu).
Alte dispozitive pot fi, de asemenea, folosite pentru a studia aerul (Dyakov, Rechmensky, Kiktenko, PAB-1 - eșantionare -
Nick aerosol bacteriologic, POV-1 - un dispozitiv pentru prelevarea de probe de aer), cu ajutorul căruia un anumit volum de aer este trecut prin lichide sau filtre, iar apoi se fac culturi măsurate pe medii nutritive. Utilizarea PAB-1 și POV-1 face posibilă examinarea unor volume mari de aer și detectarea bacteriilor și virușilor patogene.
La examinarea aerului spitalelor (chirurgicale, obstetrico-ginecologice etc.), se izolează direct bacteriile patogene și oportuniste - agenți cauzatori ai infecțiilor nosocomiale (stafilococi, Pseudomonas aeruginosa etc.). În cazul infecțiilor nosocomiale de etiologie stafilococică, se efectuează studii care vizează identificarea surselor și modalităților de răspândire a infecțiilor: prin tiparea fagică se determină identitatea stafilococilor izolați din obiectele din mediu, precum și de la pacienți și însoțitori. Indicatori standard ai numărului și conținutului microbian Staphylococcus aureus, Capitolul 2. Asistența socială de stat acordată sub forma asigurării cetățenilor cu un set de servicii sociale 10 pag.
Sterilizarea - (din lat. Defertilitate) - este distrugerea completă a m/o și a sporilor acestora prin influența atât a factorilor fizici, cât și a preparatelor chimice. Sterilizarea se efectuează după dezinfecția cu PSO și controlul calității PSO. Sterilizarea este cea mai importantă verigă, ultima barieră în prevenirea infecțiilor nosocomiale în unitățile sanitare. Protejează pacientul de orice infecție.
Documente care reglementează metodele de sterilizare.
Trebuie reținut că pentru a efectua sterilizarea este necesar să cunoașteți și să puteți aplica legi, instrucțiuni, reguli și alte documente instructive și metodologice în domeniul siguranței infecțioase. În prezent este în vigoare standardul industriei (rest. 42-21-8-85, care definește metodele, mijloacele și modurile de sterilizare și dezinfecție a dispozitivelor medicale, care este completat de ordinul nr. 408 „Orientări metodologice de dezinfecție, PSO și sterilizare, consumabile medicale" , aprobat de Ministerul Sănătății al Rusiei la 30 decembrie 1998. Nr. MU-287-113. Aceste documente sunt obligatorii și definitorii pentru toate unitățile sanitare și oferă o gamă largă de mijloace și metode cele mai potrivite pentru conditiile acestei facilitati.cu sange sau preparate injectabile si anumite tipuri de instrumente medicale care vin in contact cu mucoasele in timpul functionarii pot produce deteriorarea acestora.
Metodele de sterilizare fac distincție între:
- fizică(termic): abur, aer, glasperleny;
- chimică: gaze, chimicale, radiatii;
- plasma si ozon(un grup de substanțe chimice).
Alegerea uneia sau alteia metode de sterilizare depinde de proprietățile obiectului și de metoda în sine - avantajele și dezavantajele acesteia. Produsele ambalate sunt sterilizate în sisteme descentralizate sau centralizate, precum și în întreprinderile industriale care produc dispozitive medicale de unică folosință. Produsele fără ambalaj se sterilizează doar cu un sistem de sănătate descentralizat. Metodele de sterilizare cu abur și aer sunt cele mai comune în unitățile de asistență medicală.
Sterilizatoare: abur, aer, gaz.
Metoda cu abur:
Fiabil non-toxic, ieftin, asigură sterilitatea nu numai a suprafeței, ci a întregului produs. Se efectuează la o temperatură relativ scăzută, are un efect blând asupra materialului prelucrat, permițând sterilizarea produselor din ambalaj, prevenind astfel riscul de recontaminare a m/o.
Agentul de sterilizare în această metodă este abur de apă saturată sub presiune.
Moduri de sterilizare:
Mod 1 (principal) - t 132 0, 2 atm., 20` - este destinat produselor din calico grosier, tifon, sticla, inclusiv seringi marcate "200 0 C", produse din metal rezistent la coroziune.
Mod 2 (blând) - t 120 0, 1,1 atm., 45` - recomandat pentru produse din cauciuc subțire, latex, polietilenă de înaltă densitate.
Al 3-lea mod - t 134 0 , 2 atm., 5`.
Conditii de sterilizare: toate produsele sterilizate cu abur sub presiune, ambalaje pre-place - cutii de sterilizare (bixes sau containere). Cu sau fără filtre, pungi kraft și alte ambalaje concepute pentru sterilizarea cu abur.
Perioada de valabilitate a produselor sterilizate depinde de ambalaj:
Produse sterilizate in cutii de sterilizare fara filtru (CS) - 3 zile (72 ore);
În cutii de sterilizare cu filtru (CF) - până la 20 de zile, sub rezerva unei schimbări lunare a filtrelor;
În ambalaj dublu moale din țesătură de bumbac, hârtie kraft - 3 zile. (72 ore).
Dezavantajele metodei:
Provoacă coroziunea instrumentelor din metale instabile;
Transformându-se în condens, hidratează produsele sterilizate, îmbunătățind astfel condițiile de depozitare și crescând riscul de recontaminare a m/o.
metoda aerului.
Agentul de sterilizare este aer cald uscat. O caracteristică distinctivă a metodei este că nu există umezirea ambalajului și a produselor și reducerea asociată a perioadei de sterilitate, precum și coroziunea metalelor.
Moduri de sterilizare:
Mod 1 (principal) - t 180 0 - 60 min. - destinat sterilizării produselor din sticlă, inclusiv a seringilor marcate „200 0 C”, a produselor din metal, inclusiv a metalelor rezistente la coroziune.
Mod 2 (blând) - t 160 0 - 150 min. - este destinat sterilizarii produselor din cauciuc siliconic, precum si a pieselor unor aparate si aparate.
Conditii de sterilizare: produsele sunt sterilizate fara ambalare pe plase ambalate in hartie de ambalaj care indeplineste cerintele standardului actual al industriei.
Dezavantajele metodei:încălzirea lentă și neuniformă a produselor sterilizate; necesitatea de a folosi temperaturi mai ridicate; imposibilitatea utilizării pentru sterilizarea produselor din cauciuc, polimeri; imposibilitatea de a utiliza toate materialele de ambalare disponibile.
Note: produsele uscate sunt supuse sterilizării; produse sterilizate în pungă kraft, ambalare fără hârtie umedă, depozitare - 3 zile. (72 ore); într-un pachet cu 2 straturi de hârtie creponată pentru miere. obiective - până la 20 de zile; produsele sterilizate fara ambalaj trebuie folosite imediat dupa sterilizare in timpul schimbului de lucru (6 ore) in conditii aseptice.
Metoda Glasperlen. Instrumentele dentare și cosmetice din metal sunt sterilizate prin scufundarea mărgele de sticlă încălzite la 190-250 0 în mediu.
Timpul de procesare este indicat în instrucțiunile de utilizare a sterilizatorului specific.